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昆明山海棠总生物碱的提取方法及该提取物的应用: 本发明是一种昆明山海棠总生物碱的提取方法及该提取物的应用。取一定量昆明山海棠去皮根粉碎后加入一定量一定浓度的乙醇溶液在超声设备辅助下多次提取，合并提取液后浓缩，向所得浓缩液加入一定浓度的浓盐酸调节pH值充分混合一定时间后...; 刘晋祎曹佳敖琳杨录军黄晓春姜晓; 文献传递

ALX4基因在肿瘤中的甲基化与表达被引量：1: 2013年; 目的分析ALX4基因在肺正常组织、肺癌组织以及多种肿瘤细胞中的甲基化发生情况以及ALX4基因甲基化对其表达的影响.方法采用MSP方法检测正常组织和肺癌组织以及肿瘤细胞株中ALX4基因甲基化发生情况;使用去甲基化药物5-aza-dC处理肿瘤细胞后,采用RT-PCR法检测ALX4基因mRNA的表达水平.结果正常组织中的ALX4基因甲基化发生率为0%(0/10),肺癌组织中ALX4基因甲基化发生率为55%(11/20);不同组织来源的肿瘤细胞株甲基化分析显示,ALX4甲基化发生率为100%(8/8);发生甲基化的肿瘤细胞株中ALX4基因表达均缺失;去甲基化药物处理后ALX4基因mRNA表达均明显升高.结论 ALX4基因在肺癌及不同来源肿瘤细胞中均有高甲基发生,其甲基化抑制该基因的表达,提示ALX4基因甲基化可能在肺癌的发生过程中起到重要的作用.; 杜兴华刘文斌韩飞姜晓刘晋祎; 关键词：肺癌 DNA甲基化

昆明山海棠总生物碱对LPS诱导的小鼠RAW264.7细胞分泌TNF-αNO的影响被引量：6: 2011年; 目的:研究THHta对LPS诱导的小鼠RAW264.7细胞分泌TNF-α及NO的影响,探讨THHta的抗炎作用机理。方法:CCK8法测定THHta对RAW264.7细胞增殖的影响;LPS刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型;ELISA法检测THHta对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌TNF-α的影响;硝酸还原酶法检测THHta对炎性介质NO生成的影响。结果:THHta可抑制LPS活化的RAW264.7细胞分泌TNF-α及NO。结论:THHta通过抑制炎性介质TNF-α及NO的生成来发挥其抗炎作用。; 姜晓敖林崔志鸿黄晓春曹佳刘晋祎; 关键词：昆明山海棠总生物碱脂多糖

Sox30基因敲除致小鼠睾丸间质细胞增殖异常的研究被引量：1: 2021年; 目的探讨Sox30基因敲除对小鼠睾丸间质细胞增殖的影响。方法采用HE染色法观察10周龄Sox30基因野生型(Sox30^(+/+))、杂合型(Sox30^(-/+))及纯合缺失型(Sox30^(-/-))小鼠睾丸组织病理形态;采用免疫组化技术检测睾丸组织中间质细胞特异性表达蛋白3β-HSD的表达水平;采用慢病毒感染及siRNA干扰技术构建Sox30基因过表达及敲低TM3细胞模型,并在此细胞模型基础上分别采用CCK-8法、流式细胞术、RT-qPCR法以及Western blot法检测细胞存活率、细胞周期分布及周期相关基因的mRNA及蛋白表达水平。采用JASPAR数据库预测Sox30与周期相关基因的启动子区结合位点。结果与Sox30^(+/+)和Sox30^(-/+)小鼠比较,HE染色结果显示Sox30^(-/-)小鼠睾丸组织中间质细胞显著增生,同时免疫组化染色发现表达3β-HSD的间质细胞增多。与Vector组相比,Sox30组TM3细胞存活率降低(P<0.05),G1期细胞周期阻滞(P<0.05),同时细胞周期相关基因CyclinD1、Cdk2等mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与Sox30-NC组比较,siSox30-3组TM3细胞存活率增加(P<0.05),G1期细胞周期阻滞恢复(P<0.05),同时细胞周期相关基因CyclinD1、Cdk2等mRNA和蛋白表达水平显著恢复(P<0.05)。JASPAR预测发现CyclinD1、Cdk2的启动子区域均存在Sox30蛋白质可能的结合位点。结论Sox30基因敲除可导致小鼠间质细胞增殖异常,CyclinD1和Cdk2可能是Sox30调控细胞周期的重要靶基因。; 唐莹姜晓韩飞周洋西崔志鸿刘晋祎杨惠芳曹佳; 关键词：细胞周期

EIF2α/PERK/chop通路在双酚A致生殖毒性中作用研究: 目的：解析双酚A致雄性生殖毒性的靶细胞器及其作用机制.方法：构建双酚A暴露GC-2精母细胞及雄性小鼠动物模型,综合评价双酚A的雄性生殖毒性.采用激光共聚焦和TUNEL等检测双酚A损伤的靶细胞器.通过western blo...; 尹俐姜晓韩飞陈洪强杨钧堂曹佳刘晋祎

BPA、DES及联合暴露对雄性大鼠生殖毒性的研究被引量：1: 2015年; 目的研究低剂量双酚A(Bisphenol A,BPA)、己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)及两者联合暴露对雄性SD大鼠的生殖毒性。方法选择健康的雄性SD大鼠35只,随机分成7组,分别用0.5、5 mg/kg BPA,0.05、0.5μg/kg DES,以及0.5 mg/kg BPA+0.05μg/kg DES、5 mg/kg BPA+0.5μg/kg DES进行灌胃染毒,观察记录大鼠的体重变化,在染毒4周时处死取材。取大鼠两侧睾丸和附睾并称重,检测精子活力水平;做睾丸组织病理学切片,观察睾丸组织形态变化;检测血清激素水平。结果 BPA、DES及联合染毒4周后,联合暴露高剂量组的体重增重程度显著高于对照组(P<0.05),附睾质量显著低于对照组(P<0.05),睾丸质量有下降的趋势。联合暴露高剂量组的快速游动精子百分比显著增高(P<0.05),DES低剂量组和联合暴露高剂量组的慢速游动精子百分比均显著降低(P<0.05),BPA高剂量组、DES组和联合暴露低剂量组不动精子百分比显著增加(P<0.05)。染毒组大鼠生精细胞和支持细胞分离,细胞排列疏松紊乱,可见少量生精细胞空泡化,且联合暴露组病理学改变程度最大。血清睾酮水平,BPA高剂量组和联合暴露高剂量组显著高于对照组,联合暴露低剂量组显著低于对照组(P<0.05)。结论低剂量BPA和DES对大鼠有一定的生殖毒性,两者联合暴露对大鼠体重、附睾质量、精子活力和激素水平等的影响更显著,睾丸组织形态出现病变也更严重。; 陈洪强姜晓刘文斌韩飞尹俐代雁凌曹佳刘晋祎; 关键词：DES BPA 生殖毒性

MPDZ在化学致癌过程和肺癌中的表观遗传调控和作用机制研究: [目的]研究MPDZ在化学致癌和肺癌发生过程中的表达调控、功能和分子机制，初步评价其在肺癌中的临床意义。[材料和方法]利用MSP/BSP检测MPDZ基因在化学致癌过程和人肺癌组织、痰液和血浆中的甲基化发生情况，结合TCG...; 刘文斌黄永胜韩飞陈洪强姜晓尹俐曹佳刘晋祎; 关键词：化学致癌肺癌 DNA甲基化

SOX30基因在结直肠癌中的表达与甲基化分析: 2015年; 目的:探讨新发现的抑癌基因SRY盒包含基因30(SOX30)在结直肠癌中的表达及甲基化变化。方法:用逆转录PCR(RTPCR)检测结直肠癌细胞株(HCT8、HCT116和SW480)中SOX30 m RNA的表达,利用去甲基化药物5-Aza-Cd R处理结直肠癌细胞株72h后检测SOX30基因高甲基化与其表达调控的关系。应用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述3株结直肠癌细胞株及54例结直肠肿瘤组织和10例癌旁组织SOX30基因的甲基化发生情况,通过硫化测序PCR(BSP)验证结直肠癌组织和癌旁组织SOX30基因的甲基化改变,并对甲基化情况与结直肠癌患者病理特征进行相关性分析。结果:SOX30 m RNA在上述3株结直肠癌细胞株中表达与对照组相比均较低,且均发生明显高甲基化;去甲基化药物处理上述3株细胞株后,SOX30 m RNA的表达明显得到恢复。SOX30基因在大部分结直肠癌组织中均呈现高甲基化状态,甲基化发生率为79.6%(43/54);而在相应的癌旁组织中甲基化检出率较低,仅为20%(2/10)。对结直肠癌患者中SOX30基因甲基化与其临床病理学资料进行相关性分析发现,SOX30基因高甲基化与患者的肿瘤病理分型显著相关(P=0.045),而与患者的性别、年龄、吸烟与否、TNM分期和Ducks分期无显著相关性(P均>0.05)。结论:SOX30基因在结直肠癌中发生明显高甲基化修饰改变,其基因表达水平明显下调,而且其甲基化修饰率与患者肿瘤病理分型相关,提示SOX30可能在结直肠癌的发生过程中起重要作用。; 史荣辉韩飞董严张明谦姜晓尹俐刘文斌曹佳刘晋祎; 关键词：DNA甲基化结直肠癌甲基化特异性PCR

草甘膦致生殖细胞毒性效应及机制的初步研究被引量：2: 2017年; 目的研究草甘膦对小鼠精母细胞(GC-2)毒性效应及机制。方法倒置显微镜和透射电镜观察草甘膦处理后GC-2细胞形态和超微结构;流式细胞仪检测草甘膦处理对GC-2细胞凋亡及细胞周期的影响;Western blot法检测凋亡及周期相关蛋白的表达水平。结果草甘膦能显著抑制GC-2细胞增殖,并导致细胞内质网和线粒体结构损伤;草甘膦对细胞增殖抑制主要与G1期周期阻滞和诱导GC-2细胞凋亡有关。蛋白质表达分析表明,cleaved-caspase3蛋白表达水平明显升高,提示草甘膦通过激活caspase3诱导GC-2细胞凋亡;同时,细胞周期负调控因子p21蛋白的表达上调,正调控因子Cyclin D1以及Cyclin E表达受到抑制,提示相关蛋白参与了细胞G1期阻滞。结论草甘膦对生殖细胞具有明显的毒性效应并与细胞周期和细胞凋亡调控相关。; 张文龙姜晓尹俐张宁陈洪强马帮靖曹佳刘晋祎; 关键词：草甘膦细胞凋亡细胞周期生殖细胞

SOX30基因在肺癌发生中的作用及机制研究: 目的在前期全基因组差异甲基化筛选发现SOX30是肺癌发生中新的受甲基化调控基因的基础上,进一步分析该基因在肺癌发生中的作用及分子机制。方法利用甲基化特异性PCR(MSP)方法结合亚硫酸盐基因组测序技术(BGS),对肺癌发...; 刘晋祎韩飞刘文斌时小燕姜晓陈洪强曹佳; 文献传递

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姜晓

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