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何成强: 作品数：43 被引量：70H指数：5; 供职机构：山东师范大学更多>>; 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金黑龙江省科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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衰变加速因子结构基因及调控被引量：1: 1998年; 衰变加速因子DAF是补体激活调节剂(RCA)家族中重要成员之一,在体内的存在形式有3种:分泌型DAF、跨膜型DAF和GPI锚链型DAF。DAF的分子结构、基因结构、合成及基因表达调控等方面的进展近年颇为迅速。DAF分子的研究,使人们了解了在细胞表面控制补体活性的分子基础。DAF基因克隆表达及转基因动物研制成功,为DAF的研究和应用开辟了广阔的前景。; 李景鹏何成强; 关键词：衰变加速因子基因表达基因调控糖蛋白; 全文增补中

鸡贫血病毒vp3突变体的构建被引量：2: 2004年; 以本实验室克隆保存的含野生型鸡贫血病毒 ( CAV)全基因序列的 p UC18-CAV为模板 ,通过双向聚合酶链式反应 ( PCR)的方法在CAV的 DNA序列中制造定点突变并新增特定限制性酶切位点 ,得到载有 CAV突变体的p UC18-CAVm。突变体中致病基因 vp3的起始密码子 ATG(在 m RNA是 AUG)突变为 ACG而失去翻译起始位点的功能 ,虽然 vp3基因完全重叠于 vp2基因内部 ,但由于读码框的不同和密码子的简并性 ,突变位点的碱基变化并未引起VP2蛋白的氨基酸残基序列发生变化 ,从而保证了突变体和原始病毒抗原性的一致 ,为开发鸡贫血病毒的; 张恒何成强李云龙; 关键词：贫血病毒 VP3 DNA疫苗定点突变传染性贫血病致病蛋白

蛋白质修饰与自身免疫: 2003年; 细胞内蛋白质翻译后需经多种修饰 ,以维持蛋白质正常的结构和生理活动。蛋白质的修饰受到严格的调节 ,即使对异常修饰的蛋白质 ,细胞可通过各种蛋白酶加以降解 ,因此不会对人自身造成损伤。有些蛋白经异常的翻译后修饰作用 ,可出现新的抗原表位而形成新的自身抗原 ,引致人体针对这些抗原的异常免疫应答 ,出现各种自身免疫病。文章列举与蛋白修饰有关的常见自身免疫病 ,及每种抗原的修饰方式。并以EAE、SLE和CIA等典型的自身免疫病为例 ,阐述蛋白修饰与自身抗原形成的关系 ,还初步探讨蛋白修饰诱导自身免疫的可能机制。; 何成强丁乃峥等; 关键词：抗原决定簇

应用聚合酶链反应技术检测沙门氏菌被引量：2: 1998年; 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测沙门氏菌，使用了２对引物ＨＩ和ｐｈｏＰ。ＨＩ引物对各长２０ＮＴ，根据鞭毛Ｉ相抗原基因自行设计，扩增序列长２６９ｂｐ；ｐｈｏＰ引物对各长２１ＮＴ，根据ｐｈｏＰ／ｐｈｏＱ基因设计，扩增片段长２９９ｂｐ。ＰＣＲ采用５０μＬ反应体系。ｄＮＴＰＳ各１００μｍｏｌ／Ｌ，引物各１μｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ２＋２．５ｍｍｏｌ／Ｌ，酶２Ｕ。三温段ＰＣＲ循环条件为：９７℃预变性７ｍｉｎ；９４℃变性６０ｓ、５５℃复性４０ｓ、７２℃延伸６０ｓ，３５个循环；７２℃延伸７ｍｉｎ。检测８株标准阳性菌，结果都出现了ＨＩ引物和ｐｈｏＰ引物特异带，标准阴性菌３株只出现ｐｈｏＰ特异带，说明ＨＩ引物特异性很强。; 李景鹏李成梅虞塞明何成强丁乃峥吴丹; 关键词：聚合酶链反应沙门氏菌 PCR 兽医诊断学

BVDV Singer_Arg株全基因组克隆及其感染性RNA制备: 2022年; 克隆牛病毒性腹泻病毒Singer_Arg株全长cDNA,并获得其感染性RNA。将病毒基因组分段克隆后再拼接成全长cDNA;通过巨细胞病毒即早期启动子控制病毒cDNA转录,5'-UTR上游的锤头状核酶和3'-UTR下游的丁肝病毒核酶控制转录产物5'-UTR和3'-UTR的完整性和准确性,以获得不经体外转录,直接转染细胞产生病毒感染性RNA的反向遗传操作系统;并通过Western blot、RT-PCR技术、免疫荧光等方法对子代病毒进行了一系列鉴定与遗传稳定性分析。获得了Singer_Arg株全基因组序列并通过反向遗传拯救出该毒株。成功构建了基于Singer_Arg株的BVDV反向遗传操作系统,为BVDV疫苗研发和基础研究提供了技术平台。; 秦春雪宋现梅王洪梅丁乃峥何洪彬何成强; 关键词：牛病毒性腹泻病毒反向遗传学全基因组克隆

牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1: 2022年; 【目的】应用大肠杆菌表达系统表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0蛋白,纯化后免疫小鼠制备E0蛋白多克隆抗体用于BVDV的检测技术研究。【方法】采用PCR扩增BVDV的E0基因,将其连接至pET-28a(+)构建重组表达载体pET28a-E0。将重组质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导、亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定E0蛋白的表达情况。将纯化的E0蛋白免疫小鼠制备BVDV E0多克隆抗体,并通过Western blotting、细胞免疫荧光试验、ELISA等试验检测该多克隆抗体的特异性和效价,以及在BVDV检测中的应用。【结果】成功构建原核表达载体pET28a-E0,表达并纯化E0蛋白,制备的BVDV E0多克隆抗体可特异性识别纯化的E0蛋白及pET28a-E0在BL21中表达的总蛋白。进一步Western blotting、细胞免疫荧光试验、双抗夹心法ELISA证明制备的E0多克隆抗体可用于BVDV的检测。间接ELISA结果表明,E0多克隆抗体效价高于1∶64000。【结论】制备的BVDV E0多克隆抗体效价高、抗原结合特异性强,为BVDV E0蛋白的生物学功能研究及BVDV的检测提供了材料支持。; 王炜韩慧慧丁乃峥何成强; 关键词：E0基因原核表达多克隆抗体

沙门氏菌临床检测比较研究被引量：4: 1997年; 比较研究了临床检测沙门的三种不同方法，采用聚合酶链反应技术，玻片免疫凝集试验和生化检测方法对３０份样品检出阳性率分别８３％、７３％和３０％。; 李景鹏李成梅何成强吴丹张建光; 关键词：聚合酶链反应免疫沙门氏菌

副流感病毒自然状态下同源重组的鉴定: 本研究中，我们分离并鉴定了重组血清型HPIV3，并对已报道的PIV基因序列进行分析，发现了多个重组嵌合体，表明负链RNA病毒在自然状态下具有同源重组现象，并促进遗传多样性的产生，同时指明本研究提供了存在野生型重组PIV的...; 杨慧婷何成强姜庆周旭白慕群司红丽王晓静卢艳赵衡何洪彬; 关键词：副流感病毒同源重组分子机制动物免疫

牛病毒性腹泻病毒E2蛋白抗原多表位融合肽及其制备与应用: 本发明公开了BVDV E2多表位融合肽及其制备方法，即基因合成优选出的BVDV‑1和BVDV‑2的E2蛋白的各2个抗原表位串联序列，并将序列克隆到pET‑28a(+)载体，转化大肠杆菌DH‑5α，将正确的重组载体转化大肠...; 何洪彬王洪梅何成强李书霞侯佩莉赵贵民; 文献传递