霍然
- 作品数：44 被引量：55H指数：4
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 生殖细胞及体细胞相关标记蛋白在小鼠胚胎雌雄生殖嵴的表达差异研究
- 2015年
- 目的比较小鼠胚胎雌雄生殖嵴发育过程中的生殖细胞及体细胞相关标记蛋白的表达差异。方法运用免疫荧光技术分别在雌、雄小鼠12.5、13.5、14.5、18.5dpc(days postcoitum)及1dpp(days postpartum)的生殖嵴中标记DDX4(DEAD Asp-Glu-Ala-Asp box polypeptide 4)、OCT4(POU domain,class 5,transcription factor 1)、GATA4(Transcription factor GATA-4)、FOXL2(Forkhead box protein L2)、SOX9(Transcription factor SOX-9)、γ-H2AX(The phosphorylated form ofHistone H2AX)及磷酸化RB1(Retinoblastoma-associated protein)(P-RB1)。观察这些蛋白质在小鼠胚胎的不同时间点雌雄生殖嵴中的表达变化情况。结果 DDX4在早期胚胎各阶段雌、雄生殖嵴的生殖细胞呈现持续的表达;FOXL2和SOX9分别在早期胚胎雌、雄生殖嵴的体细胞持续表达;而其它标记蛋白(OCT4、GATA4、γ-H2AX和P-RB1)在早期胚胎不同阶段却呈现差异表达模式,OCT4在雄性生殖嵴的生殖细胞各个阶段均有表达,而在雌性生殖嵴14.5dpc已不表达;GATA4在雄性生殖嵴的体细胞各个阶段均有表达,但在雌性生殖嵴18.5dpc已不表达;γ-H2AX在雌性生殖嵴18.5dpc已不表达;P-RB1在雄性生殖嵴13.5dpc的生殖细胞开始不表达,而在雌性生殖嵴18.5dpc开始不表达。结论不同细胞组分功能蛋白的特异性表达模式对于早期胚胎生殖嵴的发育和分化起到重要作用。
- 沈聪郑波隋雪松霍然
- 关键词：生殖细胞体细胞免疫荧光
- 应用蛋白质组技术平台对黄体生成素在卵巢周期调控作用机制的研究
- ＜正＞ 黄体生成素在卵巢周期中发挥着重要的作用,在卵泡中期和卵泡晚期,黄体生成素协助FSH促进卵泡的发育,并为排卵前LH峰做准备;随之,由于排卵前LH峰的刺激,颗粒细胞与卵细胞之间的交流被打断,卵细胞减数分裂被启动;最后...
- 马翔刘嘉茵朱叶飞霍然钱云徐珉周作民沙家豪
- 文献传递
- 锌指蛋白ZBED3在小鼠卵细胞中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的:研究锌指蛋白(zinc finger,BED-type containing 3,ZBED3)在小鼠卵母细胞中的表达及分布,探讨ZBED3在小鼠卵细胞成熟及早期胚胎发育过程的功能。方法:运用生物信息学资源分析ZBED3在多组织中的表达情况,运用免疫印迹法和免疫组织化学术,检测ZBED3在小鼠卵细胞中的表达和分布。结果:生物信息学检索显示ZBED3 mRNA在卵细胞及受精卵中特异性表达,免疫印迹法证实ZBED3在小鼠卵母细胞中高表达,同时免疫组织化学显示阳性信号主要集中在卵母细胞胞浆中。结论:ZBED3可能在卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中发挥作用。
- 崔婷张平郭雪江霍然毕晔
- 关键词：小鼠卵母细胞
- 一条人睾丸中氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ的全新不同剪接基因的克隆及特性分析
- 从人睾丸cDNA文库中我们克隆得到了一个新基因,该基因编码了氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ(CPSI)的一种新的不同剪接体。该基因的全长为3 831个碱基,其中编码区长为3 149个碱基,编码的蛋白质含有1 050个氨基酸,该基因...
- 霍然祝辉陆丽尹岚岚徐珉许志洋李建民周作民沙家豪
- 文献传递
- 无标记定量方法在小鼠精子发生相关蛋白质组学研究中的应用
- 2010年
- 目的:利用无标记定量蛋白质组学技术筛选在3周龄及成年小鼠睾丸中差异表达的蛋白质。方法:分别抽提3周龄及成年小鼠睾丸蛋白,酶解后所得肽段经纳升液相色谱分离,并经LTQ Obitrap质谱鉴定,在获得蛋白鉴定信息的同时根据相应肽段离子质谱峰强度对蛋白进行相对定量。结果:在3周龄及成年小鼠睾丸中共鉴定到非冗余蛋白319种,其中30种蛋白在两者之间存在显著的表达差异,这些蛋白主要参与形态发生、收缩、胞吞、受精等细胞事件,与精子变形过程及精子功能相关。结论:无标记定量蛋白质组学技术,具有方法简便、通量大、成本低廉等优点,利用其寻找睾丸发育,精子发生/功能相关蛋白具有广阔的前景。
- 王黎熔王富强郭雪江霍然周作民沙家豪
- 关键词：蛋白质组学
- 电子实验记录在研究生培养中的运用探讨被引量：2
- 2015年
- 电子实验记录是计算机和网络技术不断发展在科研工作中的一个新应用。由于其较传统的纸质实验记录具有更清晰、便于保存和检索、便于师生交流、结果呈现更直观以及结果形式多样化等多项优势,越来越多的实验室已经开始或准备使用电子实验记录。文章就如何正确高效地使用电子实验记录,培养研究生完成合格的电子实验记录,电子实验记录的优势以及使用过程中的一些相关注意事项展开讨论,力争为网络时代研究生的培养和管理提供一些新的思路。
- 王蕾郭雪江林敏黄晓燕霍然祝辉沙家豪周作民
- 关键词：研究生教育教学方法
- 小鼠生发泡期卵母细胞成熟过程中转录沉默机制的探讨被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4～6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团第2位丝氨酸磷酸化的抗体(anti-RNA PolⅡCTD Ser2-P,clone H5)、组蛋白H3K4/H3K9三甲基化的抗体(anti-H3K4me3、anti-H3K9me3)进行免疫荧光染色。观察伴随GV期小鼠卵母细胞染色质构型由非包围核仁(non-surround nucleolus,NSN)型转变为包围核仁(surround nucleolus,SN)型的过程,这两对标记物的表达及分布变化。结果:在NSN型的GV期卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P于核浆中呈特征性斑块状分布,同时H3K4me3在核浆中也显示强阳性信号;但在SN型卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P失去特征性分布,转变为核浆中弥漫性分布,H3K4me3的核浆中阳性信号也消失。结论:RNA聚合酶Ⅱ的活性降低及组蛋白修饰状态的改变在小鼠GV期卵母细胞成熟过程的大规模转录沉默中发挥了重要作用。
- 夏梦刘明兮周涛何辉万茹霍然
- NORPEG基因新的转录本的克隆与表达
- 本文报道了一条在睾丸中克隆的NORPEG基因的新的转录本的表达。方法:在本实验室构建的人睾丸cDNA基因芯片基础上,用成人、胚胎睾丸及精子cDNA探针与芯片杂交,筛选差异表达的克隆,对差异表达的克隆进行测序和生物信息学分...
- 袁娲郑英霍然陆丽黄晓燕尹岚岚李建民周作民沙家豪
- 文献传递
- 4,4’-二甲氧基查耳酮在延缓卵母细胞体内外老化中的应用
- 本发明公开了4,4’‑二甲氧基查耳酮在延缓卵母细胞体内外老化中的应用。4，4’‑二甲氧基查尔酮在制备延缓卵母细胞体外老化进程的试剂中的应用。4，4’‑二甲氧基查尔酮在制备改善生殖衰老的药物中的应用。本发明结果都表明DMC...
- 霍然李明芮刘露黄婕何安澜
- 医学研究生生殖生物学的课程设置及教学模式探讨被引量：3
- 2011年
- 讨论了在医学研究生中开设生殖生物学课程的意义,并介绍了经过摸索和总结获得的教学经验和心得,着重阐述如何合理地进行课程设置以及在优化教学内容、选择教学形式和重视教学考核中的经验和体会。努力创立了良好的课程特色,为医学教育发展作出贡献。
- 祝辉霍然黄晓燕沙家豪周作民
- 关键词：生殖生物学课程设置教学模式医学研究生
