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刘方: 作品数：198 被引量：708H指数：14; 供职机构：中国农业科学院棉花研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>

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棉花DNA纤维原位杂交技术: 本发明提供了一种棉花DNA纤维荧光原位杂交(Fiber-FISH)方法，该方法采用刀切法制备细胞核，引流法拉伸DNA纤维，分别以基因组和45S rDNA为探针进行DNA纤维荧光原位杂交。刀切法提取细胞核，在提取液中加入P...; 彭仁海王坤波宋国立王春英张香娣刘方黎绍惠王玉红; 文献传递

转基因棉花早代材料细胞学变异研究被引量：9: 2001年; 农杆菌介导转基因棉花早代 ( T0 )材料 ,花粉母细胞的染色体构型变异很大 ,只有部分二价体 ( 7～ 1 6个 ) ,多数是单价体 ,没有更高的价体。二价体位于赤道面 ,但多形成染色体桥。单价体多散布在两极。减数分裂后形成 1～ 8个分体的多分体 ,其中四分体虽然比例很高 ,多为畸形。染色体数目的减少、PMC染色体构型变异等。; 王坤波宋国立李付广张香娣黎绍惠王春英刘方李凤莲; 关键词：农杆菌介导转基因棉花染色体构型

棉花新材料A111基于cpDNA的种性初步鉴定被引量：2: 2013年; A111是从澳大利亚收集到的一份新的野生棉,属于澳洲棉、或奈尔逊氏棉乃至一个新的棉种,归属一直没定论。为鉴别A111与澳大利亚以及世界其它地区棉种的差别,以24个棉种(变种)为参照,分析了A111的cpDNA序列特点。结果表明,在15条cpDNA基本序列中,筛选出了8条序列适合于棉属植物系统发育和种性鉴别研究。这8条序列的变异率和识别率均较高,其中rps16识别率最高(100%)。基于8个序列组合的系统发育分析,能识别单个棉种。聚类结果显示,棉属分为两大分支,A111与奈尔逊氏棉(G3)处于澳洲野生棉分支中的姊妹分支。序列比对结果表明,A111的叶绿体序列存在特异的插入与缺失,明显区别于其他棉种。由此,初步鉴定A111是澳洲野生棉的一个新种,与奈尔逊氏棉的亲缘关系最近。; 冯坤刘方蔡小彦黎绍惠周忠丽张先亮华金平王坤波; 关键词：CPDNA 棉属物种鉴定

棉花组织培养直接胚胎发生和植株再生: ＜正＞棉花组织培养近年来发展很快,先后从陆地棉（Gossypiumhirsutum L.）、海岛棉（G.barbadenseL.）、非洲棉（G.herbaceum L.）、克劳茨基棉（G.klotzschianum A...; 王清连许欣然刘方周云刘志红胡佩实; 文献传递

棉花SSR分子标记关键技术体系与集成应用: 陈浩东肖才升王为周德桂葛兆建李庠匡政成汪保华刘方潘宗瑾; 项目背景和研究内容：项目针对开发的棉花SSR标记(Simple Sequence Repeat，简单序列重复)存在冗余性、分子标记辅助选择效率低、分子育种和常规育种脱节等问题，以及品种权保护、种子质量控制、种子纯度高通量...; 关键词：; 关键词：棉花遗传育种种质资源利用

利用比较转录组对四倍体棉花耐盐性状进行遗传解析: 本研究在300mmol·L-1盐胁迫处理3h后对4个不同棉种(G.hirsutum TM-1、G.hirsutum race mariegalante 85、G.barbadense 3-79和G.toment...; 王星星刘方周忠丽蔡小彦王坤波; 关键词：耐盐性状

FISH制片再次杂交的方法: 本发明属于分子细胞遗传学领域，具体涉及一种FISH制片再次杂交的方法。该方法主要包括以下步骤：制片在首次荧光原位杂交后，浸泡于2×SSC中以洗掉盖片，然后在2×SSC中浸泡3×5min；随后把制片放入90℃的2×SSC中...; 崔兴雷刘玉玲刘方王星星蔡小彦彭仁海周忠丽王春英王玉红王坤波; 文献传递

棉属D基因组棉种着丝粒FISH标记的筛选初报被引量：4: 2010年; 为了筛选着丝粒探针,在棉花染色体荧光原位杂交中标记染色体着丝粒区域,以便于构建棉花粗线期染色体细胞遗传学图谱.在棉花遗传连锁图上选择尽可能接近着丝粒区的单拷贝的分子标记,以海岛棉pima90-53的BAC文库为素材,采用两维筛库法从该文库中筛选BAC克隆,然后用BAC-FISH技术进行染色体定位检测.用10号染色体长臂末端的SSR引物BNL3563筛选到一个BAC克隆150D24,该克隆在四倍体陆地棉和海岛棉部分染色体着丝粒区有杂交信号,但信号强度不高.以二倍体D基因组为靶DNA进行FISH时,染色体着丝粒区有明显信号,但是以二倍体A,C,E等基因组棉种染色体为靶DNA进行FISH时,染色体着丝粒区未发现杂交信号.BAC克隆150D24可能含有D组特有卫星重复序列,可用作棉属D基因组棉种(包括四倍体棉种D亚组)的着丝粒FISH探针.; 吴琼程华刘方王省芬王春英宋国立黎绍惠张香娣王玉红马峙英王坤波; 关键词：FISH 着丝粒 BAC

半野生棉对次生盐碱苗期水培抗性鉴定方法: 本发明涉及植物抗逆形态学及生理学领域，具体涉及半野生棉苗期次生盐碱抗性鉴定的方法。所述方法包括步骤：种子准备；种子发芽；移苗水培；胁迫处理；性状调查；抗性评价。本发明首次在室内鉴定苗期半野生棉的次生盐碱抗性，且鉴定不受季...; 许艳超韦洋洋周忠丽李振庆刘方蔡小彦王星星王玉红王春英张振梅王坤波; 文献传递