赵莉
- 作品数：64 被引量：84H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 钩端螺旋体毒力相关因子分子生物学研究进展被引量：3
- 2003年
- 赵莉蒋秀高徐建国
- 关键词：钩端螺旋体毒力因子分子生物学鞭毛蛋白外膜蛋白钩端螺旋体病
- HPV 16型E7E6融合蛋白基因、表达载体、方法、细胞和用途
- 本发明提供一种编码HPV 16型E7E6融合蛋白的基因、表达载体、方法、细胞和用途。本发明利用重组腺病毒，将经修饰失去转化活性的E6、E7蛋白基因融合，并根据融合蛋白的氨基酸序列进行哺乳细胞密码子优化改造，使之在哺乳细胞...
- 田厚文任皎赵莉高见冯靖庞正吴小兵阮力
- 文献传递
- HPV6型L2N120E7E6融合蛋白基因、表达载体、方法、菌株和用途
- 本发明提供一种编码HPV 6型L2N120E7E6融合蛋白的基因、表达载体、方法、菌株和用途。本发明利用原核表达载体，将人乳头瘤病毒(HPV)6型L2N端120个氨基酸、E7蛋白、E6蛋白融合，并根据融合蛋白的氨基酸序列...
- 田厚文赵莉任皎庞正冯靖张忠献阮力谭文杰
- 密码子优化的HPV16 L2E7基因在大肠杆菌中高效表达被引量：4
- 2007年
- 目的提高HPV16L2E7融合基因在大肠杆菌中的表达水平,为中试研究提供高表达量的疫苗候选株。方法根据大肠杆菌偏爱密码子,利用Synthetic Gene Designer软件对L2E7全基因进行密码子优化,将分段合成的基因分部插入到pET9a中,经酶切和测序鉴定无误后转化BL21(DE3+)中,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。表达的融合蛋白进行SDS-PAGE胶和Western blot鉴定。同时还进行梯度实验分别对诱导的温度、时间和IPTG诱导时菌体浓度进行优化,并对蛋白的纯化方案进行摸索。结果优化后的pET9aSL2E7AB在大肠杆菌中得到高效表达,诱导条件优化后的目的蛋白占全菌60%左右。结论成功得到了具有较高表达水平的疫苗候选株。
- 高见赵莉任皎张卉阮力田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒密码子优化大肠杆菌
- 表达中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白的重组痘苗病毒的构建及免疫效果初步评价被引量：1
- 2015年
- 目的:以痘苗病毒天坛株为载体,构建表达中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-Co V)S蛋白的重组病毒疫苗,并进行免疫效果评价。方法:通过PCR扩增获得去除跨膜区的S蛋白基因片段SQ,并构建重组痘苗病毒载体质粒p JSC11Lac Z7.5SQ,将重组质粒与痘苗病毒同源重组并单斑纯化获得重组病毒毒株RVVMERS-SQ,重组病毒免疫小鼠后用酶联免疫吸附实验(ELISA)和假病毒微量中和实验检测其诱发的S蛋白体液免疫反应水平。结果:构建了表达MERS-Co V去跨膜区S蛋白的重组病毒RVVMERS-SQ,其免疫小鼠后诱发了强的S蛋白体液免疫反应,血清Ig G抗体滴度为1∶3200,中和抗体滴度达到1∶1000。结论:重组痘苗病毒RVVMERS-SQ可在BALB/c小鼠体内诱发强的免疫反应,为MERS-Co V疫苗的研发提供了实验基础。
- 王平兴任皎赵莉邓瑶阳静李善琴阮力谭文杰田厚文
- 关键词：病毒载体
- 猴痘病毒感染血清抗体ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2018年
- 目的建立猴痘病毒感染血清IgG抗体检测方法。方法采用合成的猴痘病毒B21R蛋白上的2条混合多肽作为包被抗原,建立猴痘病毒感染人血清IgG抗体间接ELISA检测方法。选取正常成人血清、无关病毒感染血清和猴痘病毒感染者血清标本对多肽抗原特异性进行评价,并优化反应参数。结果猴痘病毒B21R蛋白上的二肽混合抗原与正常血清和无关病毒感染血清均无明显交叉反应,具有较好的抗原特异性。经优化后,混合二肽抗原的最佳包被浓度均为50ng/孔,二抗稀释度为1∶20000。在此条件下塞拉利昂猴痘患者血清在12d和55d的猴痘病毒IgG抗体滴度均为1∶6400。结论初步建立了猴痘病毒感染血清IgG抗体间接ELISA检测方法,为我国应对可能出现的猴痘输入病例提供技术储备。
- 任皎叶飞赵莉管茜茜赵颖宋敬东田厚文谭文杰
- 关键词：猴痘病毒IGG抗体
- 非复制型痘苗病毒NTV修饰株NTV-ΔF1L-C7L的构建及免疫效果评价
- 2024年
- 目的对我国非复制型痘苗病毒NTV进行基因改造,以提高其免疫原性。方法通过基于CRISPR-Cas9技术的痘苗病毒同源重组方法,在痘苗病毒F1L基因缺失的同时回插C7L基因,构建NTV修饰株NTV-ΔF1L-C7L。然后将该重组病毒以10^(7) PFU免疫BALB/c小鼠,采用ELISA和ELISpot方法分别检测修饰株NTV-ΔF1L-C7L诱导产生的体液免疫和细胞免疫水平,并采用噬斑减少中和实验测定中和抗体水平。结果经PCR和western blot鉴定证明构建的NTV修饰株NTV-ΔF1L-C7L的F1L基因缺失,同时C7L基因回插在该区域,且C7L基因能正常表达,说明重组病毒构建正确。NTV-ΔF1L-C7L免疫小鼠后,ELISA结果表明重组病毒NTV-ΔF1L-C7L诱导产生的IgG抗体水平高于NTV;ELISpot结果亦能够表明该重组病毒能够诱导产生水平更高的IFN-γ;噬斑减少中和实验结果表明,该重组病毒比NTV能够诱导产生水平更高的中和抗体。结论正确构建了NTV基因修饰株NTV-ΔF1L-C7L,相比于NTV,其能诱导更强的体液免疫和细胞免疫,为我国天花或猴痘疫苗的换代产品研发提供参考数据。
- 任皎袁航赵莉豆亚美刘士元孟昕田厚文王文玲谭文杰
- 关键词：痘苗病毒重组病毒免疫原性
- 4型腺病毒E1区核苷酸全序列测定及其因结构与功能分析
- 腺病毒E1区位于基因组左末端4.2-11.2m.u.,是腺病毒的必需区,有着复杂的生物学功能.4型腺病毒(Ad4)在基因工程疫苗载体和基因治疗载体的开发上有着良好的应用前景,缺失掉一部分E1区,可使病毒成非复制型,有着更...
- 赵莉
- 关键词：腺病毒核苷酸基因结构功能分析
- HPV融合蛋白、基因、载体、菌株、制备方法及用途
- 本发明涉及一种在大肠杆菌中高效表达的人乳头瘤病毒16型L2E7重组蛋白的密码子优化基因，将其插入原核表达载体pET9a，优化基因获得高效表达，表达水平占全菌的50％，表达蛋白经纯化后免疫小鼠，实验结果表明该蛋白与未经优化...
- 田厚文高见赵莉任皎张卉阮力
- 文献传递
- 基于Avicel-结晶紫染色空斑的中东呼吸综合征冠状病毒感染滴定与中和抗体检测方法被引量：3
- 2017年
- 目的针对中东呼吸综合征冠状病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus, MERS-CoV），建立安全、操作简易的空斑试验检测方法。方法将MERS-CoV（EMC/2012）感染Vero或Huh7.5细胞，通过研究MERS-CoV感染后镜下细胞病变与染色后蚀斑，比较染毒时间（2 d和3 d）以及细胞培养覆盖物[琼脂、微晶纤维素-羧甲基纤维素钠复合物（Avicel）]对空斑试验的影响，确定MERS-CoV空斑试验适用的细胞类型、染毒时间以及细胞培养覆盖物，并将该方法用于MERS-CoV中和抗体的检测。结果MERS-CoV感染Vero细胞后能形成清晰的病毒空斑；染毒后3 d后能稳定清晰地形成MERS-CoV特异性空斑；微晶纤维素-羧甲基纤维素钠复合物覆盖细胞所产生的病毒空斑较琼脂覆盖物更为清晰，操作简易，更易于在BSL-3实验室进行操作；该方法可用于MERS-CoV中和抗体的检测。结论建立了基于Avicel-结晶紫染色技术的适用于BSL-3实验室操作的MERS-CoV空斑试验方法，为MERS-CoV的滴定、中和抗体检测等提供了实验资料。
- 王文玲黄保英王慧娟赵莉陆柔剑朱娜邓瑶谭文杰
- 关键词：VERO细胞
