郝斐然
- 作品数：9 被引量：82H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重大科学仪器设备开发专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：理学医药卫生生物学更多>>
- 麦冬皂苷D′对大鼠心肌细胞H9c2的细胞毒性被引量：14
- 2017年
- 目的研究麦冬皂苷D′对大鼠心肌细胞H9c2的细胞毒性作用,初步探讨其作用机制,为寻找其临床安全使用剂量提供依据。方法麦冬皂苷D′0.1,1,5,10,20,25和50μmol?L^(-1)作用于H9c2细胞24 h。MTS法检测细胞存活率及其IC_(50);荧光显微镜观察细胞形态变化;高内涵免疫荧光筛选检测细胞核数目变化;流式细胞仪检测其活性氧生成、线粒体膜电位和细胞凋亡率。结果麦冬皂苷D′0.1,1,5,10,20,25和50μmol?L^(-1)作用于H9c2细胞24 h后,细胞存活率分别为108.9%,106.3%,91.9%,61.0%,24.8%,24.7%和24.2%,IC_(50)为9.9μmol·L^(-1);荧光显微镜检测显示细胞皱缩;高内涵免疫荧光检测显示细胞核数目减少(P<0.05)。流式细胞术检测显示,麦冬皂苷D′0.1,1,5和10μmol·L^(-1)显著升高活性氧生成量(P<0.05),降低线粒体膜电位(P<0.05),升高细胞凋亡率(P<0.05)。结论麦冬皂苷D′对H9c2心肌细胞有明显的细胞毒性作用,该作用可能与其激活细胞凋亡通路有关。
- 任思嘉徐焕华李明郝斐然马增春汤响林梁乾德谭洪玲肖成荣王宇光高月
- 关键词：H9C2细胞毒性作用
- 金属有机框架材料的研究进展被引量：50
- 2014年
- 金属有机框架(metal-organic frameworks,MOFs)材料是一类由有机配体与金属中心经过自组装形成的具有可调节孔径的材料。与传统无机多孔材料相比,MOFs材料具有更大的比表面积,更高的孔隙率,结构及功能更加多样,因而已经被广泛应用于气体吸附与分离、传感器、药物缓释、催化反应等领域中。新兴材料的出现极大地促进了各个学科间的相互发展,本文综述了近年来MOFs材料的研究发展,包括MOFs材料自身的特点、国内外发展现状、应用领域以及复合MOFs材料的研究热点,并对今后的发展进行了展望。
- 翟睿焦丰龙林虹君郝斐然李佳斌颜辉李楠楠王欢欢金祖耀张养军钱小红
- 关键词：配位聚合物多孔材料
- 一种简单的毛细管色谱柱电加热装置的制作方法及其在液相色谱-质谱联用系统中的应用被引量：1
- 2015年
- 为了实现蛋白质组的深度覆盖,特别是低丰度蛋白质的定性鉴定和定量分析,目前常用的方法是采用更长或装填更小粒径填料的毛细管色谱柱,但因此带来的问题是色谱柱反向柱压显著升高。针对以上问题发展了一种简单的毛细管色谱柱电加热装置制作方法,并将该装置安装于液相色谱-质谱联用系统,分别以牛血清白蛋白(BSA)酶切肽段混合物和酵母蛋白(yeast)酶切肽段混合物为样品,从柱压和柱效两方面对该装置的性能进行了评价。实验结果表明,所制作的毛细管柱电加热装置安装在装填粒径为3μm反相色谱填料的毛细管柱上,在最佳电流(100 mA)下对BSA及yeast酶切肽段混合物进行分离时的柱压比不加电流时的柱压降低至少50%,柱效略有升高。这说明所制作的毛细管色谱柱电加热装置能显著降低柱压,为在较低的柱压条件下选择更小粒径色谱颗粒填料的毛细管色谱柱提供了一种有效的方法。
- 金祖耀吕雅瑶周珊珊郝斐然付斌应万涛钱小红张养军
- 关键词：蛋白质组学柱效
- 金属元素标记结合毛细管液相色谱-质谱用于蛋白质N-末端肽的鉴定及相对定量新方法研究
- ＜正＞N-末端区域是蛋白质及多肽的重要结构和功能部位,包含许多有价值的生物学信息,对末端肽的鉴定对蛋白质的生物学功能研究具有重要意义。例如,N-末端氨基酸类型可影响蛋白质的半衰期（N端规则,the N-end rule）...
- 张养军颜辉郝斐然李佳斌李楠楠田芳李贤玉钱小红
- 关键词：化学修饰蛋白质组学
- 文献传递
- 一种多通道匀浆装填毛细管色谱柱的新装置及应用被引量：1
- 2015年
- 针对目前毛细管色谱柱装柱效率低、不同批次装填的毛细管色谱柱之间性能差异大的问题,我们发展了一种多通道匀浆装填毛细管色谱柱的新装置。该装置以液相色谱泵提供压力、采用磁力搅拌保持匀浆液均匀分散,一次可装填多达6根毛细管色谱柱。以牛血清白蛋白(BSA)的胰蛋白酶酶切肽段混合物为样本,选择峰容量、蛋白覆盖率、3个特定离子的保留时间以及毛细管色谱柱柱压为指标,在毛细管液相色谱-质谱联用系统上对装填的反相毛细管色谱柱的性能进行了评价。分别考察了一次装填的6根毛细管色谱柱、两次装填的12根毛细管色谱柱以及一次装填1根与一次装填6根毛细管色谱柱的性能及稳定性。实验结果表明:同一批次装填的6根毛细管色谱柱的性能相近;不同批次装填的12根毛细管色谱柱的峰容量和覆盖率没有明显的区别,但保留时间和毛细管色谱柱柱压的稳定性较差;一次装填1根和一次装填6根毛细管色谱柱柱性能的稳定性与两次分别装填6根毛细管色谱柱的稳定性相近,即采用本装置可显著提高毛细管色谱柱的装填效率且每次装填毛细管色谱柱的数量不会对柱性能产生影响。
- 吕雅瑶郝斐然王欢欢付斌钱小红张养军
- 关键词：毛细管色谱柱多通道
- 金属标记结合高效液相色谱-选择离子监测质谱的蛋白质绝对定量新方法被引量：1
- 2014年
- 建立了金属标记结合高效液相色谱-选择性离子监测质谱（SIM）的蛋白质绝对定量新方法。实验考察了金属标记效率、金属标记的稳定性、标记后肽段的色谱保留和质谱行为、新定量方法的线性范围和准确度。实验结果表明金属标记具有标记效率高，稳定性好，色谱保留行为一致等优点。另外，金属标记-选择离子监测质谱绝对定量方法灵敏度高，其定量限低至1 fmol，线性范围为1-500 fmol，线性范围内 R2值大于0.99，具有良好的线性关系；经过测量，标准肽段的回收率为117.01％，说明该方法具有较高的准确度。将该方法应用于腾冲嗜热菌中烯醇酶蛋白的定量分析，相对标准偏差为5.47％，表明该方法的精密度高。以上结果表明该方法可以用于生物样本中的蛋白质的绝对定量分析，为比较简单的生物样本中蛋白质的绝对定量方法提供了一种新的选择。
- 李佳斌周廉淇颜辉李楠楠郝斐然田芳张养军
- 关键词：高效液相色谱蛋白质
- 基于电迁移的蛋白质制备技术和方法新进展被引量：1
- 2015年
- 基于电迁移的蛋白质制备技术是对一类分离和制备技术的统称,其特征是在电场的作用下对目标物质进行分离和纯化制备,这种技术在生物大分子和蛋白质组的研究中应用广泛。基于电迁移的制备技术主要包括制备型电泳、制备型电色谱、制备型等电聚焦和自由流电泳等。本文对每种制备型电迁移装置的设计、特点和基于该种装置的各种应用方法的优缺点进行了详细阐述,并列举了一些实例。另外,微量级制备型电泳因分离度高、回收率高以及高效快速的优点,在微量级生物样本分析中发挥着日益重要的作用,近年来备受关注,本文也着重关注了这方面的进展,并对基于电迁移的制备技术做了展望。
- 郝斐然付斌张养军钱小红
- 关键词：蛋白质
- 质谱电喷雾电离源研究新进展被引量：10
- 2013年
- 自1984年约翰芬恩(John Fenn)发明一种软电离离子源,即电喷雾电离源(ESI)以来,促进了质谱技术在大分子分析领域,特别是生物大分子领域的广泛使用。ESI源的低取样效率由ESI源的离子化效率和传输效率的构成,制约着ESI源质谱灵敏度的提高,因此研究者们一直努力改进ESI源的性能,以提高取样效率、改善ESI源质谱灵敏度。本研究介绍了ESI源的原理,并评述了近年来ESI源研究的新进展和应用。
- 李佳斌郝斐然田芳张养军
- 开管毛细管色谱柱的制备及其在蛋白质组学研究中的应用进展被引量：4
- 2016年
- 近年来随着生命科学等领域的深入发展,人们对微量样本分离分析的需求越来越高,液相色谱系统的微量化受到了更多的关注。由于开管毛细管色谱柱具有较低的反向压力,可通过采用更长的色谱柱提高柱效,从而实现对复杂生物样本的高效分离,因而成为液相色谱柱新的发展方向。本文对开管毛细管色谱柱的制备方法及应用进展进行了综述。
- 周珊珊翟睿焦丰龙郝斐然吕雅瑶钱小红张养军
- 关键词：毛细管液相色谱蛋白质组学
