戚正武
- 作品数：84 被引量：224H指数：8
- 供职机构：同济大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 神经营养因子-3 cDNA的克隆以及在酿酒酵母中的分泌性表达被引量：2
- 1998年
- 从原代培养人许旺细胞申提取总RNA，用RT－PCR方法获取了编码带向导肽和成熟的NT-3两个cDNA片段，经DNA序列测定表明其顺序与文献报道一致。将这两个cDNA片段克隆到大肠-酵母穿梭质粒pVT102U／α上。用酵母整体细胞法将重组质粒转化酵母宿主细胞，经筛选后，获得分泌性表达。这两种cDNA片段的表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定，大小都在15ku左右，说明带前导肽的NT-3在酵母细胞中获得了正确的加工。将这两种部分纯化的NT－3样品经鼠胚背根神经节生物活性分析，表明具有明显的促进细胞存活和突起生长的作用。人神经营子-3％在酿酒酵母系统获得有生物活性的表达。
- 刘志敏王笑辛蓝正道谢志伟戚正武朱诚
- 关键词：神经营养因子分泌性表达酿酒酵母CDNA
- 牛碱性成纤维细胞生长因子在酵母系统中的表达被引量：2
- 1996年
- 牛碱性成纤维细胞生长因子在酵母系统中的表达方向东陈淳谢志伟耿解萍王小宁戚正武（中国科学院上海生物化学研究所国家分子生物学实验室上海２０００３１）碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）是ＦＧＦ家族...
- 方向东陈淳谢志伟耿解萍王小宁戚正武
- 关键词：BOVINEFIBROBLASTFACTORSYEASTGENE
- 产生凝血因子Ⅷ的生产方法和宿主细胞
- 本发明提供了一种新的重组凝血因子VIII、及其生产方法以及作为治疗甲型血友病的药物组合物。更具体地说，本发明涉及人源凝血因子VIII基因的改建，使其在哺乳动物细胞表达体系中的表达量增加。本发明还提供了含该凝血因子的药物组...
- 戚正武王琪陈淳方向东王丽秀
- 文献传递
- 新家族芋螺毒素的发现与研究
- ＜正＞目的:芋螺毒素是一类富含二硫键的多肽神经毒素,能特异性地作用于神经系统的各种离子通道、神经递质受体或转运体等重要的神经信号传递分子。芋螺毒素的种类繁多,结构超变异,而且经常有很高的特异性,所以是理论研究和药物研发等...
- 刘丽韩禹宏袁多多蒋辉王琪王春光戚正武
- 文献传递
- 中国南海芋螺毒素的研究
- 芋螺毒素是芋螺(Conus)在长期进化过程中形成的一套非常精密的神经药物学武器，用于捕食和防御，它们多数由12～46个氨基酸残基所组成，大多数含两对或三对二硫键。它们主要作用于细胞膜上各种离子通道以及神经递质和激肽的受体...
- 蒋辉韩禹宏王琪陈冀胜戚正武
- 关键词：芋螺毒素神经药物离子通道神经递质毒素基因
- 文献传递
- 壳聚糖酶的纯化、基因克隆、及其酶学特性的鉴定被引量：7
- 2008年
- 从被污染的酵母培养液中分离到一菌株,经鉴定为一种革兰氏阳性杆菌,其所分泌的主要蛋白产物经纯化后,测定了它的N-端氨基酸序列,与已知的几种内切壳聚糖酶十分类同。根据其同源DNA序列,通过PCR方法克隆了其全长基因。该菌株生长极快,其组成型分泌产物主要为内切壳聚糖酶。该酶通过疏水层析和分子筛两步即得到纯化。进一步研究了该酶的酶学性质及其催化壳聚糖降解为壳寡糖的条件。提高该壳聚糖酶的产率后,有望用于壳寡糖的生产,有实际应用价值。
- 徐瑞郭占云戚正武
- 关键词：壳聚糖酶壳聚糖壳寡糖分离纯化
- 绿豆胰蛋白酶抑制剂片段及其类似物的合成被引量：8
- 1994年
- 绿豆胰蛋白酶抑制剂的Lys活性碎片由两条分别含有26及9个氯基酸残基的多肽链通过两对分子间二硫键连接而成。用DTT还原能拆分两链,其中长链含6个半胱氨酸,在空气中氧化后能恢复25％原Lys碎片活力。本文报道了此长链的化学合成和二硫键重组。合成产物的氯基酸组成与文献报道的一致。但活性明显低于天然产物。为此对绿豆抑制剂的部分序列重新进行测定,结果表明原P_2′位的Lys应为Ile按新测定序列,从长链26肽的N端和C端各去掉两个残基合成一个22肽,此22肽的活性与天然的26肽相当。此外还合成了此22肽的类似物,其活性中心的Lys残基由Ala取代,产物对胰蛋白酶和弹性蛋白酶都无抑制活力。
- 李一莉林晓红崔大敷唐有祺戚正武
- 关键词：多肽绿豆胰蛋白酶抑制剂
- 人凝血因子Ⅷ cDNA体外真核表达的初步研究被引量：5
- 1998年
- 目的：建立人凝血因子ⅧｃＤＮＡ体外真核高效表达的体系。方法：将人ＦⅧＢ区大部分缺失（Δａ７６０１６３９）的ＦⅧｃＤＮＡ插入ｐＣＩ真核表达载体、ｐＧＲＥ５．２／ＥＢＶ载体和逆转录病毒载体ｐＭＳＣＶ，构建了５种表达框架，在体外转染和感染了多种靶细胞。结果：ｐＣＩⅧ在ＮＩＨ３Ｔ３细胞产生了低水平表达，而ｐＧＲＥ５．２／ＥＢＶⅧ和ｐＭＳＣＶⅧ系列分别在Ｈｅｌａ细胞和Ｂｏｓｃ２３逆转录病毒包装细胞中呈较高水平的表达。Ｂｏｓｃ２３细胞培养上清感染的ＮＩＨ３Ｔ３和３２ＤＣ不能有效地产生ＦⅧ。结论：在ＦⅧ体外表达及基因治疗的方案设计中，靶细胞的选择是一重要因素。
- 诸江王鸿利于立志王学锋郭为民陈赛娟戚正武王振义陈竺
- 关键词：基因表达真核表达CDNA血友病A
- Antagonistic effect of orphanin FQ on opioid analgesia in rat被引量：4
- 1998年
- 目的：研究孤啡肽（ＯＦＱ）对痛与阿片镇痛的影响．方法：脑室（ｉｃｖ）与鞘内（ｉｔｈ）给药，以大鼠甩尾模型测痛．结果：小剂量ＯＦＱ（０１μｇ）ｉｃｖ及ｉｔｈ给药对痛反应均无影响；较大剂量ＯＦＱ（０５－１０μｇ）可使痛反应增强．ＯＦＱ１－１０（ＯＦＱ的一个片段）ｉｃｖ对痛反应无影响．μ受体激动剂芬太尼（１μｇ）、δ激动剂ＤＳＬＥＴ（５μｇ）ｉｃｖ或ｉｔｈ给药，以及κ激动剂Ｕ５０４８８Ｈ（１μｇ）ｉｔｈ给药，可使痛阈明显增加．０１μｇ或１μｇＯＦＱ与上述药物合用后，痛阈增加明显减少（除鞘内与ＤＳＬＥＴ合用外）．结论：ＯＦＱ可增强大鼠的痛反应，在脑内对抗由μ和δ受体介导的阿片镇痛，在脊髓对抗由κ和μ但不是由δ受体介导的镇痛．
- 朱崇斌张秀琳许绍芬曹小定曹小定李默漪吴根诚戚正武
- 关键词：阿片
- 逆转录病毒载体介导人凝血因子Ⅷ在哺乳细胞中的高效表达(英文)
- 2001年
- 目的 建立逆转录病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ (FⅧ )体外高效表达体系。方法 将一B区缺失 (76 0aa～ 16 39aa)的人FⅧcDNA(FⅧcDNABD)克隆至逆转录病毒载体pLNCX ,构建了重组表达载体LNC ⅧBD。经PA317细胞包装后 ,感染多种靶细胞。分别采用一期法、ELISA法和RT PCR检测细胞培养上清中人FⅧ的凝血活性 (FⅧ∶C)和抗原含量 (FⅧ∶Ag)以及细胞中FⅧcDNABD的转录。结果 重组逆转录病毒载体LNC ⅧBD在四种靶细胞中有不同程度的表达。其中以NIH3T3细胞的表达最高 ,FⅧ∶C为 1.6U/ 10 6细胞·2 4hrs 1,FⅧ∶Ag为 5 0 0ng/ 10 6细胞·2 4hrs 1。CHO细胞表达的FⅧ∶C活性为 0 12U/ 10 6细胞·2 4hrs 1,FⅧ∶Ag为 6 2 4ng/10 6细胞·2 4hrs 1。FⅧ在Cos 7和一正常成人肝细胞系L 0 2中表达较低。RT PCR可检测到靶细胞中人FⅧcDNABD的转录的mRNA。结论 逆转录病毒载体能够介导人FⅧ的体外高效表达 。
- 郭雪梅王鸿利储海燕王学锋璩斌李志广戚正武王振义
- 关键词：逆转录病毒载体基因表达
