陈三凤
- 作品数:104 被引量:425H指数:11
- 供职机构:中国农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 饮用加银水对尾吊大鼠脂质代谢的影响
- 2005年
- 目的研究饮用加银水对尾吊模拟失重大鼠红细胞膜流动性、血脂和血管内皮细胞的影响。方法30只SD雄性大鼠随机分为地面对照组(GC组)、模拟失重对照组(SC组)和模拟失重饮用0.20mg/L加银水组(SS组),实验期21d。观察大鼠血脂指标、红细胞膜流动性以及脱落循环内皮细胞数量的变化。结果SC组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、HDLC/TC比值以及红细胞膜流动性低于GC组,LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)/HDL-C比值和脱落循环内皮细胞数量高于GC组。SS组和SC组比较,SS组大鼠血清TC、LDL-C和LDLC/HDL-C比值增高,HDL-C/TC比值和红细胞膜流动性降低。结论长期饮用0.20mg/L加银水可以加重尾吊模拟失重大鼠脂质代谢的紊乱。
- 朱德兵黄纪明李志霞洪建武白树民陈三凤
- 关键词:失重模拟细胞膜流动性内皮细胞脂质代谢
- 细菌Ⅱ型分泌途径控制产碱假单胞菌(Pseudomonasalc aligenes)S2中卵磷脂酶的分泌被引量:1
- 2005年
- 从水稻根际分离筛选出1株降解卵磷脂的有机磷降解细菌菌株S2,通过形态指标、生理生化性状、16SrDNA序列、(G+C)含量以及DNA-DNA杂交分析,鉴定为产碱假单胞菌(Pseudomonasalcaligenes).采用双亲接合的方法将带有Tn5转座子的质粒导入产碱假单胞菌S2菌株中进行转座子插入诱变,从5000个卡那霉素抗性的Tn5插入突变株中,筛选到3株丧失解磷能力的突变株(M808,M1329和M1400)和1株解磷能力增强的突变株(M20).对Tn5插入位点的基因进行DNA测序表明,丧失解磷能力突变株中被突变的基因分别是xcpS,xcpX和xcpW,它们分别编码XcpS,XcpX和XcpW蛋白,这些蛋白是细菌Ⅱ型分泌途径中的主要成分.将xcpS,xcpX和xcpW基因分别构建在pLAFR3载体上,通过双亲接合的方式分别导入上述M808,M1329和M1400三个丧失解磷能力突变株中进行功能互补实验,结果表明这3个基因都能使各自相对应的突变株恢复解磷能力.以上结果表明,在产碱假单胞菌中卵磷脂酶的分泌是通过Ⅱ型分泌途径来完成的.解磷能力的丧失可能是由于Tn5插入xcp基因簇中的某一基因破坏了卵磷脂酶向胞外的分泌,造成突变株不能降解有机磷.在解磷能力增强突变株M20中,被突变的基因与铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)PAO1中的chpA基因(参与细菌的颤动)同源性达88%.
- 吕静李繁陈三凤李季伦
- 关键词:PSEUDOMONASALCALIGENES分泌途径
- 用酵母双杂交系统筛选与NifA相互作用的蛋白质被引量:2
- 2005年
- 利用酵母双杂合系统从巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)Sp中筛选与NifA有直接相互作用的蛋白质因子. 首先将nifA基因克隆到pGBD-C2载体上, 构建成诱饵质粒pGBD-nifA, 接着将巴西固氮螺菌的染色体DNA构建在pGAD-C1, pGAD-C2和pGAD-C3质粒载体上, 形成3个质粒文库YSPC1, YSPC2和YSPC3. 然后以pGBD-nifA为诱饵, 对YSPC1, YSPC2和YSPC3这3个文库进行了筛选, 得到11个阳性克隆. DNA序列分析表明, 这11个阳性克隆分为4类, 包含4个1~1.3 kb不同的基因片段. 对这4个基因片段进行同源性比较发现, 其中2个编码的蛋白质含有与信号传递有关的PAS结构域, 另外1个基因片段含有与吸收铁有关的fhuE基因, 另一个是未知蛋白. 将这4个基因片段从原来的pGAD载体转移到pGBD载体, 即互换换载体后, 它们仍然与NifA有相互作用; 对这4个基因片段进行移码突变则不再与NifA有相互作用, 说明了它们与NifA相互作用的特异性.
- 陈三凤管乐涂然孙文改李季伦
- 关键词:相互作用NIFA蛋白质巴西固氮螺菌酵母双杂合系统NIFA质粒文库NIFA
- 一种提高作物抗旱性的复合固氮微生物肥料及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种提高作物抗旱性的复合固氮微生物肥料及其制备方法与应用。该复合固氮微生物肥料包括麸皮、豆饼粉、稻壳粉、钙镁磷肥、氯化钾、保水剂、腐殖酸和复合菌群。本发明利用麸皮、豆饼粉和稻壳粉作为载体吸附固氮类芽孢杆菌发酵...
- 陈三凤李永斌李云龙
- 文献传递
- 固氮类芽孢杆菌1-43及其应用
- 本发明提供了一株具有固氮能力的类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)菌株1-43,其保藏编号为CGMCC No.4965。该菌具有固氮酶结构基因nifH,乙炔还原法测定其固氮酶活为904.49nmolC<Sub...
- 陈三凤王莉瑛陈曦
- 含多拷贝nifA基因的巴西固氮螺菌DraT<Sup>-</Sup>工程菌株
- 本发明提供了一种含多拷贝nifA基因的巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)DraT<Sup>-</Sup>工程菌株,保藏号为:CGMCC No.0876。本发明还提供了一种菌肥,它含有本发明的含...
- 李季伦陈三凤张耀平赵银锁马旅雁王娟
- 文献传递
- 携带Paenibacillus polymyxa WLY78固氮基因簇(nif)的重组大肠杆菌Escherichia coli 78-7转录组分析(英文)
- 2018年
- 【目的】来自Paenibacillus polymyxa WLY78的固氮基因簇(nifBHDKEf NXhesAnifV)可以转化入Escherichia coli中表达并使重组大肠杆菌合成有固氮活性的固氮酶。本文拟通过对重组大肠杆菌E.coli78-7的转录组分析以提高其固氮能力。【方法】对固氮条件(无氧无NH+4)和非固氮条件(空气和100 mmol/L NH_4^+)培养的重组大肠杆菌E.coli 78-7进行转录组分析。【结果】nif基因在两种培养条件下显著表达,说明在重组大肠杆菌中可规避原菌中氧气和NH_4^+对nif基因的负调控。对于固氮过程必需的非nif基因,如参与钼、硫、铁元素转运的mod、cys和feoAB,这些基因在两种培养条件下表达水平有差异。而参与铁硫簇合成的suf和isc基因簇在两条件下表达水平差异巨大。此外,参与氮代谢的基因在固氮条件下显著上调。【结论】重组大肠杆菌中与固氮相关的非nif基因在该菌的固氮过程中具有较大影响,本文对在异源宿主中调高固氮酶活性研究具有重要意义。
- 石皓文陈三凤
- 关键词:生物固氮类芽孢杆菌
- 一种glnA基因缺失的耐铵固氮微生物及其构建方法与应用
- 本发明涉及微生物领域,具体公开了一种glnA基因缺失的耐铵固氮微生物及其构建方法与应用。所述glnA基因缺失的耐铵固氮微生物在无铵和有铵条件下都能进行生物固氮,提高了类芽孢杆菌属微生物在高铵条件下的固氮酶活性,突破了高铵...
- 陈三凤赵喜云王天舒
- 巴西固氮螺菌Yu62 nifA基因克隆、测序及功能分析被引量:4
- 2001年
- 用TD PCR法克隆了巴西固氮螺菌 (Azospirillunbrasilense)Yu6 2的nifA基因。序列分析表明它与巴西固氮螺菌Sp7的nifA序列高度同源 (96 5 % ) ,其编码的产物NifA蛋白与Sp7菌株NifA的氨基酸序列同源性为 97 6 %。该基因可以完全互补巴西固氮螺菌Sp7nifA- 突变株的Nif- 表型。研究了NH4+ 和O2 对Yu6 2nifA基因的表达及NifA活性的影响。结果表明 :nifA基因在Yu6 2菌株中是部分组成型表达的 ,氨和氧不能完全阻遏其表达 ,在 5mmol LNH4 Cl与微氧 (0 5 %O2 )条件下表达最高 ;NifA蛋白在 0 4%~ 0 5 %O2 时活性最高 ,氧分压降低和提高都使NifA活性下降 ,1mmol LNH4 Cl足以抑制NifA的活性。
- 王娟陈三凤马旅雁李季伦
- 关键词:巴西固氮螺菌YU62测序
- 几丁质酶研究历史和发展前景被引量:124
- 1993年
- 几丁质(Chitin)又称甲壳素或甲壳质,是广泛分布于自然界的生物多聚物,自然界每年生成的几丁质约有一百亿吨,在天然聚合物中几丁质的贮量占第二位,仅次于纤维素。几丁质是构成大多数真菌细胞壁的主要成份。
- 陈三凤李季伦
- 关键词:几丁质微生物