刘晓辉
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- PDGF—α受体沉默对人晶状体上皮细胞增殖及凋亡的影响
- 2012年
- 目的研究血小板源性生长因子-α受体沉默对人晶状体上皮细胞增殖及凋亡的影响，为治疗后发性白内障提供实验依据。方法体外培养人晶状体上皮细胞SRA01／04，用脂质体将合成的血小板源性生长因子—α受体反义寡核苷酸（PDGFR—α ASODN）处理SRA01／04，MTT法检测细胞的增殖；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡；Hoechst33258荧光染料染色法分析细胞凋亡；RT—PCR检测PDGF-α受体的表达。结果PDGFR—αASODN作用于SRA01／04细胞24h-72h，SRA01／04细胞增殖受抑制，且72h时对细胞的抑制作用最明显，与低浓度药物组比较，高浓度药物组对细胞的抑制作用增强（P〈0．05）；实验组细胞凋亡率分别为（3．22±0．25）％、（5．29±0．27）％，与对照组（0．75±0．67）％和错义寡核苷酸组（1．46±0．60）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组G1期细胞分布率分别为（53．31±1．30）％、（59．98±0.95）％，与对照组（47．73±1．18）％和错义寡核苷酸组（49．48±1．09）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组PDGF—α受体在SRA01／04中表达下调。结论PDGF-α受体沉默能抑制人晶状体上皮细胞的增殖，诱导其凋亡。
- 彭燕一刘晓辉黄岚珍
- 关键词：沉默人晶状体上皮细胞凋亡
- 血小板源性生长因子-α受体沉默对人晶状体上皮细胞增生的抑制作用被引量：3
- 2013年
- 背景 血小板源性生长因子（PDGF）可以影响人晶状体上皮细胞（LECs）的增生过程,而LECs可终生表达PDGF-α受体（PDGFR-α）,PDGFR-α活化后与PDGF结合能促进细胞的DNA合成.反义寡核苷酸（ASODN）技术沉默PDGFR-α基因表达可抑制增生性玻璃体视网膜病变（PVR）过程中视网膜色素上皮（RPE）细胞的增生,并诱导细胞凋亡,但通过该技术是否能够抑制LECs的增生鲜见报道. 目的 研究PDGFR-α沉默对LECs增生的影响,为防治晶状体后囊膜混浊（PCO）提供实验依据.方法 用含胎牛血清的改良型α-MEM培养液体外培养人LECs系SRA01/04细胞株并传代,转染前1d用无抗生素的培养基培养细胞至30％ ～ 50％融合后将细胞以5×104个/孔的密度接种于6孔板,接种24 h后采用脂质体进行LECs转染,按照转染物的不同分为空白对照组（不加PDGFR-α ASODN的空白脂质体）、PDGFR-α错义寡核苷酸（MSODN）组（含PDGFR-α ASODN和脂质体）、0.5μmol/L PDGFR-α ASODN组（含0.5 μmol/L PDGFR-αASODN和脂质体）和1.0μmol/L PDGFR-α ASODN组（含1.0 μmol/L PDGFR-α ASODN和脂质体）.转染24 h后倒置显微镜下观察各组人LECs的形态学变化,采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测各组LECs中PDGFR-αmRNA的表达；用MTT比色法检测各组细胞的增生（A490）值,计算转染物对LECs的抑制率；采用流式细胞仪分析各组LECs的细胞周期. 结果 转染后24 h,空白对照组及PDGFR-α MSODN组LECs生长良好,细胞呈多边形,数目多；而PDGFR-α ASODN组细胞呈圆形,细胞数目明显减少.RT-PCR检测表明,空白对照组及PDGFR-α MSODN组PDGFR-α mRNA在LECs中的表达较强,而在PDGFR-α ASODN组中的表达强度明显减弱,以1.0 μmol/L PDGFR-α ASODN组更为明显.空白对照组、PDGFR-α MSODN组、0.5μmol/L PDGFR-αASODN组及1.0μmol/L PDGFR-α ASODN组的A490值分别为0.661±0.036、0.655 ±40.016、0.529±0.030和0.441 ±0.039,其中0.5μmol/L PDGFR-α ASODN组及1.0μmol/L P
- 刘晓辉彭燕一范才文黄岚珍
- 关键词：反义寡核苷酸晶状体上皮细胞细胞转染增生
- PDGFR-α反义寡核苷酸对晶状体上皮细胞增殖的影响及机制初探
- 2013年
- 目的观察血小板源性生长因子-α受体反义寡核苷酸(PDGFR-αASODN)对体外培养兔晶状体上皮细胞N/N1003A增殖的影响,并探讨其作用机制。方法使用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将PDGFR-αASODN转染入N/N1003A细胞,MTT法检测细胞的增殖活性,RT-PCR法检测PDGFR-αmRNA的表达,相差显微镜和透射电镜观察细胞形态和超微结构改变;流式细胞仪检测细胞的周期和凋亡率。结果 PDGFR-αASODN处理后,N/N1003A细胞增殖明显受到抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05);PDGFR-αmRNA表达明显下调(P<0.05);透射电镜观察到细胞出现典型的凋亡特征;细胞凋亡率显著升高(P<0.05),同时细胞阻滞于G1期。结论 PDGFR-αASODN可沉默兔晶状体上皮细胞中PDGFR-α基因表达,抑制细胞增殖,并能诱导细胞凋亡,为应用PDGFR-αASODN预防后囊膜混浊提供实验依据。
- 丁芝祥邱梅园刘晓辉彭燕一
- 关键词：反义寡核苷酸晶状体上皮细胞增殖凋亡
- 血小板源性生长因子与后发性白内障的研究进展
- 2011年
- 后发性白内障(posterior capsule opacification,PCO)是白内障手术后较为常见的并发症。近年来随着分子生物学及细胞生物学技术的发展,发现生长因子类物质如血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)与晶状体上皮细胞的增殖、迁移、纤维分化有密切的关系,对PDGF进行适当的调控可能对于防治PCO有重要意义。我们围绕PDGF对晶状体上皮细胞的作用、PDGF及其受体对PCO形成的影响作简要综述。
- 刘晓辉彭燕一
- 关键词：血小板源性生长因子晶状体上皮细胞增殖后发性白内障
