黄元
- 作品数：20 被引量：41H指数：4
- 供职机构：广东省农业科学院动物卫生研究所更多>>
- 发文基金：广东省农科院院长基金东莞市科技局科研立项广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猫杯状病毒感染性克隆及其构建方法和应用
- 本发明公开了猫杯状病毒感染性克隆，通过在FCV病毒的全长cDNA的两端连接酶切位点，之后将序列连接到表达载体中得到。实验结果表明，使用本发明克隆生产得到的FCV，与亲本毒具有相似的特性，具有很好地感染性，可使细胞明显变性...
- 向华徐敏黄元陈晶
- 百迪康消毒剂对副猪嗜血杆菌的杀灭试验
- 2010年
- 为了解一种主要成分为戊二醛、癸甲溴铵溶液的消毒剂百迪康对副猪嗜血杆菌3个血清型菌株的杀灭效果,采用悬液定量杀灭试验、能量试验等方法进行试验。结果显示:将该消毒剂稀释到1:1 000后,作用10min,对副猪嗜血杆菌的杀灭率可达到100%;在稀释1 500倍和2 000倍时,杀菌率效果良好,仅作用2min,杀菌率均可达到98%以上。表明百迪康对副猪嗜血杆菌均有较好的杀灭效果。
- 冷淑珍黄元梁瑞玲李惠华郑庆禄
- 关键词：副猪嗜血杆菌杀灭试验
- 猪流感病毒一步法荧光定量RT-PCR诊断方法的建立被引量：6
- 2011年
- 为了建立一种在猪流感流行病学调查和临床诊断中应用的快速高效的诊断方法,根据猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)M基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条特异性TaqMan探针,建立了以RNA为反应模板的一步法荧光定量RT-PCR诊断方法。使用含有M基因的重组质粒作为标准品绘制标准曲线,该曲线效率值为2.014,误差值为0.005。试验结果表明,该方法灵敏度极高,最低可检测到10 copies的核酸;临床样品检测结果也显示其灵敏度高于普通PCR和病毒分离法;特异性强,对猪群常见的其他6种病毒检测结果均为阴性。临床样品检测显示,该方法操作简单,可以用RNA作为模板直接检测,节省时间,而且特异性好、灵敏度高,是可以应用于猪流感流行病学调查的一种可靠的诊断方法。
- 徐敏李志强黄元陈晶陈少勤张健騑赵亚华宣华向华
- 关键词：猪流感病毒TAQMAN探针
- 一种复合鸭α干扰素基因、其重组载体及应用
- 本发明公开了一种复合鸭α干扰素基因、其重组载体及应用。所述复合鸭α干扰素基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。本发明经优化后的复合鸭α干扰素基因可在毕赤氏酵母基因工程菌中表达生产复合鸭α干扰素，所得到的复合鸭α干扰素...
- 向华黄元王晓虎陈晶张健騑
- 文献传递
- 复合亚氯酸钠熏蒸剂对鸡伤寒沙门氏菌的杀菌效果试验被引量：1
- 2016年
- 测试复合亚氯酸钠熏蒸剂对鸡伤寒沙门氏菌的杀菌效果,培养基表面涂布法测定结果表明,熏蒸消毒后鸡沙门氏菌均全部杀灭;玻片法测定结果表明,该熏蒸剂对鸡沙门氏菌的杀菌率为99.995%。试验结果表明,复合亚氯酸钠熏蒸剂熏蒸消毒对鸡沙门氏菌的杀菌效果显著。
- 冷淑珍许详黄元尹曲平郑庆禄
- 关键词：鸡伤寒沙门氏菌杀菌效果
- 猫杯状病毒感染性克隆及其构建方法和应用
- 本发明公开了猫杯状病毒感染性克隆，通过在FCV病毒的全长cDNA的两端连接酶切位点，之后将序列连接到表达载体中得到。实验结果表明，使用本发明克隆生产得到的FCV，与亲本毒具有相似的特性，具有很好地感染性，可使细胞明显变性...
- 向华徐敏黄元陈晶
- 文献传递
- 猪Torque teno病毒广东株的PCR检测和序列分析被引量：1
- 2012年
- 目的 Torque teno病毒(Torque teno virus,TTV)是近年来才发现的一种单股负链DNA病毒。猪Torque teno病毒(Torque teno sus virus,TTsuV)在猪群中大量流行,被认为与猪的断奶后多系统衰竭综合征(post-weaning multi-systemic wastingsyndrome,PMWS)等疾病有关。本文旨在为广东TTsuV的流行病学提供数据。方法本文根据TTsuV的非编码区(UTR)合成引物,对来自广东2个猪场的14份猪血清进行了PCR检测。将2个猪场的TTsuV1和TTsuV2PCR产物各取1份,共4份PCR产物,进行克隆,测序并分析。结果 PCR共获得10份TTsuV1阳性(71%),8份TTsuV2阳性(57%),其中TTsuV1和TTsuV2双重阳性的为5份(36%)。PCR产物与参考毒株相应序列的分析证实,GDT1-1和GDT1-2的UTR片段均与TTsuV1参考毒株高度相似,GDT2-1和GDT2-2的UTR片段与TTsuV2参考毒株高度相似。结论广东至少存在两种血清型的TTsuV,在一些猪场有较高的检出率。TTsuV可能具有潜在的致病性,其公共卫生意义不容忽视。
- 黄元徐敏陈少勤王晓虎向华张健騑
- 关键词：PCR
- 猫杯状病毒感染性克隆的构建
- 2014年
- 为了构建猫杯状病毒感染性克隆,在对FCV CH-GD株全长基因组测序基础上,引入单一酶切位点和T7 RNA聚合酶启动子,用重组PCR方法,获得全长基因组c DNA,体外转录后转染F81细胞。结果成功构建含单一酶切位点的FCV全长c DNA克隆,体外转录并转染F81细胞,培养物上清液对F81细胞有感染性,细胞出现典型病变。表明获得了FCV CH-GD株的感染性克隆,为进一步研究杯状病毒的生物学特性和致病机理及研发新的疫苗奠定了基础。
- 郑翠玲向华黄元陈晶王晓虎宣华
- 关键词：感染性克隆RT-PCRRNA
- 表达猪源流感病毒HA基因重组伪狂犬病毒的构建被引量：4
- 2009年
- 目的获得共表达H1N1和H3N2亚型猪源流感病毒(SIV)HA基因的重组伪狂犬病毒(PRV)。方法克隆H1N1以及H3N2亚型SIV的HA基因,将HA基因与PUC-TK转移载体进行酶切、连接来构建pUC-P-H1A-H3A重组表达质粒,用脂质体将其转染已感染PRV亲本病毒的Vero细胞,使其在Vero细胞内与PRV基因组发生同源重组。运用RT-PCR、间接免疫荧光等方法检测外源基因重组情况及其在Vero细胞内的表达,并通过Western-blot对表达产物进行免疫原性鉴定。结果实验结果显示,外源基因HA已重组入PRV基因组,并在Vero细胞中有效表达,且所表达蛋白具有免疫原性。结论HA基因重组PRV的构建成功为SIVHA基因重组PRV活载体疫苗的研究奠定了初步基础。
- 李敏向华张丽黄元王贵平宣华
- 关键词：SIVHA基因TK
- 鸭α-干扰素的真核与原核表达及生物活性的比较被引量：3
- 2014年
- 为了研究鸭α-干扰素在真核和原核中表达的不同,试验构建真核重组质粒Duifnα-pPICZα在巴斯德毕赤酵母X33株中实现高效分泌表达,构建原核重组质粒pET24α-Duifnα在大肠杆菌DH5α中表达蛋白,His·Tag包涵体蛋白纯化得到高纯度蛋白液,并进行了SDS-PAGE检测。结果表明:鸭α-干扰素分子质量为21 ku,通过鸭胚测得真核重组质粒表达的鸭α-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对鸭胚细胞的攻击,最高效价达1×105U/mL;通过IPTG诱导实现高蛋白表达,表达的量比真核质粒表达的多,纯化后的原核重组质粒表达的鸭α-干扰素也能抑制VSV对鸭胚细胞的攻击,最高效价达1×106U/mL。说明原核表达蛋白的活性比真核高10个单位。
- 邹欢刘宇黄元王晓虎陈晶张健騑向华
- 关键词：A-干扰素真核原核生物活性
