宋武琦
- 作品数：73 被引量：81H指数：5
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省杰出青年科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 从临床标本中检测结核菌感染的荧光定量PCR方法
- 本发明涉及一种从临床标本中检测结核菌感染的荧光定量PCR方法，用荧光定量PCR检测方法对临床标本中结核菌的小RNA进行检测；步骤一：提取临床标本中的总RNA；步骤二：以步骤一中提取的总RNA为模板逆转录合成cDNA；步骤...
- 张凤民宋武琦黄颖陈小贝李爱梅钱均
- 文献传递
- 基于体细胞突变的单克隆抗体制备技术自主多样化库系统的原理与应用被引量：1
- 2015年
- 自主多样化库（ADLib）是近年新建立的一种基于体细胞突变的生产抗体的系统，其原理为以鸡的传染性法式囊淋巴细胞瘤细胞（DT40，表达鸡IgM有膜结合与分泌两种形式）为靶细胞，利用-曲古酶抑菌素（TSA）抑制DT40的去乙酰活性酶，促进组蛋白乙酰化，从而造成免疫球蛋白基因高频转换，在细胞的表面展示膜结合IgM文库，最后通过抗原标记磁珠分选法从文库中选择有抗原特异性鸡源性抗体的细胞，培养细胞获得分泌性单克隆抗体IgM。进而，通过将人IgG的重链Fc段DNA序列插入DT40细胞IgM重链区相应位置，建立了合成人Fc段鸡Fab段的嵌合人IgG（重链Fc段决定免疫球蛋白类型）的ADLib系统。ADLib系统可应用于生产诊断与治疗性抗体药物的单克隆抗体（mAb）。
- 潘超宋武琦张凤民
- 关键词：单克隆抗体
- 红光/ 近红外LED光疗抑制疼痛相关机制的研究被引量：2
- 2022年
- 通过分析红光/近红外LED光照射治疗(LED光疗)对外周血单核细胞中疼痛相关炎症因子及趋化因子的表达影响,研究红光/近红外光生物治疗对疼痛的抑制作用。在用人单核细胞THP-1评价红光/红外光的安全剂量的基础上制备健康成年人外周血单核细胞(PBMC),进行红光/红外光照射处理后,用荧光定量PCR法检测疼痛相关炎症因子及趋化因子的表达变化。结果显示,经过红光/近红外LED光疗后,与对照组相比,PBMC的CXCL12、CXCL13、CX3CL1、CCL4、CCR2、IL-4、IL-6和MMP2基因表达水平明显下调,表明红光/近红外LED光疗可通过抑制PBMC中疼痛相关趋化因子及炎症因子表达发挥抗疼痛作用。此研究可为疼痛辅助治疗提供新的思路。
- 易斌吴昊张涵旭郭庆霞何军宋楠张凤民宋武琦
- 关键词：外周血单核细胞趋化因子炎症因子疼痛
- 病毒分离和PCR-RFLP法对急性结膜炎标本中腺病毒感染及其型别的分析被引量：7
- 2005年
- 目的 分析2 0 0 3年下半年收集的哈尔滨医科大学第一临床医学院急性结膜炎标本中的腺病毒( Adenovirus,Ad V)感染情况及其型别。方法 采集5 9例临床确诊为急性结膜炎患者的结膜拭子标本,在观察和分析接种细胞的病变( CPE)情况的基础上,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析( PCR- RFL P)法,特异性检测CPE阳性细胞中腺病毒核酸的存在情况,并对PCR阳性扩增产物进行病毒型别的分析。结果 70 .7% ( 4 1/5 9)的急性结膜炎标本接种于培养细胞后可以引起明显的CPE;其中,5 3.6 % ( 2 2 / 4 1)的CPE阳性标本可以扩增出腺病毒核酸,RFL P分析证实6 8.18% ( 15 / 2 2 )的腺病毒感染为Ad3型,31.82 % ( 7/ 2 2 )的腺病毒感染为Ad7。结论2 0 0 3年下半年哈尔滨市急性结膜炎主要以腺病毒3、7型感染为主。提示结合病毒分离培养和PCR- RFL P方法。
- 李莉宋武琦李小光马培林张凤民
- 关键词：腺病毒感染标本病毒分离限制性片段长度多态性分析RFLP分析
- TNF-α与特发性血小板减少性紫癜患者激素抵抗的相关性研究被引量：7
- 2008年
- 目的研究特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenia purpura,ITP)患者肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达及其对糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达的影响,探讨TNF-α与糖皮质激素抵抗的相关性。方法ELISA方法检测ITP激素敏感型、激素抵抗型患者及正常对照组的血浆中TNF-α的含量;分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),一组用TNF-α刺激培养,一组单独培养作为对照,分别采用RT-PCR方法及Western blot法分析其GRα和GRβmRNA及蛋白表达的变化。结果血浆TNF-α浓度在ITP患者激素敏感组、激素抵抗组、正常对照组分别为(13.69±4.92)pg/mL、(19.73±4.66)pg/mL、(7.51±2.79)pg/mL,二组ITP患者血浆中TNF-α的含量均高于正常对照组(P<0.01),其中激素抵抗组ITP患者血浆中TNF-α的含量高于激素敏感组(P<0.05);经TNF-α刺激培养24 h后,培养组与对照组GRα/GAPDHmRNA分别为1.16±0.73,1.20±0.51,培养组与对照组相比,其GRαmRNA表达无显著变化(P>0.05);培养组与对照组GRβ/GAPDHmRNA分别为1.62±0.59,0.81±0.66,培养组与对照组相比,GRβmRNA表达明显增加(P<0.05);GRα蛋白的表达在各组之间无显著差别,但GRβ蛋白的表达在TNF-α刺激组较对照组明显增高。结论ITP激素抵抗型患者血浆TNF-α含量增高;TNF-α可以增加PBMC中GRβ的表达,这可能是炎性细胞因子诱发糖皮质激素抵抗的内在机制。
- 赵艳红周晋张凤民宋武琦
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α特发性血小板减少性紫癜糖皮质激素受体糖皮质激素抵抗
- 全人单克隆抗核抗体的制备和鉴定
- 2017年
- 目的本研究旨在从系统性红斑狼疮（systemmiclupuserythematosus，SLE）患者外周血淋巴细胞中获得自身抗体，并从中鉴定筛选出抗核抗体。方法利用人B细胞杂交瘤技术制备SLE患者来源的全人单克隆自身抗体，采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linkedimmunosorbenkassay，ELISA）方法测定阳性杂交瘤细胞上清抗体浓度，并以HEp-2细胞为底物，采用间接免疫荧光法鉴定筛选出抗核抗体。结果共获得48株稳定分泌IgG型全人单克隆自身抗体的杂交瘤细胞株，其中12种细胞上清抗体浓度大于1500ng／mL，占25％，通过免疫荧光鉴定从中筛选出3种抗核抗体，荧光核型分别为周边型、斑点型和核仁型。结论全人单克隆自身抗体的制备及抗核抗体的筛选鉴定，为开发新型单克隆抗体药物以及研究SLE的致病机制奠定了良好的实验基础。
- 吴静李洋韩秋媛于鑫考文萍宋武琦翟爱霞李玉军李爱梅张庆猛潘超张凤民
- 关键词：自身抗体抗核抗体
- 博尔纳病病毒抗原免疫的杂交瘤细胞系的评价被引量：1
- 2007年
- 目的评价博尔纳病病毒(BDV)抗原免疫的杂交瘤细胞系的产生抗体能力与抗体特异性。方法随机抽取2株由BDV抗原免疫的杂交瘤细胞系H1和H2,通过体内和体外方法制备单克隆抗体,通过间接免疫荧光、免疫印迹和间接酶联免疫吸附3种试验方法对制备的抗体进行特异性鉴定及效价测定。结果杂交瘤细胞系H1和H2可以产生一定效价的单克隆抗体,并对BDV的P24和P40抗原具有特异性。结论由杂交瘤细胞系H1和H2产生的单克隆抗体可以用于检测BDV特异性抗原。
- 贾丽娜张凤民宋武琦李小光钱钧包丽丽陈小贝翟爱霞张庆猛
- 关键词：博尔纳病病毒单克隆抗体免疫荧光试验免疫印迹试验
- BDV核蛋白FQ RT-PCR试剂盒的评价与应用
- 2010年
- 为评价博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)核蛋白荧光定量PCR(FQRT-PCR)试剂盒的各项指标,比较分子信标探针相对普通探针的优势,并了解其实际检测效果,本课题组使用BDVOL持续感染细胞株、非BDV病毒序列转染的OL细胞、正常的OL细胞,对BDVRT-PCR试剂盒的敏感性、特异性、重复性和稳定性进行评估,同时检测部分临床病人和动物外周血液RNA。实验结果显示:试剂盒可以检测出的病毒RNA最低浓度为2.5×101,相当于1个病毒拷贝数,无非特异检出;不同批次的试剂盒的检测结果变异系数小于0.7;加速破坏的试剂盒和正常试剂盒检测结果之间变异系数在2以内;对临床病人检测阳性率为3.6%,对动物检测阳性率为4.2%(猪)和1.5%(马)。可见该试剂盒重复性和稳定性均好;敏感性、特异性优于普通探针试剂盒,是BDV基础研究、流行病学调查和临床检测的良好工具。
- 徐鸣明展群岭张英英张亮宋武琦张凤鸣谢鹏
- 关键词：博尔纳病病毒实时荧光定量PCR核蛋白
- 用于快速检测β-内酰胺酶耐药基因的多重PCR引物组
- 本发明公开了一种用于快速检测β-内酰胺酶耐药基因的多重PCR引物组，采用所述引物组能够实现一次性同时扩增β-内酰胺酶耐药基因blaTEM、blaSHV、blaOXA、blaCTX-M-1和blaCTX-M-9，再通过琼脂...
- 张凤民詹姆斯宋武琦付英梅张文莉蔡文辉
- 文献传递
- 医学微生物学实验教学的改革与探索被引量：3
- 2012年
- 医学微生物学实验教学是理论教学的有益补充,也是教学中不可或缺的组成部分,对于学生消化吸收理论课内容、培养学生动手能力有着重要的作用。为了更好地提高医学微生物学实验教学效果,将实际教学工作中的一些改革办法作一总结。
- 李玉军翟爱霞张庆猛吴静钱钧宋武琦张凤民
- 关键词：医学微生物学教学改革实验教学
