马耀华
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
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- 溃疡性结肠炎合并脑静脉系统血栓形成的临床分析
- 2023年
- 目的 研究溃疡性结肠炎(ulcerative coliti, UC)合并脑静脉系统血栓形成(cerebral venous thrombosis, CVT)的临床特点,提高对UC合并CVT的认识。方法 回顾性分析在我院诊治的18例UC合并CVT患者的临床资料,并选择同期在我院住院诊治的无CVT并发症的UC患者共54例作为对照组,两组患者之间性别、年龄、病程相匹配,采用t检验或χ^(2)检验进行统计学分析,并采用Logistic回归分析UC合并CVT的危险因素。结果 UC合并CVT患者中,男性发生率高(66.7%),中位病程4.75年(2~7.25年),重度UC(10/18)、全结肠型(12/18)多见,神经系统症状主要为头痛、头晕(10/18),呕吐(3/18)、视物模糊(2/18)、肢体(2/18)及言语障碍(2/18),单纯出现嗜睡症状易被忽视。CVT部位以横窦多见(11/18),也可表现为多部位血栓(6/18)。低蛋白血症、血小板增多是UC合并CVT的危险因素。采用以低分子肝素为主的抗凝治疗后,17例患者好转,1例死于多器官功能衰竭。UC合并CVT的预后要比UC未合并CVT预后差。结论 低蛋白血症、血小板增多是UC合并CVT的危险因素,采用低分子肝素为主的治疗可能预防及治疗UC合并CVT。
- 马耀华王淑君秦进
- 关键词：溃疡性结肠炎脑静脉系统血栓形成低分子肝素
- 1-甲基-4-苯基吡啶离子调控线粒体自噬对线粒体氧化应激损伤的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导线粒体自噬在帕金森病(PD)发病机制中的作用。方法将细胞分为MPP+(0 mmol/L)对照组、MPP+(1 mmol/L)处理组和MPP+(2 mmol/L)处理组,共同转染EGFP-LC3和RFP-MI-TO后加入MPP+处理48 h。Western blot检测细胞自噬水平的变化,甲丹磺酸尸胺(MDC)检测自噬空泡聚集,免疫荧光法检测EGFP-LC3和RFP-MITO亚细胞共定位,流式技术检测线粒体膜电位及活性氧。结果 MPP+1 mmol/L及MPP+2 mmol/L组LAMP2 A、Beclin1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的灰度值与对照组相比均上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,MPP+处理组自噬水平增加,自噬空泡增加,外源性LC3表达上调,EGFP-LC3和RFP-MITO存在亚细胞共定位。MPP+1 mmol/L及MPP+2 mmol/L组线粒体膜电位较对照组降低;MPP+1 mmol/L及MPP+2 mmol/L组线粒体活性氧较对照组增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MPP+通过调控线粒体自噬水平致线粒体氧化应激损伤。
- 马耀华王雪晶荆婧马明明杨期东唐北沙滕军放
- 关键词：帕金森病氧化应激线粒体功能障碍
- α-synuclein(A53T)蛋白调控自噬诱导神经元凋亡被引量：1
- 2013年
- 目的探讨α-synuclein(A53T)突变蛋白诱导神经元凋亡的具体机制。方法将EGFP-N1、EGFP-α-synuclein(WT)及EGFP-α-synuclein(A53T)质粒转染SH-SY5Y细胞,Western blot检测Beclin 1及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平;MDC染色检测细胞自噬空泡的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;MTT法测定细胞相对活力。结果过表达EGFP-α-synuclein(A53T)上调细胞内源性Beclin 1蛋白的水平,差异具有统计学意义(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。过表达EGFP-α-synuclein(A53T)诱导SH-SY5Y细胞自噬空泡聚集增加,免疫荧光检测示LC3呈现胞浆聚集。过表达EGFP-α-synucle-in(A53T)上调SH-SY5Y细胞凋亡率,差异具有统计学意义(P<0.01);抑制了细胞相对活力,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EGFP-α-synuclein(A53T)突变蛋白上调巨自噬水平,诱导神经元凋亡。
- 荆婧王雪晶马耀华祝应俊丁晓岚滕军放
- 关键词：自噬凋亡
- 根皮素对神经酰胺诱导小鼠神经元parthanatos的影响
- 2023年
- 目的:探讨根皮素对神经酰胺诱导小鼠神经元parthanatos的影响。方法:分离培养C57BL/6J胎鼠原代皮层神经元,分为对照组、神经酰胺组、根皮素组和根皮素+神经酰胺组。神经酰胺组和根皮素组分别用终浓度为20μmol/L的神经酰胺和根皮素处理24 h;根皮素+神经酰胺组先用终浓度为20μmol/L的根皮素处理24 h后,再用终浓度为20μmol/L的神经酰胺处理24 h;对照组用等体积的DMSO处理。采用CCK-8检测神经元活力,Hoechst33342/PI双染检测神经元的死亡,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot检测多腺苷二磷酸核糖(PAR)聚合物和DNA损伤标志物γH2AX表达水平,彗星实验检测DNA损伤,细胞免疫荧光法检测细胞凋亡诱导因子(AIF)核转位。结果:神经酰胺处理后,神经元活力降低,神经元死亡率和ROS水平升高;根皮素+神经酰胺处理后,神经元活力升高,神经元死亡率和ROS水平降低(P<0.05);神经酰胺处理后,γH2AX蛋白表达水平升高,神经元拖尾长度和拖尾中的DNA百分比升高;根皮素+神经酰胺处理后,γH2AX蛋白表达水平降低,神经元拖尾长度和拖尾中的DNA百分比降低(P<0.05)。神经酰胺处理后,PAR蛋白表达水平升高,AIF发生核转位;根皮素+神经酰胺处理后,PAR蛋白表达水平降低,AIF核转位受到抑制(P<0.05)。结论:根皮素可能通过抑制氧化应激,进而抑制神经酰胺诱导的神经元发生parthanatos。
- 马耀华邓文静秦进牛瑞娜师云波荆婧范成河
- 关键词：神经酰胺神经元小鼠
- Numb蛋白对α-synuclein蛋白寡泛素化水平的调控
- 2014年
- 目的探索Numb蛋白对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)寡泛素化水平的调控。方法分别将EGFP-N1或EGFP-Numb与HA-α-syn共同转染SH-SY5Y细胞;采用细胞免疫荧光法检测α-syn蛋白和Numb蛋白的亚细胞共定位;使用免疫共沉淀的方法检测Numb蛋白与α-syn蛋白的相互结合;利用Western blot检测Numb蛋白对α-syn蛋白寡泛素水平的调控;在MPP+细胞模型中利用细胞免疫荧光检测Numb对α-syn包涵体形成的影响。结果 Numb与α-syn在细胞质中存在亚细胞共定位;Numb蛋白上调α-syn寡泛素化水平;Numb蛋白通过上调α-syn寡泛素水平促进MPP+诱导α-syn阳性包涵体形成。结论 Numb蛋白上调α-syn蛋白寡泛素水平并促进α-syn包涵体形成。
- 王跃丁雪冰王雪晶张雯雯荆婧马耀华滕军放
- 关键词：Α-SYNUCLEINNUMB包涵体
- rhG-CSF对大鼠缺血缺氧神经元巨自噬水平的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对缺血缺氧神经元巨自噬水平的影响及意义。方法:采取氧糖剥夺法制作细胞缺氧模型,Western blot法检测0、100、200μg/L rhG-CSF干预下细胞巨自噬标志微管相关蛋白轻链3膜型和胞质型比值(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)的变化,单丹磺酰戊二胺(MDC)法荧光观察巨自噬空泡变化,MTT法检测细胞活力。应用改良线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,rhG-CSF干预前及干预7 d后进行改良的神经功能缺损评分评定,Western blot法检测干预7 d后大鼠皮层神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,免疫组化法检测LC3蛋白的表达。结果:随着rhG-CSF给药剂量的增加,细胞缺氧模型LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和巨自噬空泡数量逐渐增加(F=288.686,154.698,P<0.001),细胞活力也相应增强(F=74.456 P<0.001)。动物实验中,干预7 d后,rhG-CSF组大鼠缺血神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(F=573.085,P<0.001)及LC3阳性细胞数(F=88.945,P<0.001)分别较假手术组及模型组上调,大鼠的神经功能缺损评分较干预前明显降低(F组间=20.403,F时间=19.193,F交互=33.415,P<0.001)。结论:局灶性脑缺血后rhG-CSF可能通过上调巨自噬水平参与神经元的保护。
- 方立王雪晶荆婧马耀华邓文静张雯雯滕军放
- 关键词：重组人粒细胞集落刺激因子缺血缺氧SH-SY5Y
- rhG-CSF对缺氧SH-SY5Y细胞及大鼠缺血脑组织中LAMP-2a和HSC-70蛋白表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对缺氧人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞及大鼠缺血脑组织中分子伴侣介导自噬(CMA)的标志性蛋白LAMP-2a及HSC-70表达的影响,探讨rhG-CSF抑制缺血缺氧后神经元损伤的机制。方法:制备SH-SY5Y细胞缺氧模型,分别给予0、100、200μg/L的rhG-CSF孵育48h,Westernblot检测各组细胞LAMP-2a及HSC-70的表达。将54只SD大鼠随机分为3组,每组18只;假手术组仅行颈部手术不栓塞大脑中动脉,模型组及实验组制备大脑中动脉栓塞模型,实验组给予rhG-CSF(50μg·kg-1·d-1)注射5d,假手术组及模型组给予等量生理盐水。Westernblot检测脑缺血周边区组织LAMP-2a及HSC-70的表达。参照改良神经功能缺损评分对3组大鼠进行神经功能评价。结果:随rhG-CSF浓度的增加,缺氧SH-SY5Y细胞HSC-70及LAMP-2a的表达逐渐升高(F=31.574、3.943,P<0.001)。3组大鼠HSC-70及LAMP-2a的表达水平差异有统计学意义(F=503.658、859.985,P<0.001),且实验组及模型组大鼠HSC-70、LAMP-2a的表达水平高于假手术组,实验组高于模型组(P<0.05)。实验组大鼠神经功能改善程度优于模型组(t=6.322,P<0.001)。结论:脑缺血中rhG-CSF可能通过上调CMA发挥神经元保护作用。
- 田婧王雪晶马耀华荆婧邓文静苏楠滕军放
- 关键词：重组人粒细胞集落刺激因子SH-SY5Y细胞
- 过表达GBA诱导SH-SY5Y细胞自噬和降低α-synuclein的表达
- 2014年
- 目的探讨葡萄糖脑苷脂酶(GBA)对SH-SY5Y细胞自噬及α-突触核蛋白(α-synuclein)表达水平的影响。方法将EGFP-N1、EGFP-GBA质粒转染SH-SY5Y细胞,Western blot检测Beclin 1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及α-synuclein蛋白的表达,荧光显微镜观察自噬泡的形成及LC3与GBA在细胞内的共定位。结果与转染EGFP-N1组相比,转染EGFP-GBA组上调Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达水平(P<0.05),而α-synuclein表达水平则下降(P<0.05);与转染EGFP-N1组相比,转染EGFP-GBA组自噬空泡数目明显增加,外源性LC3免疫荧光表达明显增强,且GBA与LC3存在共定位。结论GBA上调自噬水平,降低α-synuclein蛋白的表达。
- 范成河王雪晶楚广磊马耀华荆婧滕军放
- 关键词：葡萄糖脑苷脂酶Α-突触核蛋白自噬
