马良宏
- 作品数：55 被引量：128H指数：5
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 淫羊藿多糖对弱精症精子冷冻保存效果的影响被引量：4
- 2021年
- 常用的冷冻保护剂对于弱精症精子冻融效果欠佳,本实验通过在人精子冷冻保护液中添加淫羊藿多糖(EPS),研究其对冻融过程中精子活力及精子功能的影响。选择弱精症精液15例,液化后的精液样本分别与甘油-卵黄-柠檬酸盐(GEYC)冷冻保护液或含有EPS冷冻保护液混匀冷冻。检测其精子的活力、存活率以及精子形态、丙二醛(MDA)以及活性氧(ROS)的含量,精子核碎裂指数(DFI),精子顶体反应率(AR),并通过透射电镜观察精子微观结构的变化。添加EPS后精子MDA和ROS水平明显降低,含有3 mg/mL EPS的冷冻组抗氧化性明显优于其他组(P<0.05);含有EPS的冷冻组复苏后的存活率以及精子头部正常形态率都明显高于未添加组,但是两组间的精子前向运动PR无显著差异;此外,添加EPS的冷冻组精子DFI下降显著,AR明显升高;电镜观察精子头部显微结构显示,添加EPS组的精子在质膜以及顶体膜完整性上明显优于未添加组。结果提示,在精液冷冻保护液中添加EPS可降低精子活性氧的水平,保护精子顶体结构和功能,从而改善解冻后精子顶体功能和精子核的完整性。
- 周岳颜贝田稼贾邵彤裴承斌王红红王红红王红燕
- 关键词：淫羊藿多糖氧化应激顶体反应
- 枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响被引量：26
- 2011年
- 背景:精原干细胞移植对不育具有潜在的临床应用价值,体外建立精原干细胞的培养系统获得数量较多的精原干细胞,仍是目前研究中亟待解决的问题。目的:观察枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响。方法:采用两步酶消化法获取出生4～6d雄性C57BL/6小鼠睾丸Sertoli细胞与精原干细胞,将精原干细胞接种在Sertoli细胞饲养层上,再加入枸杞多糖或联合细胞因子添加到细胞培养液中。1周后以流式细胞仪检测细胞周期及细胞活性率,并检测各组精原干细胞GFRa-1、Thy-1、c-kit的阳性率。结果与结论:单独加入枸杞多糖后精原干细胞数量明显增加,增殖明显,联合加入胶质细胞源性神经营养因子与白血病抑制因子精原干细胞增殖更加明显(P<0.05)。并发现体外培养1周后的精原干细胞仍保持其睾丸组织内的精原干细胞特征,大多仍维持在未分化状态。表明在枸杞多糖或枸杞多糖联合胶质细胞源性神经营养因子及白血病抑制因子作用下,可促进精原干细胞体外增殖。
- 马良宏邱志军闫圣男冯立新王燕蓉李培军陈福宝
- 关键词：精原干细胞枸杞多糖体外增殖
- 环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡作用及对PCA3基因表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的作用及对PCA3基因表达的影响。方法:不同浓度环巴胺(1、5、10、15μmol/L)干预LNCaP细胞,以只加入RPMI 1640培养液为空白对照组,分别在不同作用时间(24、48、72h),用MTT法检测其对细胞增殖的抑制、流式细胞术观察细胞凋亡率变化、Hoechst染色观察凋亡细胞形态变化、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)观察对PCA3基因表达的影响。结果:5、10、15μmol/L环巴胺对LNCaP细胞增殖均有显著抑制作用,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.01),10μmol/L组于48h达到半数抑制量(IC50);10、15μmol/L组24、48、72hLNCaP细胞的凋亡率分别为37.21%、57.38%、57.98%和21.16%、71.31%、72.90%,与空白对照组相比差异均有显著性(P<0.01)。随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长,LNCaP细胞凋亡显著增加。PCA3基因的表达随着环巴胺浓度的上升呈现明显的递减趋势,较空白对照组显著降低(P<0.01)。浓度为10μmol/L时,不同作用时间PCA3基因的表达均极低。结论:环巴胺浓度为10、15μmol/L作用48、72h时能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并显著下调LNCaP细胞PCA3基因的表达。
- 吕志勇吕凌东马良宏
- 关键词：环巴胺LNCAP细胞前列腺癌
- 单次热应激处理对小鼠睾丸生精细胞的影响被引量：11
- 2016年
- 目的:探讨单次热应激对小鼠睾丸生精功能可复性研究。方法:C57雄性小鼠36只,随机按1、7、14 d各分为对照组(n=6)和热应激组(n=6)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别在43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取材。计算睾丸器官指数,HE染色观察睾丸组织结构变化,免疫组化染色检测早幼粒白血病锌指蛋白(PLZF)和联会复合体蛋白3(SCP-3)在睾丸组织中的定位及表达,Western印迹检测PLZF蛋白表达水平。结果:热应激组小鼠睾丸器官指数明显低于对照组(P<0.01)。HE染色可见,热应激组与对照组相比,热应激后第1天生精细胞排列松散,散落在生精小管中;第7天生精小管萎缩,排列疏松,生精细胞明显减少;第14天生精小管排列较为紧密,生精细胞数量增加,生精细胞层数增多。与对照组相比第1、7天热应激组SCP-3标记的精母细胞明显减少,第14天精母细胞数量开始恢复。Western印迹检测结果显示,PLZF蛋白在热应激处理后1 d表达量显著降低(0.19±0.02 vs 0.64±0.03,P<0.01),第7、14天又迅速增加(0.77±0.02、0.77±0.02),且显著高于对照组(P<0.01)。结论:小鼠睾丸热应激处理后可致生精功能发生障碍,随着时间的推移,这种损伤具有可复性。
- 马文智田洪成马会明杨晓霞裴秀英王燕蓉马良宏
- 关键词：生精功能可复性
- PI3K抑制剂LY294002对前列腺癌PC-3细胞增殖与凋亡的影响
- 2016年
- 目的研究PI3K信号通路抑制剂2-（4-吗琳基）-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮（LY294002）对前列腺癌PC-3细胞增殖与凋亡的影响。方法将不同浓度的LY294002（20~40μmol/L）作用于体外培养的前列腺癌PC-3细胞24 h和48 h,用MTT比色法测定LY294002对前列腺癌细胞增殖的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡情况,采用划痕实验及Transwell小室实验测定细胞侵袭和转移能力。结果不同浓度LY294002分别作用于PC-3细胞24 h、48 h,PC-3细胞存活率明显呈下降趋势,其中20μmol/L浓度下细胞存活率分别为（68±2）%、（45±1）%,40μmol/L浓度下细胞存活率分别为（48±2）%、（20±1）%。PC-3细胞经LY294002分别作用24 h、48 h后,细胞周期阻滞于G1期,G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,细胞有明显凋亡,并呈现时间和剂量依赖性（P〈0.05）,其侵袭和转移能力受到抑制。结论 LY294002可显著抑制体外培养的前列腺癌PC-3细胞生长增殖,诱导其凋亡,抑制其侵袭和转移能力。
- 马良宏强紫阳田洪成刘政李培军陈福宝裴秀英王燕蓉
- 关键词：前列腺癌磷脂酰肌醇3-激酶
- 环磷酰胺致大鼠膀胱黏膜P53/P21表达下调诱导膀胱肿瘤发生的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨环磷酰胺(CTX)诱导膀胱肿瘤的机制。方法 SD大鼠12只,随机分为两组,处理组和对照组各6只。处理组大鼠给与环磷酰胺100mg/kg腹腔注射,对照组给与同等剂量的生理盐水腹腔注射;24h后取膀胱,采用HE染色观察形态结构的变化,采用免疫组织化学方法检测KI67、P53、P21的表达定位,采用Western blot的方法检测KI67、P53、P21的蛋白表达量,并进行数据统计。结果 CTX处理组膀胱出现明显的水肿、出血、粘连;HE染色可见,膀胱黏膜弯曲减少、肿胀,细胞排列疏松,膀胱黏膜呈现毛刺样改变;免疫组织化学染色可见KI67/P53/P21在膀胱黏膜上皮细胞表达;Western blot检测及数据统计可知,KI67蛋白在CTX组表达高于对照组(P<0.05);P53/P21蛋白表达在CTX组低于对照组(P<0.05)。结论环磷酰胺可降低膀胱黏膜P53/P21蛋白的表达,诱导膀胱肿瘤的发生。
- 田洪成马良宏马会明马文智马璐李苗苗李培军裴秀英王燕蓉
- 关键词：环磷酰胺P53P21膀胱肿瘤
- 枸杞籽油对小鼠睾丸支持细胞衰老模型的抗炎作用被引量：5
- 2020年
- 目的探讨枸杞籽油对小鼠睾丸支持细胞(TM4)衰老模型的抗炎作用及机制。方法以不同浓度(50、100、150、200 mmol/L)的D-半乳糖(D-Gal)以不同时间(24、36、48 h)体外作用TM4细胞,通过CCK-8法和β-半乳糖苷酶染色筛选最佳时间浓度的D-Gal建立TM4衰老模型,Western blotting检测衰老因子P16^INK4A、P21^Waf1/Cip1、γH2A.X以及半乳糖苷酶蛋白的表达。以不同浓度(1%、3%、5%、10%)枸杞籽油含药血清提前干预TM4细胞衰老模型,并用CCK-8筛选枸杞籽油含药血清最佳浓度。Western blotting检测细胞炎症因子白细胞介素-1(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)与血红素加氧酶(HO-1)的表达以及p-P65/P65的相对表达量;细胞免疫荧光(IF)定位NF-κB表达。结果D-Gal建立TM4衰老模型结果显示,与正常细胞比较,200 mmol/L浓度的D-Gal干预48 h对细胞增殖有抑制作用,其抑制率为(14.890±0.892)%,差异有统计学意义(F=12.820,P=0.004;t=17.230,P<0.001),同时β-半乳糖苷酶染色结果显示,与正常细胞比较,细胞蓝染阳性率上升(t=5.243,P<0.001)。P16^INK4A(t=2.364,P=0.033)、P21^Waf1/Cip1(t=2.908,P=0.011)、γH2A.X(t=2.511,P=0.025)蛋白表达以及半乳糖苷酶(t=2.299,P=0.037)表达在衰老模型组升高。枸杞籽油抗TM4衰老的结果显示,3%浓度的枸杞籽油含药血清干预衰老TM4细胞后活性上升(t=5.399,P<0.001)。与正常细胞比较,TM4细胞衰老相关蛋白P16^INK4A(t=7.211,P<0.001)、P21^Waf1/Cip1(t=8.248,P<0.001)、γH2A.X(t=4.145,P<0.001)以及半乳糖苷酶(t=7.288,P<0.001)表达下调;与模型组相比,3%浓度的枸杞籽油含药血清干预后炎症因子TNF-α(t=4.992,P<0.001)、IL-1β(t=2.921,P=0.011)、IL-6(t=4.985,P<0.001)的表达下调,HO-1(t=6.047,P<0.001)与IL-10(t=2.315,P=0.036)表达上调;衰老TM4细胞p-P65/P65相对表达量在3%浓度的枸杞籽油含药血清干预后下调(t=24.630,P<0.001)。结论3%枸杞籽油含药血清干预,对衰老TM4细胞�
- 杨张杰王宇欣陈冬梅赵帅虎娜马良宏马会明
- 关键词：NF-ΚB通路
- 热应激对生精细胞影响机制的研究进展被引量：3
- 2017年
- 精子的形成是一个极其复杂的过程,热应激引起生精障碍的因素又是多种多样,本文拟综述热应激诱导生精细胞凋亡、生精细胞DNA完整性的破坏、HSP在热应激诱导生精障碍中的作用以及热应激诱导生精细胞微环境变化,并展望今后的研究方向。
- 田洪成马志芳杨波陈予军马良宏马文智
- 关键词：精子形成热应激生精细胞
- 取精室异常警示装置
- 取精室异常警示装置包括门禁装置、紧急报警装置、时间提示装置、电控锁、控制器，所述门禁装置、紧急报警装置、时间警示装置、电控锁与控制器电性连接，门禁装置设置在取精室的外面，紧急报警装置的触控端设置在取精室内，报警端设置在取...
- 颜贝马良宏王娟王红燕周岳田稼
- 文献传递
- 精原干细胞移植后的体内迁移、增殖和分化被引量：1
- 2010年
- 背景:精原干细胞移植对男性不育的治疗具有潜在的临床应用价值,但移植后干细胞体内迁移、增殖、分化的过程目前尚不完全清楚。目的:观测精原干细胞移植后的体内迁移、增殖和分化过程。方法:以出生后6～10d的雄性C57BL/6小鼠为供体,通过复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法获取精原干细胞;以出生后6周的雄性C57BL/6小鼠为受体,腹腔注射白消安,破坏其内源性生精功能。实验组采用曲细精管微注射法将供体精原干细胞移植入受体睾丸内,对移植后细胞进行PKH26-GL荧光追踪分析,观察其体内迁移过程,以Western Blot和RFQ-PCR法检测睾丸组织α6-Integrin,c-kit,SCF蛋白及mRNA的变化。以未接受化疗和细胞移植的正常同系生小鼠作为阳性对照组,以单侧睾丸曲细精管微注射移植细胞递质作为阴性对照组。结果与结论:PKH26-GL荧光追踪移植细胞,移植后1周部分精原干细胞已向曲细精管基底膜迁移,移植后1个月精原干细胞已从曲细精管管腔迁移至曲细精管基底膜,并分裂增殖,移植后3个月曲细精管管腔内可见大量精子细胞形成。移植后1,2,3个月,各组α6-Integrin,c-kit蛋白表达均呈增加趋势(P<0.01),阴性对照组、实验组SCF蛋白表达有增加趋势(P<0.05);各组α6-Integrin,c-kit,SCF mRNA的表达均有增加趋势(P<0.05)。提示大剂量化疗后,生精上皮内仍存在一定数量的Sertoli细胞,这种精子发生的微环境并未完全破坏,外源性精原干细胞移植后能在受体Sertoli细胞所提供的微环境中增殖和分化。
- 马良宏丁强冯立新李培军陈福宝
- 关键词：迁移增殖分化精原干细胞干细胞
