时庆
- 作品数：164 被引量：608H指数：12
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学一般工业技术更多>>
- 兔骨髓间充质干细胞的生物学特征及其对不同生长因子的反应被引量：6
- 2006年
- 为了研究兔骨髓间充质干细胞(rBM-MSC)的生物学特征及其对不同生长因子的反应,使用贴壁培养法从兔骨髓单个核细胞中获得间充质干细胞(MSC),在光学显微镜和电子显微镜下观察其基本生长行为和生物学特征;使用流式细胞仪检测rBM-MSC的免疫学表型;RT-PCR法检测其胶原表达;诱导rBM-MSC多向分化并使用特异性染色和RT-PCR予以鉴定;最后使用MTT法检测IL-1、3、8和HGF对rBM-MSC生长增殖的影响。结果显示:贴壁生长的rBM-MSC具有典型的成纤维样细胞形态,可传15代以上,第5代rBM-MSC高表达基质受体CD44(32%),低表达造血细胞标记CD45(4.7%);RT-PCR显示高表达I型胶原,弱表达II型胶原,不表达X型胶原;在不同的诱导条件下,rBM-MSC可被诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和神经元样细胞。rBM-MSC对IL-3最为敏感,10ng/ml的低浓度IL-3可显著促进细胞增殖达32%以上(P<0.01),而高浓度IL-3能显著抑制其生长。结论:分离培养了rBM-MSC,其生物学特征与人和猕猴等BM-MSC相似的生物学特性,低浓度IL-3可有效促进其增殖。
- 李栋沈柏均侯怀水时庆张乐玲马秀峰
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 造血细胞生长因子FL变化在胚胎期造血中的临床意义
- 2004年
- 目的 检测胎盘绒毛组织及脐血中造血细胞生长因子酪氨酸激酶受体 3(Flt3)配体 (FL )开始出现的时间及其随胎龄增长的含量变化 ,探讨其在胚胎期造血中的意义。方法 分别取妊娠早期 (6～ 8周 )、妊娠中期(16～ 2 2周 )、妊娠晚期 (37～ 4 2周 )胎盘绒毛组织 2 g各 30份、脐血清 30份 ,采用酶联免疫吸附法测定上清液中的 FL 含量。结果 1早期妊娠开始 FL 已产生 ;其含量随着胎龄增加而逐渐增加 ,各胎龄组间比较有显著性差异(P<0 .0 1)。2 FL 在胎盘和脐动静脉血中的含量有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 FL 来源于胎盘 。
- 徐海燕姚慧沈柏均蔡金光时庆
- 关键词：胚胎期造血
- 大鼠胎血间充质干细胞的体外扩增及诱导分化为神经元样细胞的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:研究大鼠胎血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分离、扩增及向神经元样细胞分化的可能性,为进一步的动物实验研究打下基础。方法:无菌条件下采集15只孕20 d大鼠的胎血,Ficoll-hypague分离液分离出单个核细胞(mononuclear cells, MNCs)后,置于含10%胎牛血清的DMEM/LG培养传代。细胞化学染色法检测MSCs的细胞化学特征,流式细胞仪检测其免疫表型。取扩增第5代的MSCs向神经元样细胞定向诱导,免疫细胞化学法鉴定其特异性标志。结果:大鼠胎血MSCs可大量扩增,细胞化学染色示其α-丁酸萘酚酯酶(NBE)阳性,碱性磷酸酶(ALP)阴性,流式细胞仪检测显示其表达CD44、CD54,不表达CD11b、CD45。诱导后MSCs形态学观察类似于神经元,免疫细胞化学检测发现其巢蛋白(Nestin)和特异性烯醇化酶(NSE)阳性,胶原纤维酸性蛋白(GFAP)阴性。结论:大鼠胎血能够分离、扩增培养出MSCs,在适当条件下可向神经元样细胞定向诱导分化,大鼠胎血可作为MSCs的来源进一步做动物实验。
- 黄志伟鞠秀丽侯怀水时庆
- 关键词：胎血间充质干细胞神经元样细胞
- 哮喘患者白细胞介素(IL)-12和IL-13的变化及糖皮质激素对其的影响被引量：12
- 2003年
- 目的 观察哮喘患者血清中白细胞介素 (IL) 12和IL 13水平的变化及糖皮质激素对其的影响。方法 采用ELISA法分别检测中度哮喘急性发作期患者 (2 5例 )口服泼尼松治疗 1周前后、缓解期患者 (2 0例 )和健康对照组者 (15例 )血清中IL 12和IL 13水平 ,并同时测 1秒钟用力呼气容积(FEV1)占预计值的百分比和气道阻力 (R5)占预计值的百分比。结果 IL 12水平急性发作期治疗前[(5 8 5± 14 2 )ng/L]较缓解期 [(71 3± 16 2 )ng/L]为低 (P <0 0 5 ) ,与健康对照组 [(85 5± 13 1)ng/L]、急性发作期治疗后 [(79 3± 19 1)ng/L]比较 ,差异均有显著性 (P <0 0 1)。IL 13水平急性发作期治疗前 [(131 3± 2 8 4 )ng/L]较缓解期 [(113 1± 2 6 5 )ng/L]为高 (P <0 0 5 ) ,与健康对照组 [(92 3± 14 4 )ng/L]、急性发作期治疗后 [(84 1± 19 8)ng/L]比较 ,差异均有显著性 (P <0 0 1)。FEV1占预计值的百分比下降和R5占预计值的百分比升高 (P <0 0 1)。直线相关分析表明 ,血清中IL 12与FEV1占预计值的百分比呈正相关 (r=0 4 85 ,P <0 0 5 ) ,与R5占预计值的百分比呈负相关 (r =- 0 5 16 ,P<0 0 5 ) ,与IL 13呈负相关 (r =- 0 5 4 9,P <0 0 1) ;IL 13与FEV1占预计值的百分比呈负相关 (r =- 0 4 93,P
- 王玲张霞薛玉文李玉时庆刘春红
- 关键词：哮喘白细胞介素12白细胞介素13糖皮质激素
- 脐血巨核系造血祖细胞的初步研究
- 1995年
- 用甲基纤维素法培养１５例新生儿脐血巨核系造血祖细胞（ＣＦＵ－Ｍｅｇ），观察了ＣＦＵ－Ｍｅｇ的生长特性、集落产率与接种细胞数的相关性，并与成人骨髓及外周血ＣＦＵ－Ｍｅｇ的数量进行了比较。结果表明，脐血中富含ＣＦＵ－Ｍｅｇ，且分裂快、子代细胞多，形成集落早呈现活跃的增殖状态，其数量低于成人骨髓但个体间差异明显，２６．７％的样本ＣＦＵ－Ｍｅｇ产率高于骨髓。接种细胞数量与ＣＦＵ－Ｍｅｇ的产率在一定范围内呈良好的线性关系。
- 侯怀水沈柏均张洪泉时庆隋星卫王正起
- 关键词：脐血巨核细胞系造血祖细胞
- 脐血红细胞免疫功能的研究
- 1997年
- 测定了脐血红细胞免疫Ｃ３ｂ受体花环率、免疫复合物花环率、血清红细胞Ｃ３ｂ花环促进率、血清红细胞Ｃ３ｂ花环抑制率和肿瘤红细胞免疫花环率。结果表明：脐血红细胞免疫复合物花环率明显高于成年人，血清红细胞Ｃ３ｂ花环促进率和肿瘤红细胞免疫粘附花环率明显低于成年人，脐血红细胞Ｃ３ｂ受体花环率和Ｃ３ｂ花环抑制率与成年人无明显差异。
- 时庆沈柏均侯怀水
- 关键词：脐带血红细胞免疫细胞功能
- 腰神经根慢性损伤后背根神经节电生理与细胞内钙离子浓度变化的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨受损背根神经节 (DRG)神经元异位自发放电与细胞内Ca2 + 浓度改变的关系。方法 纯种成年新西兰大白兔 3 2只 ,随机分为正常组、损伤 10d组、损伤 3 0d组、损伤 90d组 ,建立模拟腰椎间盘突出的兔腰神经根慢性损伤模型 ,于损伤后 10d、3 0d、90d应用在体电生理技术记录损伤DRG异位电活动的改变 ,应用激光共聚焦扫描显微镜技术结合荧光染色法检测受损DRG神经元细胞内Ca2 + 荧光强度变化。结果 ①兔腰神经根慢性损伤后 ,受损DRG神经元异位自发放电频率和幅度随损伤时间延长而逐渐下降 ,损伤各组与正常组相比 ,DRG放电频率、放电幅度均显著增高 (P <0 .0 5 ) ;②兔腰神经根慢性损伤后受损DRG细胞内Ca2 + 浓度呈现不同程度的增高 ,随着损伤时间的延长 ,Ca2 + 浓度有下降趋势。结论 Ca2 + 与受损神经元的异位电活动的发生及变化相关 ,Ca2 + 浓度升高可导致受损神经元异位电活动的发生及传播。
- 郄淑燕岳寿伟潘博时庆侯怀水康乐
- 关键词：腰神经根慢性损伤自发放电放电频率
- 老年人载脂蛋白E表型多态性的临床研究被引量：1
- 2002年
- 高海青杨君莉张志勉时庆陈焕芹孙永乐王秀花
- 关键词：老年人高血压
- TGF-β1对hUC-MSC增殖、细胞外基质表达和基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 本研究探索转化生长因子-β1(TGF-β1)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)增殖、细胞外基质(ECM)表达和基因表达的影响。采用植块法从人脐带中分离、培养hUC-MSC并进行表型鉴定,用WST法检测不同浓度的TGF-β1对hUC-MSC增殖的影响,利用qRT-PCR和免疫组织化学方法检测不同浓度的TGF-β1对hUC-MSC细胞外基质表达的影响,利用表达基因芯片技术检测hUC-MSC在TGF-β1作用下基因表达谱的变化。结果表明,细胞增殖实验中0.1-20.0 ng/ml TGF-β1浓度条件下培养24、48和72小时,hUC-MSC增殖能力变化均不显著,但在0.1 ng/ml组均会出现相对峰值。0.5 ng/ml的TGF-β1促进Col-Ⅰ、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA表达达到峰值;而0.1 ng/ml的TGF-β1促进其它成分:Col-Ⅳ、FN、LN、Integrin、Tenascin-C、MMP-1和TIMP-1的mRNA表达达到峰值。0.5和0.1 ng/ml的TGF-β1分别促进Col-Ⅰ和Col-Ⅳ少量表达,均促进FN强烈表达,但均不能使LN明显表达。基因芯片结果显示,在上调基因中有9个基因与细胞运动、迁移相关;Pathway和Go的统计分析显示,差异基因涉及转录、翻译、生物合成、代谢、信号转导、细胞迁移、细胞间连接等多方面。结论:0.1 ng/ml的TGF-β1能较好地促进hUC-MSC的生长。不同浓度的TGF-β1能分别促进ECM不同成分表达,TGF-β1对hUC-MSC的转录、翻译、生物合成、代谢、信号转导、细胞迁移、细胞间连接等多方面在基因水平上具有调节作用。
- 赵洁李栋时庆汪大琨鞠秀丽
- 关键词：脐带间充质干细胞转化生长因子-Β1细胞外基质基因表达谱
- 胎血间充质干细胞移植对脑卒中大鼠的治疗作用
- 2006年
- 间充质干细胞（MSCs）是可从人骨髓、外周血、肌肉、胎肝、脐带血中分离获得的非造血干细胞，能分化成脂肪细胞、成骨细胞、神经元和肝细胞等多胚层组织细胞。本研究试图经尾静脉注射胎血MSCs给大脑中动脉栓塞模型（MCAO）大鼠，探讨其在脑内存活、迁徙、分化情况及其对神经功能改善的可能作用。报告如下；
- 黄志伟鞠秀丽魏欣冰侯怀水时庆李栋
- 关键词：间充质干细胞移植胎血脑卒中神经功能改善造血干细胞
