张锦超
- 作品数：16 被引量：115H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新型pⅨ噬菌体展示系统的建立及初步评价
- 2005年
- 目的:构建新型噬菌体展示载体,评价其展示效果,为构建scFv库寻找新的展示体系。方法:PCR分离、扩增M13KO7中pⅨ蛋白编码基因,克隆入噬菌体展示载体PHB-gⅢ,替换原载体中的gⅢ-CT段,构建载体PHB-pⅨ,并将相对分子质量约50×103的碱性磷酸酶的编码基因分别克隆入两展示载体,观察其展示碱性磷酸酶能力的差别。结果与结论:成功构建了展示载体PHB-pⅨ,该载体具有与PHB-gⅢ相当的展示碱性磷酸酶的能力,且相同滴度的PHB-gⅢ噬菌体DNA含量略高于PHB-pⅨ噬菌体DNA含量,提示PHB-gⅢ系统展示外源蛋白时存在感染能力下降。PHB-pⅨ系统具有用于展示噬菌体抗体库的良好应用前景。
- 王双孙志伟杜威世张锦超俞炜源
- 关键词：噬菌体展示抗体库
- 新化合物哌芳安他抗大鼠和兔动脉粥样硬化作用机理的初步研究(英文)被引量：1
- 2004年
- 目的 在早期和晚期动脉粥样硬化模型上研究新化合物哌芳安他抗动脉粥样硬化的机制。方法 大鼠或家兔随机分为正常对照、模型对照和哌芳安他给药组 ,其中模型对照和哌芳安他给药组动物给予高胆固醇饲料 ,检测的指标包括 :兔颈动脉HE染色 ;大鼠或兔血清TC ,LDL CHO ,HDL CHO ,IL 8,ET 1,PGI2 ,TXA2 和NO水平 ;兔颈动脉MCP 1和IL 8mRNA表达量。结果 哌芳安他能明显抑制早期和晚期动脉粥样硬化中TXA2 的过量表达 ,在大鼠早期动脉粥样硬化中可见哌芳安他给药组动物血清NO增加而IL 8含量减少 ;在兔晚期动脉粥样硬化中可见IL 8和MCP 1mRNA表达降低 ;哌芳安他对血脂水平、MDA和SOD无明显影响。结论 哌芳安他抗动脉粥样硬化机制与其升高血清NO水平 ,降低TXA2 含量及抑制IL 8和MCP 1过度表达相关。
- 山丽梅张锦超赵艳玲汪海
- 关键词：哌芳安他动脉粥样硬化动物模型细胞因子
- 介导乙酰胆碱诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性被引量：7
- 2002年
- 目的 针对血管内皮细胞上是否存在M受体的疑点 ,从基因水平和信号转导机理上探讨介导乙酰胆碱 (ACh)诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性。方法 以新鲜分离和传代培养的牛主动脉内皮细胞为实验材料 ,比较两种内皮细胞M1～M5受体mRNA的分布状况、ACh诱发细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)、环腺苷酸 (cAMP)含量变化。①设计高选择性、特异性寡核苷酸探针 ,采用点杂交方法对内皮细胞M1～M5受体mRNA进行分析 ,并通过反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、DNA序列测定及同源性分析确证点杂交的实验结果 ;②以Fluo 3和Fura 2为荧光探针 ,用共聚焦和荧光光度仪测定内皮细胞 [Ca2 + ]i 变化 ;③内皮细胞cAMP含量采用12 5I放射免疫分析方法测定。结果 在新鲜分离的牛主动脉内皮细胞存在M1～M4 受体mRNA ,内皮细胞经传代培养后仅检测到M4 受体mRNA ;1和 10μmol·L- 1ACh能够引起原代培养内皮细胞 [Ca2 + ]i增加 ,最大增加量为 12和 19nmol·L- 1;ACh激活原代培养内皮细胞的钙离子信号 ,表现为单次或连续2次的钙振荡 ,具有异时性和快速耐受的特点 ;此外 ,随ACh浓度增加 ,原代培养内皮细胞cAMP含量均呈微弱增加趋势 ;ACh不引起传代培养内皮细胞[Ca2 + ]i 浓度的改变 ,但能浓度依赖地降低cAMP含量。结论 新鲜分?
- 王莉莉张锦超丁建花俞炜源汪海肖文彬
- 关键词：内皮细胞乙酰胆碱细胞内钙
- 新化合物哌芳安他抗高血脂诱发兔动脉粥样硬化作用及其分子机理的研究被引量：8
- 2006年
- 目的研究新化合物哌芳安他抗高血脂诱发兔动脉粥样硬化的分子机制。方法采用高血脂诱发兔动脉粥样硬化模型,通过检测血液及血管组织中重要的动脉粥样硬化相关因子的表达,分析新化合物哌芳安他抗动脉粥样硬化的分子机制。结果哌芳安他可抑制兔颈动脉粥样斑块的形成,改善血管内皮细胞功能,降低血清TXA2含量,升高PGI2与TXA2的比值,抑制趋化因子IL-8和MCP-1mRNA的过度表达。结论哌芳安他的上述作用特点可能与其抗动脉粥样硬化作用相关。
- 山丽梅赵艳玲张锦超王倩陈凯汪海
- 关键词：动脉粥样硬化前列环素血栓素单核细胞趋化因子
- 血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标相关新基因的电子克隆被引量：1
- 2004年
- 血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标(ETA)作为特异性血管内皮细胞药物作用新靶点具有良好的抗动脉粥样硬化应用前景。通过培养前后血管内皮细胞表达差异基因的筛选,有可能分离获得ETA或其相关基因。在利用抑制削减杂交技术获得14个牛未知基因片段基础上,采用电子克隆途径,使6个未知基因片段得以延伸,并在GenBank的非冗余基因库中找到了对应或同源基因,其中3个延伸出了全长阅读框,另外3个延伸出部分长度;对于延伸出全长阅读框的基因,设计特异性引物进行PCR扩增,验证了电子延伸的可信性,同时也克隆了整个阅读框架区。
- 山丽梅张锦超赵艳玲俞炜源汪海
- 关键词：血管内皮细胞基因电子克隆
- 超大容量人源性抗体库的构建被引量：2
- 2004年
- 构建大容量抗体库是获得高亲和力抗体的重要基础和保障,如何构建大容量抗体库一直是被关注的热点。本文对比分析了天然库、半合成库及全合成库基因多样性的特点,指出获得多样的功能性抗体基因是建库的关键。构建大容量抗体库要从提高连接和转化效率、利用体内重组系统提高抗体基因组合多样性以及提高包装和呈现的效率等多个环节进行条件优化,提高库容量和多样性。
- 王双张锦超俞炜源
- 关键词：噬菌体抗体库基因多样性
- 槟榔碱抗动脉粥样硬化分子机制的研究被引量：52
- 2004年
- 目的 研究槟榔碱抗高血脂诱发大鼠动脉粥样硬化作用的分子机制。方法 采用高血脂诱发大鼠动脉粥样硬化模型 ,通过检测血液及血管组织中重要的动脉粥样硬化相关因子的表达 ,分析槟榔碱抗动脉粥样硬化的分子机制。结果 槟榔碱可促进NO释放 ,提高eNOS蛋白和mRNA的表达 ,降低血浆IL 8水平 ,抑制粘附分子ICAM 1及趋化因子IL 8的受体CXCR 2和MCP 1mRNA的过度表达。结论 槟榔碱上述作用特点可能与其抗动脉粥样硬化作用相关。
- 山丽梅张锦超赵艳玲崔文玉汪海
- 关键词：动脉粥样硬化槟榔碱一氧化氮粘附分子趋化因子
- 牛m1和m5受体内环3区的克隆及主动脉内皮细胞上两种受体mRNA表达的检测被引量：5
- 2002年
- 目的 :克隆牛m1和m5受体亚型特异性区域内环 (innerloop) 3区 ,并检测牛主动脉内皮细胞上两种受体mRNA的表达。方法 :根据人、小鼠的m1和m5受体序列 ,设计并合成针对两种受体内环 3区的特异性引物。采用RT_PCR法从牛海马组织中扩增牛m1和m5受体内环 3区 ,并通过半定量RT_PCR法检测两种受体mRNA在传代培养前后的牛主动脉内皮细胞中的表达。结果 :序列测定与对比表明克隆得到了牛m1和m5受体内环 3区。半定量RT_PCR结果显示 ,原代牛主动脉内皮细胞表达m1受体mRNA而未检测到m5受体mRNA ,两种受体mRNA在传 10代的培养牛主动脉内皮细胞中均未检测到有表达。结论
- 张锦超王莉莉俞炜源汪海
- 关键词：M受体克隆乙酰胆碱内皮细胞
- 血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标相关新基因的电子克隆
- 本文在利用抑制削减杂交技术获得14个牛未知基因片段基础上,采用电子克隆途径,使6个未知基因片段得以延伸,并在Genebank中的非冗余基因库找到了对应或同源基因,其中3个延伸出了全长阅读框,另外3个延伸出部分长度;对于延...
- 山丽梅张锦超赵艳玲俞炜源汪海
- 关键词：动脉硬化基因克隆
- 文献传递
- rhBMP-2复合透明质酸钠凝胶诱导成骨的实验研究被引量：6
- 2000年
- 为重组人骨形态发生蛋白 2 (recombinanthumanbonemorphogenticprotein 2 ,rhBMP 2 )在种植牙中的应用寻找一种新型、有效的复合材料。方法 :将 2 0～ 30mg雄性小白鼠 16只随机分为 4组 ,每组 4只。其中一组为空白对照组 ,其余各组小鼠肌囊内分别植入透明质酸钠凝胶 (HealonGV)、rhBMP 2、rhBMP 2与HealonGV复合物 ,2 1d后进行X线片观察、组织学观察及BMP定量测定。结果 :空白对照、HealonGV组无骨组织生长 ,rhBMP 2与HealonGV复合组成骨量、骨成熟程度及BMP含量均高于单纯rhBMP 2组。结论 :1HealonGV为rhBMP 2的良好载体。 2HealonGV与rhBMP 2复合可以使rhBMP 2诱导新骨生成的作用增强。
- 李亚男刘洪臣倪紫砚王东胜赵明张锦超邱华
- 关键词：骨形态发生蛋白透明质酸钠RHBMP-2
