吴玫 作品数:23 被引量:26 H指数:3 供职机构: 哈尔滨医科大学 更多>> 发文基金: 吉林省科技厅国际合作项目 国家自然科学基金 吉林省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 自动化与计算机技术 哲学宗教 自然科学总论 更多>>
抗氧化微量营养素对T1DM小鼠胰岛细胞保护作用的超微结构研究 被引量:2 2008年 目的探讨联合抗氧化微量营养素(antioxidant micronutrients,AM)对胰岛β细胞超微结构的保护作用。方法应用多低剂量链脲佐菌素法(multipe low dosage of streptozotocin,MLDS)方法制备T1DM(type 1 diabetes mellitus)小鼠模型,分别联合添加4种AM[硒(Se)+维生素E(VE)+钒(V)+铬(Cr)]和7种AM(Se+VE+V+Cr+VC+硫辛酸+烟酰胺)进行干预,观察胰岛β细胞超微结构的变化。结果联合补充AM使T1DM小鼠血糖明显降低;T1DM模型组胰岛β细胞及内分泌颗粒数量减少,内质网明显扩张囊泡变,部分线粒体发生肿胀变性;AM4、AM7组小鼠胰岛β细胞超微结构完好,胞浆内胰岛素分泌颗粒数量明显增多于T1DM模型组小鼠。结论联合AM对T1DM模型小鼠胰岛β细胞超微结构具有良好的保护作用。 朴松兰 张桂珍 杜珍武 吴玫 常颖 孙英关键词:1型糖尿病 抗氧化微量营养素 胰岛Β细胞 超微结构 携带IL-12的慢病毒载体有效促进DC细胞成熟 目的:探讨携带IL-12的慢病毒载体感染树突细胞对树突细胞成熟的影响。<br> 方法:应用基因重组技术构建携带人IL-12的慢病毒载体,应用293FT细胞进行慢病毒颗粒包装。应用用细胞因子IL-4与GM-C... 杜珍武 邸君 王茜 张玉成 吴玫 张桂珍关键词:慢病毒载体 IL-12基因 树突细胞 中国东北汉族人群解偶联蛋白3基因-55C/T多态性与2型糖尿病相关性研究 2010年 目的探讨解偶联蛋白3(uncoupling protein 3,UCP3)基因-55C→T变异与中国东北地区2型糖尿病的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测100例2型糖尿病患者(男/女为58/42)及113名糖耐量正常者(男/女为56/57)UCP3基因-55C→T变异的基因型。结果 2型糖尿病组与正常对照组三种基因型频率及等位基因频率分布差异均有显著性意义,P值分别为0.027和0.003,两组间携带T的基因型(CT+TT)频率差异有显著意义(P=0.008);T等位基因与2型糖尿病患者血清总胆固醇(CHOL)及低密度脂蛋白(LDLC)频率升高相关(P为0.021,0.024)。结论 UCP3基因-55C→T变异与中国东北汉族人群2型糖尿病患者局部体脂代谢存在相关性,该基因变异与2型糖尿病发病相关。 刘佳南 王茜 吴玫 郑锦花 张桂珍关键词:2型糖尿病 多态性 人抵抗素基因体外转染对胰岛素敏感性的影响及其分子机制 目的 2001年美国学者Steppan等鉴定了一种在白色脂肪组织表达的新的mRNA,因其与胰岛素抵抗有关而被命名为抵抗素(resistin,resistance to insulin),又称为脂肪组织特异性分泌因子(AD... 张桂珍 盛春华 杜珍武 吴玫 张玉成 刘颖男关键词:抵抗素 分子靶点 Bcl-2基因沉默对A549细胞化疗药物杀伤敏感性的影响 被引量:2 2013年 目的探讨抑制Bcl-2基因表达对人肺癌A549细胞化疗药物杀伤敏感性及其相关基因mRNA表达的影响。为进一步提高非小细胞肺癌(NSCLC)化疗疗效提供实验依据。方法构建靶向人Bcl-2基因的微小RNA重组质粒,并转染至A549细胞,设稳定转染的实验组、阴性对照质粒组和空白对照组,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测转染细胞中Bcl-2mRNA转录和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术分析转染后细胞的增殖和周期变化。MTT法检测干扰后A549细胞对依托泊苷、5-氟尿嘧啶、顺铂、阿霉素、长春新碱、紫杉醇及长春瑞滨等7种化疗药物敏感性的变化。应用RT-PCR及实时荧光定量PCR方法进行核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、胸腺嘧啶合成酶(TYMS)、Ⅲ型β-微管蛋白(Class Ⅲ β-tubulin)、拓扑异构酶2α(TOP2α)等化疗敏感性相关基因mRNA表达的检测。结果成功构建微小RNA表达载体,稳定转染A549细胞后,实验组Bcl-2mRNA表达(相对表达量为0.002±0.001)与阴性对照质粒组(相对表达量为0.104±0.003)相比下降98.1%,蛋白表达水平下调57.6%(t值分别为98.70和7.66,均P〈0.05)。流式细胞术测定实验组细胞周期阻滞在G1期,MTT法检测示实验组细胞生长受到明显抑制,对依托泊苷、顺铂、紫杉醇、长春瑞滨等4种药物的敏感性明显增加[实验组IC50分别为(107.3±0.1)mg/L、(7.7±0.6)mg/L、(11.5±1.9)mg/L和(10.8±1.6)mg/L,阴性对照质粒组IC50分别为(145.8±0.1)mg/L、(60.7±1.4)mg/L、(80.6±1.7)mg/L和(20.6±1.7)mg/L],差异均有统计学意义(t值分别为655.33,108.04,82.16和12.48,均P〈0.05)。此外,Bcl-2表达下调还使实验组ERCCl、TYMS、TO 王姣琦 杜珍武 高娴绯 吴玫 张玉成 潘颖 王茜 张桂珍关键词:基因,BCL-2 抗肿瘤药 基因 天然抗氧化物拮抗胰岛素抵抗的分子靶点筛选 糖尿病分子发病机理的进展涉及了近百种基因的转录与翻译水平表达及其生物学作用的异常,尤其值得注意的是氧化侵袭作为糖尿病及其合并症发生发展的核心机制一直是近年来糖尿病研究领域关注的前沿问题之一.糖尿病是由遗传因素与环境因素共... 张桂珍 郑锦花 杜珍武 吴玫 宋旸 张玉成关键词:糖尿病 胰岛素抵抗 分子靶点 文献传递 禽流感病毒感染K-562和HL-60肿瘤细胞系的实验研究 被引量:1 2013年 目的选择代表不同骨髓细胞分化阶段的血液肿瘤细胞株K-562、HL-60作为研究对象,选取低致病性禽流感病毒H3N2/H4N6作为病原体,探讨禽流感病毒感染骨髓的机制。方法应用流式细胞术检测K562等细胞表面禽流感病毒受体;收集感染病毒的细胞培养上清,红细胞凝集实验检测染毒细胞释放的子代病毒;收集感染病毒的细胞免疫荧光检测病毒NP,判断病毒吸附、进入细胞并在细胞内增殖、复制情况。结果所检测细胞表面均有禽流感病毒SAα2,3-Gal和SAα2,6-Gal连接的唾液酸寡糖受体的表达。在H3N2感染的K-562细胞培养上清中检测到病毒HA,且随培养时间的延长,病毒的血凝滴度增大。在H4N6感染的K-562细胞的培养上清中病毒HA检测阳性,第三天,K-562细胞上清的病毒血凝滴度即达4,第四天达16;HL-60细胞,只在第三、四天达2;随后荧光显微镜下观察可见,染毒细胞培养0h时,胞膜、胞浆内即可见病毒分布,H4N6感染的细胞荧光强度大于H3N2感染的细胞;H3N2和H4N6感染的细胞中,K562细胞的荧光强度大于其他细胞。随着培养时间的延长,K562细胞表面的病毒增多,而HL-60细胞无明显变化。结论 K-562、HL-60细胞表面均表达禽流感病毒SA-α2,3Gal和SA-α2,6Gal连接的唾液酸寡糖受体。同一病毒H3N2或H4N6的吸附、繁殖和复制及释放情况存在较大差异。 张红梅 赵丹 吴玫 牟旭鹏 周伯平关键词:禽流感病毒 植物凝集素 利用生物纳米技术检测外周血肺癌细胞的实验研究 2009年 目的建立磁性纳米颗粒从肿瘤患者外周血中富集与纯化肿瘤细胞的方法,应用荧光纳米晶生物探针检测方法,实现对肺癌早期微转移的诊断。方法体外培养人肝癌细胞和肺癌细胞,采集健康人外周血单个核细胞(PBMC),将PBMC与肝癌细胞和肺癌细胞按比例混合,通过磁粒抗体复合物富集癌细胞,用荧光纳米晶探针进行肺癌特异性鉴定。结果光镜下可见较多的人肝癌细胞和人肺癌细胞与磁性纳米颗粒紧密结合,而PBMC与磁性纳米颗粒不结合。荧光显微镜下可见荧光纳米晶表面蛋白A探针特异性地与肺癌细胞结合产生荧光信号,但与肝癌细胞不结合,无荧光信号出现。结论本方法可成功地从外周血中富集到肺癌细胞,经荧光纳米晶探针成功地鉴定为肺癌细胞,达到诊断肺癌早期微转移的目的。 王雅丽 张玉成 吴玫 颜峰 张杰 张桂珍关键词:磁性纳米颗粒 基因工程重组家蚕素Ⅱ的表达及其胰岛素样作用的研究 糖尿病是严重威胁人类健康的主要疾病之一,寻找高效抗糖尿病药已成为近年生物医学领域关注的热点问题之一.家蚕素(bombyxin,Bbx)是无脊椎动物中首个被鉴定的昆虫胰岛素,分子量5KD,家蚕素Ⅱ的A链与B链与人类胰岛素具... 张桂珍 李红霞 杜珍武 吴玫 宋旸 张玉成关键词:糖尿病 基因工程 胰岛素样 药理作用 文献传递 影响禽流感病毒(H3N2/H4N6)感染机制的生物信息学分析 被引量:1 2013年 目的通过生物信息学分析禽流感病毒WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA氨基酸序列,进一步探讨影响禽流感病毒感染血液肿瘤细胞株K-562和HL-60的机制。方法 RT-PCR扩增WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA基因,经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定,对纯化的PCR产物进行测序。在GenBank中选取登录的H3N2和H4N6序列,利用在线生物信息工具ClustalW2(http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalw2/)对这些序列和WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA氨基酸序列进行比对分析。结果 RT-PCR扩增产物的大小与预期相符。生物信息学分析显示,WDK/ST/27/03(H3N2)HA的裂解位点是QNR*GLFG,Dk/ST/472/03(H4N6)HA的裂解位点是KAAR*GLFG,此位置的氨基酸无变化。HA的226位氨基酸为Gln(Q),228位氨基酸为Gly(G),具有禽流感病毒HA受体结合位点的特征,影响受体结合的位点98Y、136S、152W、183H、190E、194L、222W、225G、227S未见变异。NA活性位点及影响酶活的位点均无变异,但WDK/ST/27/03(H3N2)NA在接近N-末端的茎部61~79位缺失19个氨基酸,致使NA茎部变短,且丢失2个潜在的糖基化位点。结论 WDK/ST/27/03(H3N2)的NA茎部缺失突变可能是造成其吸附、繁殖和复制能力低于Dk/ST/472/03(H4N6)的一个因素。 张红梅 赵丹 吴玫 牟旭鹏 周伯平关键词:流感病毒 血细胞凝集素 神经氨酸酶 生物信息学