吴传芳
- 作品数：79 被引量：128H指数：7
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金高等学校学科创新引智计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 人凝血因子Ⅷ制品配方研究
- 2015年
- 目的摸索一种适用于人凝血因子Ⅷ制品的配方。方法以人凝血因子Ⅷ质量为指标,进行成分筛选实验,对选定的成分再进行剂量选择,获得最终配方、制备成品。进行质量与安全性、稳定性考察,评估最终配方的效果。结果得到的配方效果令人满意,经稳定性（2-8℃、24个月;25℃、24个月;40℃、6个月）考察证明配方稳定有效。结论研发出一种适合人凝血因子Ⅷ制品的配方。
- 王黔川牟蕾鲁涛余伟李伟吴传芳
- Star-PAP蛋白的纯化分析及其限定性因子的分离
- 2014年
- 克隆并构建了Star-PAP的表达载体,然后将该载体转染HEK293细胞,经纯化得到了重组的Star-PAP蛋白.以细胞总RNA和体外转录的U6snRNA为底物,对纯化到的Star-PAP的TUTase活性进行了分析.结果显示重组的Star-PAP能够对细胞总RNA以及U6snRNA进行体外尿苷化修饰,表明纯化到的Star-PAP具有良好的TUTase活性.此外,使用HPLC分离得到了具有U6snRNA底物特异性的细胞核组分.该组分除了含有StarPAP外,还含有一种未知蛋白,该未知蛋白可能就是赋予Star-PAP底物特异性的限定性因子.
- 于春雷田平平吴传芳欧阳劲秦岭
- 关键词：SNRNATUTASE
- 一种改进的小非编码RNA cDNA文库构建方法
- 2017年
- 本文使用RNA Antisense Purification(RAP)技术富集纯化sncRNA,有效去除了5S、5.8SrRNA.联合使用Tobacco Acid Pyrophosphatase(TAP)和RNA 5′Polyphosphatase处理sncRNA,将5′-端为非单磷酸结构的sncRNA转变成单磷酸结构,增加了文库覆盖率.在sncRNA3′-端添加poly(A)尾结构以及使用oligo(dT)16VN-adapter锚定引物进行逆转录,间接解决了sncRNA 3′-端接头定向连接问题,不再使用价格昂贵的腺苷化接头.改进后的sncRNA cDNA文库容量为3×105cfu,重组率为95%,且测序结果显示,获得的cDNA序列具有较好的完整性.使用这种成本低且行之有效的改进方法,为深入研究sncRNA奠定了基础.
- 杜光石罗发涛肖燕陈红军吴传芳
- 关键词：CDNA文库POLY(A)
- 一种新型的通过免疫富集纯化溶酶体方法
- 2013年
- 用传统的密度浓度梯度法分离溶酶体具有耗时长,样品需求量大,而且无法得到纯度较高的溶酶体等不足,因此有必要开发一种简便分离溶酶体的方法。依据溶酶体膜蛋白LAMP2的特性,开创性地尝试用免疫富集溶酶体膜蛋白的方式纯化溶酶体:首先构建了带Flag标签的LAMP2真核表达载体,并转染Hela细胞,用免疫荧光鉴定其亚细胞定位情况,发现重组蛋白LAMP2-Flag特异性定位于溶酶体。在Hela细胞中筛选得到了稳定表达LAMP2-Flag的细胞系。大规模培养该细胞系,在非变性条件下分离细胞质提取物,利用anti-Flag抗体做免疫沉淀,用蛋白质免疫印迹检测,发现沉淀产物中特异性富集了溶酶体标识蛋白LAMP1。用糖苷酶活性检测,发现沉淀产物中酸化蛋白酶活性很高,表明富集到较纯的溶酶体。这种改良的新型方法步骤简捷,样品需求量少,获得的溶酶体纯度高,为从少量细胞中分离溶酶体提供了一个种优化方案。
- 张磊阳宇吴传芳
- 关键词：分子生物学
- Tat-p21融合蛋白的表达及其在A549细胞中的活性研究
- 2013年
- 在本研究中,通过分子克隆的手段,将编码Tat跨膜转运结构域的CDS与人野生型p21蛋白的CDS相连接,并通过原核表达系统表达纯化相应蛋白;然后用该蛋白按浓度梯度:100,200,400,800,1000nmol/L与A549细胞共同孵育,各浓度在10,60,120,240min终止反应,通过Western Blotting检测进入细胞的p21蛋白量,以此确定最佳的转导条件;接着检测了转导进入A549细胞的Tat-p21融合蛋白在细胞中稳定存在的时间.然后通过绘制细胞生长曲线的方法比较了转导Tat-p21的细胞与负对照实验组生长速度的区别.结果发现,融合Tat跨膜结构域的p21蛋白能够高效进入A549细胞,并在细胞内发挥相应生物学功能,使细胞的生长受到抑制,增殖减慢;而作为负对照的p21蛋白则无相应功能.
- 施慧敏吴兰赵梓亦吴传芳
- 关键词：TATP21蛋白A549细胞
- 甘露糖结合蛋白基因用于制备转基因抗蚜虫水稻的应用
- 本发明提供了将存在于玉帘（<I>Zephyranthes </I><I>candida （Lindl.）Herb.</I>）植物内的属于甘露糖结合家族的甘露糖结合蛋白，通过植物基因工程技术，即构建该甘露糖结合蛋白基因的植...
- 鲍锦库吴传芳梁丹凤龙鑫袁媛
- 文献传递
- 两种改造的低免疫原性黄精凝集素蛋白
- 本发明公开了两种高活性、低免疫原性的突变型黄精凝集素蛋白。属于生物技术领域。本发明以野生型黄精凝集素序列为基础，通过生物信息学分析结合免疫信息学方法设计了低免疫原性的突变蛋白mrPCL2（突变位点G19Q）和突变蛋白mr...
- 鲍锦库吴传芳郑茹潇曹东炜王意达陈宣铭李洋均邓杰周洵羽
- 1.石蒜凝集素的纯化、性质及构象研究 2.单子叶石蒜科植物朱顶红和风雨花甘露糖结合凝集素基因的克隆及序列分析
- 本文对石蒜凝集素的研究主要包括纯化、性质、活性以及结构几个方面。石蒜(Lycoris radiaca)球茎经匀浆、浸取、硫酸铵分级沉淀得到粗品，将粗品过阳离子交换柱(CM-Sepharose)、阴离子交换柱(DEAE-S...
- 吴传芳
- 关键词：圆二色谱
- 文献传递
- 墨兰甘露糖结合蛋白
- 本发明通过对兰科家族植物的甘露糖结合蛋白基因进行序列比对，得到甘露糖结合蛋白基因的保守序列，并以此设计简并引物，用3’RACE和5’RACE的方法克隆出了墨兰甘露糖结合蛋白的基因，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO...
- 鲍锦库吴传芳梁丹凤龙鑫袁媛
- 文献传递
- 长非编码RNA LINC00941在结直肠癌中的表达及对细胞增殖的影响被引量：5
- 2017年
- 为了研究与细胞分化相关的长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00941在肿瘤发生发展中的作用,通过实时荧光定量PCR技术检测LINC00941在6种不同类型的人类癌细胞和正常胚胎肾细胞HEK-293细胞中的表达水平,结果表明,LINC00941在结直肠癌细胞HCT116和HCT116p53-/-、肺癌细胞A549和NCI-H1299、黑素瘤细胞Stilling中均有较高的表达水平,在结直肠癌细胞中表达水平最高.以结直肠癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织为材料,实时荧光定量PCR检测LINC00941的表达水平发现,肿瘤组织中LINC00941RNA的表达水平显著高于癌旁组织.通过shRNA(short hairpin RNA)干扰技术降低HCT116细胞中的LINC00941 RNA水平,导致细胞增殖速度下降,说明LINC00941与结直肠癌的发生发展相关.
- 王承恩罗玉贺正池肖雪薇李宗鑫兰洋吴传芳
- 关键词：结直肠癌SHRNA细胞增殖
