郑堰心
- 作品数：8 被引量：68H指数：5
- 供职机构：南方医科大学中医药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省中医药局建设中医药强省科研课题广东省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 哈蟆油对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分泌的影响被引量：5
- 2013年
- 目的建立卵巢颗粒细胞的原代培养体系,探讨哈蟆油含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖及分泌的影响,并分析和选择哈蟆油含药血清对颗粒细胞的最佳作用浓度,为进一步体外实验奠定基础。方法采用SD雌性大鼠,皮下注射孕马血清促性腺激素,剖取双侧卵巢,采用机械分离方法释放卵巢颗粒细胞,分离培养。将体积分数为15%,30%,60%,120%,240%(大鼠灌胃浓度4.5 g/kg)的含药血清5个终浓度分别加入培养体系中,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞增殖情况及药物的最大无毒浓度(TD0),观察其对卵巢颗粒细胞生长的影响。采用电化学发光法测定培养基中雌二醇(E2)的含量,分析哈蟆油含药血清对颗粒细胞雌激素分泌的影响。运用流式细胞术检测活细胞及凋亡细胞所占的比率。结果含药血清作用颗粒细胞后,呈现出不同程度的促增殖作用,含药血清最佳的作用浓度体积分数为15%～30%(大鼠灌胃哈蟆油剂量为4.5 g/kg)之间;哈蟆油含药血清可促进卵巢颗粒细胞分泌雌二醇,雌二醇含量分析显示雌二醇的分泌与细胞增殖情况存在正相关关系(Personr=0.406,P=0.01);流式细胞结果显示与空白含药血清比较,哈蟆油含药血清均能显著增加活细胞数目,抑制细胞无血清饥饿引发的凋亡(P值均小于0.01),起到细胞保护作用,其中体积分数为25%的含药血清作用效果更佳(P<0.01)。结论哈蟆油含药血清对离体培养的卵巢颗粒细胞增殖具有显著的促进作用,并存在一个最佳作用浓度范围,其调节机体性激素生成作用与促进卵巢颗粒细胞生长效应相关。
- 彭娟邓虹珠马丹丹魏蕾初郑堰心梁磊
- 关键词：哈蟆油卵巢颗粒细胞含药血清MTT法药物毒性
- 苦豆子总碱及8种生物碱单体对消化道癌细胞抗癌活性比较被引量：14
- 2014年
- 目的比较苦豆子总碱及8种生物碱单体,筛选出具有抗癌活性的药物。方法采用MTT方法测定苦豆子总碱及8种生物碱单体对肝癌、胃癌、结肠癌细胞株的增殖活性影响;Hochest33342-PI双染观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡。结果苦豆子总碱及8种生物碱对消化道癌细胞具有不同程度的增殖抑制作用,其作用呈时间-剂量依赖性,以苦豆碱的抑制作用最强。苦豆碱促进了细胞凋亡,并使细胞阻滞在G2期。结论苦豆子总碱及8种生物碱单体都具有一定的抗癌活性,以苦豆碱的活性最强,为进一步开发抗癌新药提供实验依据。
- 张丽郑堰心邓虹珠彭娟赵文昌
- 关键词：苦豆子总碱生物碱抗癌苦豆碱
- 氧化苦参碱对人结肠癌SW620细胞p16/cyclinD1/CDK4通路的影响被引量：18
- 2014年
- 目的观察氧化苦参碱诱导人结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制。方法采用MTT法检测氧化苦参碱对SW620细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测氧化苦参碱对SW620细胞凋亡的影响;流式细胞仪检测氧化苦参碱对SW620细胞周期的影响;实时定量PCR法检测细胞内p16、cyclinD1及CDK4基因表达水平;免疫印迹法检测细胞内p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达水平。结果氧化苦参碱抑制SW620细胞增殖作用呈剂量依赖性,其作用24 h的IC50为4.02μmol/L;与对照组相比,苦参碱处理后的SW620细胞G1期比例明显增高,G2期细胞比例下降(P<0.05);氧化苦参碱作用后SW620细胞p16基因和蛋白水平升高(P<0.05),cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论氧化苦参碱在体外能抑制SW620细胞的增殖,诱导细胞在G1期阻滞,其诱导作用与其调控p16、cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达有关。
- 张绪慧郑堰心张丽邓虹珠梁磊
- 关键词：氧化苦参碱SW620细胞P16CYCLIND1CDK4
- HPLC法测定苦豆子总碱结肠定位释放片中生物碱被引量：2
- 2013年
- 目的建立苦豆子总碱结肠定位释放片中生物碱的测定方法。方法采用HPLC法,乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾(三乙胺调pH值大于6.45),梯度洗脱,柱温35℃,检测波长205 nm,体积流量1.0 mL/min。结果野靛碱、苦豆碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、槐果碱、苦参碱、莱曼碱8种生物碱分离良好,线性范围分别为0.044 8～0.896 0μg、0.113 0～2.260 0μg、1.536 6～30.732 0μg、0.322 2～6.444 0μg、0.108 4～2.168 0μg、0.404 8～8.096 0μg、0.033 2～0.664 0μg、0.036 2～0.724 0μg,加样回收率大于96%,供试品溶液在24 h内稳定性良好,8种生物碱总量的转移率大于90%。结论该方法简便,检出率高,可以作为苦豆子总碱结肠定位释放片的测定方法。
- 刘振龙张丽魏蕾初郑堰心邓虹珠
- 关键词：苦豆子总碱野靛碱苦豆碱槐定碱氧化槐果碱槐果碱
- 苦豆碱抗结肠癌细胞株SW620作用机制的实验研究
- 结直肠癌（CRC）是世界范围内常见的恶性肿瘤之一。居世界恶性肿瘤发病和致死的第三、四位,发病率约为7/100000,每年大约有5000新发病例和3200死亡病例。因此。CRC是每年肿瘤发病率和死亡率的主要原因。目前,手术...
- 郑堰心
- 关键词：苦豆碱结肠癌细胞周期阻滞AKT
- 文献传递
- HPLC同时测定苦豆子总碱中8种生物碱含量被引量：17
- 2013年
- 目的:建立苦豆子总碱中生物碱的含量测定方法。方法:采用HPLC,乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(三乙胺调pH>6.45),梯度洗脱,柱温35℃,检测波长205 nm,流速1.0 mL·min-1。结果:8种生物碱分离良好,8种生物碱含量>50%。结论:该方法简便,可以作为苦豆子总碱的含量测定方法,比原标准中的滴定法测定总碱含量更方便、精确。
- 刘振龙张丽魏蕾初郑堰心邓虹珠
- 关键词：苦豆子总碱野靛碱苦豆碱槐定碱氧化槐果碱槐果碱
- 槐定碱、苦参碱和苦豆碱对LPS诱发结肠上皮细胞炎症模型中细胞因子IL-6和TNF-α水平的影响被引量：15
- 2014年
- 目的:构建结肠上皮细胞炎症模型,探讨槐定碱、苦参碱和苦豆碱对细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:将细胞接种12孔板中,每孔接种肠上皮细胞株IEC-6 2×105个细胞。细菌脂多糖(LPS,1mg·L-1)干预生长良好的IEC-6细胞12 h,建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测3种生物碱不同浓度对炎症细胞增殖的影响;ELISA法检测给药后细胞上清中IL-6,TNF-α的变化;免疫印迹法检测细胞内IL-6及TNF-α蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组细胞上清中IL-6,TNF-α水平显著升高,LPS(1 mg·L-1)干预12 h后,IL-6,TNF-α含量分别为(1 899.68±45.80),(148.67±5.93)ng·L-1。苦豆碱、槐定碱和苦参碱均可有效减弱LPS诱导的结肠上皮细胞损伤。当生物碱浓度为100μmol·L-1时,槐定碱、苦参碱和苦豆碱均可提高LPS损伤细胞的活性,细胞存活率分别从80.47%提高为91.96%,92.40%,97.23%。此外,这3种生物碱可降低IL-6和TNF-α的含量及其在细胞内的表达。结论:槐定碱、苦参碱和苦豆碱3种生物碱均可通过降低IL-6和TNF-α活性发挥抗炎作用。其中,苦豆碱的抗炎作用最佳。
- 郑堰心张丽邓虹珠梁磊
- 关键词：槐定碱苦参碱苦豆碱结肠上皮细胞
- 哈蟆油对自然衰老雌性大鼠抗衰老能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:研究哈蟆油对自然衰老雌性大鼠抗衰老能力的影响。方法:SD雌性大鼠随机分组,老年对照组和青年对照组灌胃空白植物油,各给药组大鼠给予18g/kg、9 g/kg哈蟆油,连续给药6周,6周末各组大鼠腹主动脉采血分离血清,并取脑组织冰浴匀浆,检测血清、组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)的含量,以评价哈蟆油对自然衰老雌性大鼠抗氧化能力影响。结果:与老年对照组相比,哈蟆油高、低剂量组血清、脑匀浆SOD、GSH-Px活力显著升高,MDA、H2O2含量显著降低。结论:哈蟆油对自然衰老雌性大鼠具有提高抗氧化能力的作用。
- 马丹丹梁磊彭娟郑堰心刁建新邓虹珠
- 关键词：哈蟆油抗氧化
