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IL－3、GM－CSF和IL－5受体及其信号传导: 1996年; ＩＬ—３、ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ—５是一类功能相似的造血因子，它们的受体至少包括配体特异性的α亚基和共用β亚基（βｃ）两部分。βｃ识别三因子的Ｎ端α－螺旋，而α亚基则识别三因子的Ｃ端α－螺旋，两者均为功能性的高亲和力受体所必需．由于βｃ胞内区较长，能结合Ｊａｂ和Ｓｔａｔ等信号分子，所以，三种因子受体受配体刺激后能诱导相似蛋白的酪氨酸磷酸化。另外，激酶的不同剪切型、转录因子的同分异构体、受体亚基的细胞型特异性以及信号传导通路的多重性等则为三因子作用特异性的基础。本文就对其主要内容作一综述。; 吴秋茜陈慰峰; 关键词：白细胞介素3 受体 GM-CSF 信号传导白细胞介素5

一种N端缺失的rhGM-CSF(7～127)在大肠杆菌中的表达与调控: 1997年; 在ｈＧＭ－ＣＳＦ结构与功能研究的基础之上，通过应用ＰＣＲ介导的缺失与突变和基因重组等技术，构建了表达ｒｈＧＭ－ＣＳＦ（７～１２７）的三种原核表达载体ｐＢＶ２２０／ＧＭ－ＴＧＡ，ｐＢＶ２２０／ＧＭ－ＴＡＡ和ｐＢＶ２２０／ＧＭ－３′ＵＴＲ。在三种载体内，ｈＧＭ－ＣＳＦ（７～１２７）ｃＤＮＡ的５′端均缺失６个氨基酸，３′端则分别为天然终止密码ＴＧＡ，突变终止密码ＴＡＡ和ＴＧＡ加３′ＵＴＲ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明三种载体表达ｒｈＧＭ－ＣＳＦ（７～１２７）的水平分别为２１％，１８．８％和２５％。经过用ＰＣｇｅｎｅ软件和Ｚｕｌｃｅｒ算法分析ｈＧＭ－ＣＳＦ（７～１２７）－３′ＵＴＲｍＲＮＡ的二级结构，表明３′ＵＴＲ在终止密码ＴＧＡ附近形成两个茎－环结构，它可能与ｐＢＶ２２０／ＧＭ－３′ＵＴＲ载体高表达ｒｈＧＭ－ＣＳＦ（７～１２７）有关。表达产物ｒｈＧＭ－ＣＳＦ（７～１２７）经弱阴离子ＤＥＡＥ交换层析纯化后，纯度达到９２％，比活性为８×１０７Ｕ／ｍｇ。; 吴秋茜林勐李燕钱晓萍陈慰峰; 关键词：CSF 大肠杆菌基因表达

hIL-7-GM-CSF(7-127)融合蛋白的构建和E.coli表达被引量：12: 1998年; 目的将ｈＩＬ－７基因与ｈＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）基因通过一中间接头（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接到一起，并在大肠杆菌中表达具有ｈＩＬ－７活性和极高ｈＧＭ－ＣＳＦ活性的ＩＬ－７－ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）融合分子。方法通过引物设计和采用分级克隆的策略构建原核表达载体ｐＢＶ２２０－ＩＬ－７－ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７），并在大肠杆菌中表达ｈＩＬ－７－ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）融合蛋白。连接ＩＬ－７与ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）的中间接头为（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３。通过选择密码子，在（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３ｃＤＮＡ的中后部产生了一个ＢａｍＨⅠ位点，ＧＧＡ编码Ｇｌｙ，ＴＣＣ编码Ｓｅｒ。ＩＬ－７下游引物和ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）上游引物的合成均起始于该位点。结果ｐＵＣ１８－ＩＬ－７－ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）序列测定表明，ＩＬ－７、ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）以及中间接头序列均与设计一致。活性测定结果表明，ｒｈＩＬ－７－ＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）的ｒｈＩＬ－７比活性约为１．６×１０６Ｕ／ｍｇ，ｈＧＭ－ＣＳＦ（７－１２７）比活性约为５×１０９～１×１０１０Ｕ／ｍｇ，比ｒｈＧＭ－ＣＳＦ标准品高５００～１０００倍。结论在ＩＬ－７－ＧＭ－Ｃ?; 吴秋茜姜宇飞陈慰峰钱晓萍舒翠玲沈倍奋; 关键词：白细胞介素7 融合蛋白 GM CSF

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吴秋茜

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