阎玉河
- 作品数：37 被引量：221H指数：9
- 供职机构：卫生部更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划河南省杰出青年科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 旋毛虫肌幼虫ES抗原特异性蛋白2个结构基因的分子克隆及其高效表达被引量：25
- 1997年
- 旋毛虫肌幼虫排泄－分泌（ＥＳ）抗原来源于体外培养的旋毛虫肌幼虫的排泄－分泌物。为研制具有ＥＳ抗原功能的旋毛虫基因重组抗原，首先用ＡＧＰＣ法提取旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ并进行变性琼脂糖凝胶电泳分析，发现它缺少真核生物所具有的２８ＳｒＲＮＡ。根据编码４５０００和４９０００蛋白的基因结构，设计并合成２对ＰＣＲ引物，用ＲＴ－ＰＣＲ方法分别扩增出了２个目的基因（ＴＳＰＧ和ＴＳＰＧⅡ）。序列分析发现，ＴＳＰＧ在第４５８到５０５位之间的核苷酸编码框架与结构基因Ｐ４５的不同，此外，还有多处出现与Ｐ４５不同的碱基。在ＴＳＰＧⅡ核苷酸序列中只有１个碱基与Ｐ４９不同。根据可识别的糖基化位点判定，ＴＳＰＧ和ＴＳＰＧⅡ各含有１个Ｎ－型连接的糖基化位点。将构建的３个重组质粒转化大肠杆菌，通过温度诱导培养，分别在大肠杆菌中表达出３７０００、４６０００和３４０００的重组蛋白，三者的表达水平分别为２２％、１０％和８％；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析和ＥＬＩＳＡ检测表明，它们均可被猪旋毛虫病阳性血清和单克隆抗体识别，但特异性有所不同。将ＴＳＰＧⅡ克隆至Ｅ．ｃｏｌｉ－Ｙｅａｓｔ穿梭载体ｐＨＩＬ－Ｓ１上，经内切酶消化和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交鉴定后，?
- 阎玉河童光志卢景良
- 关键词：旋毛虫基因克隆
- 不同免疫制剂对猪旋毛虫病的免疫效果比较
- 1990年
- 七种旋毛虫免疫制剂对猪进行的免疫试验证明,全虫制剂的每克肌肉含虫数减少率可达46.0％:如加入氢氧化铝佐剂,则减少率可达75.5％。
- 阎玉河王家祥李灵霞
- 关键词：免疫制剂旋毛虫病免疫
- 人白血病抑制因子基因cDNA的克隆及分析被引量：2
- 1993年
- 白血病抑制因子(leukemia inhibitoryfactor,LIF)是80年代初发现的一种新的细胞因子。它能不可逆地抑制白血病细胞增殖、并诱导其分化,同时它还能在没有明显毒副作用的情况下在体内或体外直接刺激巨核血小板系统生成,增加外周血血小板数量。
- 涂强王永俊李文谢宝树朱元晓阎玉河余竟源兰兰林万明
- 关键词：白血病基因克隆
- 牛CD14结构基因的PCR扩增及序列分析被引量：2
- 1998年
- 在用牛肺巨噬细胞构建了ｃＤＮＡ基因文库的基础上，参照人和小白鼠ＣＤ１４的基因序列设计一对引物，用ＰＣＲ方法成功地扩增出编码牛ＣＤ１４的特异性ＤＮＡ片段，并进行了序列分析。结果表明，牛ＣＤ１４基因的核苷酸在相同区域内与人ＣＤ１４的同源性为７９％，推导氨基酸序列的同源性为７３％；而与小白鼠的核苷酸和氨基酸的同源性分别为７５％和７１％。无论在核苷酸还是氨基酸水平上，牛ＣＤ１４基因与人ＣＤ１４的同源性都要高于与小白鼠的同源性。
- 阎玉河张改平李青梅李学伍杨艳艳郭军庆邓瑞广王爱萍
- 关键词：CD14结构基因聚合酶链反应
- PCR技术及其在农牧业上的应用
- 1993年
- PCR(聚合酶链反应)是根据DNA碱基互补的特点,在聚合酶作用下使特异性DNA片段迅速扩增的一种方法。系由高温变性、低温退火和中温延伸等三步反应构成一个周期,循环往复,使极少量的DNA在短时间内以指数方式迅速扩增数百万倍。所以,PCR技术实质上是一种体外扩增DNA的新技术。一、PCR技术的特点
- 阎玉河
- 关键词：PCR农业生物工程
- 用ELISA和PCB对猪、牛血清中HBV抗原、抗体及DNA的检测被引量：2
- 1996年
- 用三个厂家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶链反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ＿ｓＡｇ阳性８份，ＨＢ＿ｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢ＿ｓＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ均为阴性，未扩增出特异性ＤＮＡ片段。此结果初步表明，无论家畜血清中有无ＨＢＶ－Ａｇ，均无感染性ＨＢＶ粒子存在，因此没有足够的证据担心家畜会在ＨＢＶ的传播上对人类构成威胁。
- 王川庆阎玉河左新桐熊书海苏莉王相根范庆高宋云海
- 关键词：HBV家畜ELISADNA
- 牛FcγRI、FcγRⅢ和CD14的cDNA序列
- 本发明涉及牛的DNA序列,特别是涉及对牛FcγRI,FcγRⅢ及CD14进行分子克隆和cDNA序列分析。采用健康牛肺巨噬细胞构建牛cDNA文库,用标记磁微粒技术结合PCR方法对构建牛cDNA文库进行筛选,分别克隆到了牛F...
- 阎玉河张改平邓瑞广李培庆杨艳艳李学伍郭军庆李青梅王爱萍
- 文献传递
- 畜禽疫病快速诊断试纸条
- 本发明涉及畜禽疫病诊断器具，特别涉及一种畜禽疫病快速诊断试纸条，含有支撑层，反应试剂载体吸附层，支撑层为不吸水薄片条，反应试剂载体吸附层粘贴在支撑层上，从样品端起依次为纤维层、吸附待测某种畜禽疫病相应的金标抗体Wi纤维层...
- 张改平郭军庆杨艳艳王爱萍阎玉河李学伍邓瑞广李青梅李灵霞阎红良
- 文献传递
- 旋毛虫基因重组抗原快速ELISA诊断试剂盒的研究被引量：8
- 2002年
- 用旋毛虫基因重组抗原 (TSRA)建立了诊断猪旋毛虫病的快速ELISA诊断试剂盒。用TSRA和旋毛虫肌幼虫排泄 -分泌抗原 (ES)分别对 12份人工感染旋毛虫病猪血清进行快速ELISA检测 ,阳性率为 10 0 %。在猪旋毛虫病发病区随机采集 10 3份血清和肉样 ,分别用TSRA和ES作抗原对血清进行快速ELISA检测 ,结果显示 ,它们与肌肉消化法的诊断符合率分别为95 12 %和 96 3%。研究证明 ,用TSRA组装的诊断试剂盒具有良好的灵敏性、特异性和重复性。
- 陈春花李喜仙阎玉河邓瑞广
- 关键词：重组抗原ELISA试剂盒诊断试剂盒
- 旋毛虫ES抗原特异性蛋白两个结构基因的序列分析及重组质粒的构建被引量：16
- 1996年
- 目的：获取旋毛虫ＥＳ抗原的结构基因，对其鉴定和克隆，并研制旋毛虫基因重组抗原。方法：先用反转录ＰＣＲ技术获取目的基因，经序列测定和酶切分析后，再用重组ＤＮＡ技术分别将目的基因与融合表达载体ｐＥＸ３１Ｃ、ｐＥＸ３１Ｂ及表达载体ｐＢＶ２２０连接，评价在大肠杆菌中的表达效果和鉴定表达产物的特异性。结果：获得了编码ＥＳ抗原特异性蛋白成分的两个结构基因（０．７ｋｂ和０．９５ｋｂ），其序列与文献报道的稍有差异。共构建３个重组质粒并在大肠杆菌中表达出相应分子量大小的重组蛋白，均能被猪旋毛虫病阳性血清所识别，但非融合蛋白的特异性强于融合蛋白。在相同条件下，融合蛋白的表达量高于非融合蛋白，而表达蛋白的分子量大小与表达水平呈负相关性。结论：在大肠杆菌中表达的３种重组蛋白是研制旋毛虫基因重组抗原的良好候选抗原蛋白。
- 阎玉河许威光陈辉陈辉李春华张洪权李春华卢景良
- 关键词：旋毛虫基因重组质粒
