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魏淼: 作品数：21 被引量：16H指数：1; 供职机构：南京工业大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学动力工程及工程热物理更多>>

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大肠杆菌甘油脱氢酶基因gldA的克隆表达及初步研究: 甘油脱氢酶催化甘油生成二羟基丙酮,是甘油利用过程的关键酶.本文克隆了大肠杆菌W3110 中甘油脱氢酶基因gldA,构建了诱导型表达载体pTrcgldA,并将其导入大肠杆菌BL21(DE3),获得了高表达甘油脱氢酶基因的重...; 魏淼刘欢李艳许琳严明; 关键词：甘油脱氢酶大肠杆菌克隆表达二羟基丙酮; 文献传递

一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌及其应用: 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces ...; 严明李艳刘欢许琳郝宁魏淼许昇安明东王珊珊安芳芳郝思清顾金海; 文献传递

一种酶法不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯的方法: 本发明公开了一种酶法不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯的方法。即以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的羰酰还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟...; 严明郝宁沙风魏淼; 文献传递

一种固定化磷脂酶D催化制备磷脂酰丝氨酸的方法: 本发明公开了一种固定化磷脂酶D催化制备磷脂酰丝氨酸的方法，该方法包括如下步骤：(1)以甲壳素为载体，以戊二醛为交联试剂，固定游离磷脂酶D得到磷脂酶D的固定化酶；(2)以步骤(1)制备得到的磷脂酶D的固定化酶为催化剂，以醋...; 严明高璐魏淼许琳郝宁李艳; 文献传递

氧化葡萄糖酸杆菌中5-葡萄糖酸脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质分析被引量：1: 2014年; 根据NCBI上的报道的基因序列设计引物,以氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)H24的基因组为模板,获得5-葡萄糖酸脱氢酶(Ga5DH)基因,将其与表达载体pET-28a连接,构建重组质粒pET-28a-Ga5DH,并转化大肠杆菌Rosetta进行表达。SDS-PAGE检测结果显示,表达蛋白的分子大小为26.5 kD,纯化后酶活达7.83 U/mg。酶学性质分析表明,该酶的最适反应温度为40℃,最适pH为11。在pH 9-11的缓冲中保温8 h,酶活力仍有80%以上的残余。该酶对多种有机溶剂具有良好的耐受性。; 李翎许琳魏淼李艳严明; 关键词：氧化葡萄糖酸杆菌酶学性质

一种醇脱氢酶在催化生成(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶为催化剂，以4-氯乙酰乙...; 严明许琳顾金海郝宁李艳魏淼; 文献传递

一种酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法: 本发明公开了一种酶法不对称还原制备(S)‑N‑boc‑3‑羟基哌啶的方法，以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶为催化剂，以N‑boc‑3‑哌啶酮为底物，NADH为辅酶体系，不对称还原制备(S...; 严明章志林魏淼陈晶晶; 文献传递

一种新型醛酮还原酶的克隆表达、性质研究以及在不对称合成(R)-CHBE中的应用: 2016年; 为开发催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)的新型催化剂,挖掘到了来自白色念珠菌SC5314中的一种NADPH辅酶依赖型醛酮还原酶CAK基因(cak),并将该基因在大肠杆菌中表达。将重组酶进行纯化后,测定其酶学性质,并构建了以葡萄糖为辅底物的双酶偶联辅酶再生系统,考察其不对称转化制备(R)-CHBE的能力。结果表明:CAK对多种醛酮类化合物有催化活性,其催化COBE的最适反应温度为40℃,最适p H为5。CAK在40℃下以及酸性条件中能保持较好的稳定性。Mg2+、Na+、K+对酶活有一定的激活作用,而Cu2+存在条件下酶会彻底失活。乙酸乙酯、邻苯二甲酸二丁酯对酶活的抑制作用较小。利用双酶偶联辅酶再生系统不对称转化制备(R)-CHBE。在合适的条件下,转化600 mmol/L的底物,产率达80.6%,产物对映体过量值(e.e.值)>99%。; 张瑾成魏淼许琳严明; 关键词：醛酮还原酶蛋白纯化酶学性质

一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株及其构建方法和应用: 本发明公开了一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株及其构建方法和应用。克隆得到Thermus thermophilus HB27半乳糖苷酶基因bgal，并将其插入到真核表达载体pPIC9K上，转化毕赤酵母菌株GS 115内，可...; 严明安芳芳郝宁李艳许琳魏淼王珊珊刘欢

一种来源于丁香假单胞菌的山梨醇脱氢酶基因及其应用: 本发明公开了一种来源于丁香假单胞菌的山梨醇脱氢酶基因及其应用，基因核酸序列如SEQ ID NO：1所示，通过构建重组载体并在大肠杆菌中克隆表达，该基因编码的山梨醇脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。山梨醇脱氢酶...; 严明沙凤魏淼李艳章志林; 文献传递