- 重组人HMGN2在大肠杆菌中表达及其体外抗乙型肝炎病毒活性研究
- 2011年
- 目的制备重组人高迁移率非组蛋白N2蛋白（HMGN2）,研究重组HMGN2的抗乙型肝炎病毒（HBV）活性。方法通过RT-PCR分离纯化人HMGN2基因,并将其构建到原核表达质粒pGEX-4T-1中,经IPTG诱导表达。产物经GST蛋白纯化系统进行纯化,用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定。采用MTT法检测重组HMGN2蛋白对稳定转染复制型HBV重组质粒的肝癌细胞株HepG2.2.15细胞的细胞毒性;不同浓度HMGN2蛋白作用于HepG2.2.15细胞,分别在第3 d和6 d收集细胞培养上清液,ELISA检测上清中HBV表面抗原（HBsAg）及e抗原（HBeAg）,采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV DNA的含量。结果成功构建了HMGN2蛋白原核表达载体pGEX-HMGN2,并分离提纯了原核表达的HMGN2蛋白。Western blot结果显示,该蛋白能被抗HMGN2抗体识别。在检测的1~100μg/mL范围内,HMGN2蛋白对HepG2.2.15细胞的无细胞毒性;HMGN2蛋白在1~5μg/mL水平即可抑制HBeAg和HBsAg的表达,可降低HBV DNA拷贝数。结论成功构建HMGN2原核表达载体,并分离提纯了纯度较高的HMGN2蛋白;重组的HMGN2蛋白在体外具有较强的抗HBV活性。
- 何兴俐张永红金淑慧冯云
- 关键词：抗HBV活性
- 超声波洁治后抛光效果的Meta分析被引量：1
- 2012年
- 背景:目前抛光处理措施主要有硅研磨头、橡皮杯抛光技术和喷砂抛光技术3种措施。目的:应用系统评价的方法研究超声洁治后3种抛光处理措施的临床效果。方法:通过Medline等数据库和手动检索1981/2011有关超声洁治后抛光处理的相关文献,根据纳入和排除标准,选择适用文献6篇进行质量评估。把菌斑指数作为统一的研究结果,对文献进行均衡检测,各文献数据合并进行统计分析。结果与结论:共纳入6篇临床对照实验,共278例患者。Meta分析结果显示超声波洁治后3种抛光措施都可有效延缓菌斑形成,3种抛光措施的临床效果无明显差异。由于目前的临床研究有限,上述结论尚需更多高质量的随机对照试验进一步验证。
- 张永红冯云
- 关键词：超声波洁治喷砂抛光META分析
- 高迁移率族蛋白N2抑制口腔鳞状细胞癌增殖作用的体外研究被引量：3
- 2013年
- 目的以人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113为实验模型,初步探讨高迁移率族蛋白N2(HMGN2)抗口腔鳞状细胞癌的作用。方法大量培养重组人HMGN2表达载体大肠杆菌BL21,用异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖苷(IPTG)诱导HMGN2的表达,产物用B-PER GST Fusion Protein Purification Kit进行纯化。在细胞培养基中加入不同质量浓度的HMGN2,通过MTT、Hoechst 33342荧光染色、流式细胞术和Western-blot法检测其凋亡效果及抗凋亡的分子机制。结果经MTT检测证明HMGN2能显著抑制Tca8113细胞的生长,通过Hoechst 33342荧光染色、流式细胞术和Western-blot检测证明HMGN2能使Tca8113的细胞形态发生改变,并且能使Tca8113细胞阻滞于细胞周期的S期,促进Tca8113细胞凋亡。结论 HMGN2可以促进人口腔鳞状细胞癌细胞的凋亡。
- 董小倩刘西茜张永红张平卢礼兵李小玉黄萍冯云
- 高迁移率族蛋白N2对人舌癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究高迁移率族蛋白N2(HMGN2)对人舌癌裸鼠移植瘤生长的抑瘤作用。方法裸鼠腋下注射接种舌鳞癌细胞Tca8113以建立裸鼠移植瘤模型,接种7 d成瘤后,设立阴性对照组、HMGN2蛋白组和阳性对照组,在瘤体周边分别注射含washingbufferⅡ、HMGN2蛋白和顺铂的细胞培养基。观察各组裸鼠肿瘤的生长情况,经过4次给药后处死裸鼠,取出瘤块,称其质量计算抑瘤率,并行苏木精-伊红(HE)染色观察形态学变化。结果成功建立舌癌裸鼠移植瘤模型。HMGN2蛋白组和阳性对照组肿瘤体积明显小于阴性对照组。裸鼠体重在整个实验过程中并没有明显的变化。阴性对照组、HMGN2蛋白组、阳性对照组的肿瘤质量平均值分别为(0.38±0.19)、(0.21±0.15)、(0.23±0.16)g,3组间的差异无统计学意义。HMGN2蛋白组和阳性对照组的抑瘤率分别为45.71%和39.44%。肿瘤经肉眼观察可见阴性对照组瘤块较大,HE染色可见HMGN2蛋白组和阳性对照组细胞坏死明显。结论 HMGN2蛋白可以明显抑制人舌癌裸鼠移植瘤的生长。
- 刘西茜董小倩张永红张平李小玉陈思秀冯云
- 关键词：移植瘤TCA8113细胞
