赵智贤
- 作品数：9 被引量：29H指数：3
- 供职机构：生物芯片北京国家工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PCR-荧光探针法检测临床痰标本结核分枝杆菌的可靠性研究被引量：13
- 2012年
- 目的评价PCR-荧光探针法快速检测Mtb和非结核分枝杆菌(NTM)的临床应用价值。方法应用分枝杆菌核酸检测试剂对1015例痰标本和56株临床分离株进行检测,与Mtb核酸扩增(PCR)荧光(目前临床上认可惟一同类产品)检测结果进行比较。采用SPSS 11.5统计软件进行数据统计处理,采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果PCR-荧光探针法检测痰标本分枝杆菌灵敏度50.3%(373/741),特异度98.9%(271/274);菌阳肺结核标本检测灵敏度97.0%(257/265),菌阴肺结核标本检测灵敏度24.4%(116/476);1015份痰标本中检测出11例非结核分枝杆菌(NTM)核酸阳性标本(占1.1%),经16SrDNA测序确认,准确率100.0%。随机数字量表法抽取138例标本重复进行第2次检测,符合率100.0%。对56株临床分离株(1株Mtb临床分离株,55株NTM临床分离株)检测,准确率100.0%。对临床需要的226份标本同时与达安公司试剂盒检测结果比较,总体符合率95.1%(215/226),经统计学分析,两者之间差异无统计学意义(χ2=2.98,P=0.226)。结论PCR-荧光探针法可快速检测和区分痰标本Mtb与NTM,具有临床推广应用价值。
- 梁建琴高华方李洪敏赵智贤张广宇王金河王甦民刘佳文
- 关键词：分枝杆菌属聚合酶链反应荧光染料
- 生物芯片在聋病分子检测中的应用
- 2008年
- 在20世纪科技史上有两件事影响深远：一是微电子芯片，它是计算机和许多家电的“心脏”，它改变了我们的经济和文化生活，并已进入每一个家庭；另一件事就是生物芯片，它将改变生命科学的研究方式，革新医学诊断和治疗，极大地提高人口素质和健康水平。这是美国《财富》杂志对生物芯片的评价。什么是生物芯片，它为何一诞生就被赋予如此高的评价？它是如何制作的？它又是如何走进千家万户，走近聋病患者的身边？
- 赵智贤
- 关键词：生物芯片分子检测聋病电子芯片文化生活生命科学
- 蛋白芯片技术在自身抗体检测中的应用被引量：10
- 2006年
- 目的建立应用蛋白芯片技术检测抗核抗体谱中11种自身抗体的方法,并对蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性和特异性进行评价。方法通过蛋白芯片技术与间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)自身抗体检测试剂盒进行比对,验证抗核抗体谱检测蛋白芯片(抗SSA-52抗体、抗SSA-60抗体、抗SSB抗体、抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗dsDNA抗体、抗rRNP抗体、抗着丝点抗体和抗核抗体)在临床应用中的敏感性和特异性。除抗Jo-1抗体阳性样品较罕见,仅检测阳性样品32份,其他10种自身抗体,每种选择各阳性样本70份,阴性样本294份;并对检测结果进行统计学分析。结果除抗SSA52抗体和抗SSB抗体的检测敏感度分别为95·7%和98·6%外,其他9种自身抗体的检测敏感度均为100%;除抗SSB抗体、抗RNP-68抗体、抗Scl-70抗体、抗dsDNA抗体、抗CENP-B抗体、抗核抗原提取物抗体(ANA)的检测特异度分别为98·0%、98·0%、99·7%、99·7%、99·7%、98·3%外,其他5种自身抗体的检测特异度均为100%。结论蛋白芯片技术检测11种抗核抗体谱自身抗体的检测敏感度(均>95·0%)和特异度(均>98·0%)均较高,且与IIF和ELISA法有较高的符合率,能满足临床检测自身抗体谱的要求。此外,蛋白芯片技术检测自身抗体时具有高通量、简单快速、敏感度好和特异度强等优点,值得临床推广应用。
- 李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军高扬杨卫平于孟学朱立平程京
- 关键词：自身抗体抗体抗核蛋白芯片自身免疫性疾病
- 多种诊断技术在全身播散性结核病诊治中的联合应用被引量：5
- 2009年
- 目的探讨结核特异的γ干扰素释放分析T-SPOT.TB、CT联合正电子发射断层显像(PET/CT)和基因芯片分析在诊断播散性结核病中的应用,探讨播散性结核病的诊治要点。方法分析北京协和医院感染科收治的1例慢性全身播散性结核病患者的临床诊治情况,以及其T-SPOT.TB、PET/CT和基因芯片分析的结果。结果患者临床符合慢性结核病表现,外周血T-SPOT.TB检测显示结核特异性抗原即6kD早期分泌靶向抗原和10kD培养滤过蛋白肽段库刺激后释放γ干扰素的T细胞分别为:3908和3400斑点形成细胞(SFCs)/106外周血单个核细胞(PBMCs)。全身PET/CT检查显示全身多发放射性摄取增高病变,累及双肺、淋巴结和骨骼,行淋巴结、肺部、右髂后上嵴活检,病理显示为肉芽肿病变。组织培养为分枝杆菌,基因芯片分析确定为结核分枝杆菌,对利福平和异烟肼敏感。抗结核治疗后患者症状缓解,体温正常,治疗10周后T-SPOT.TB检测显示6kD早期分泌靶向抗原和10kD培养滤过蛋白肽段库刺激后释放γ干扰素的T细胞分别为:1528SFCs/106PBMCs、1460SFCs/106PBMCs,较治疗前显著下降。结论播散性结核病的及时诊断有赖于对该病的充分了解和重视。T-SPOT.TB、PET/CT和基因芯片技术的合理应用有助于播散性结核病的诊治。
- 张峣刘晓清张丽帆朱朝晖赵智贤
- 关键词：T-SPOT.TB正电子发射断层显像基因芯片分析
- 间接酶联免疫法测定抗Jo-1抗体及其临床应用
- 2009年
- 目的利用基因工程表达的组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1蛋白,建立ELISA法,初步用于检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)中的抗Jo-1抗体。方法用表达蛋白建立间接ELISA,摸索反应时间、抗原包被浓度、样本稀释浓度及抗抗体工作浓度等工作条件,进一步检测方法的重复性及稳定性。用建立的方法,检测40例健康体检者、30例系统性红斑狼疮(SLE)、30例类风湿关节炎(RA)、20例干燥综合征(SS)、90例多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者血清中抗Jo-1抗体。结果成功建立间接ELISA法,并确立了一系列反应条件。临床检测结果显示,PM/DM患者抗Jo-1抗体的阳性率为25.6%,而非PM/DM患者均为阴性。PM/DM组Jo-1抗体阳性率与疾病对照组及健康对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论本研究成功应用基因工程表达的Jo-1蛋白建立了间接ELISA法,检测抗Jo-1抗体,与国外报道的结果基本相当,与常用免疫印迹法对比检测的结果一致。
- 李珊珊李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军杨卫平
- 关键词：自身抗原酶联免疫吸附法
- 蛋白芯片技术在自身抗体检测中的应用
- ＜正＞自身免疫性疾病（autoimmune disease,AID）泛指机体针对自身组织或细胞产生病理性免疫应答反应,由自身免疫参与发病机制, 导致组织损伤或功能障碍的一大类疾病。近年来AID发病率明显上升,其总体发病率...
- 李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军高扬杨卫平于孟学朱立平程京
- 文献传递
- 组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原的原核表达及初步临床应用被引量：1
- 2008年
- 目的通过克隆人组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1基因，构建重组表达质粒，获得具有免疫活性的纯化重组蛋白，建立间接ELISA法，并探讨其在检测多发性肌炎／皮肌炎（PM／DM）中的抗Jo-1抗体的价值。方法构建重组表达载体，在大肠杆菌DH5仪和B121（DE3）中表达；融合蛋白经Ni-NTA树脂柱进行亲和层析纯化，并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和免疫印迹（WB）进行免疫活性鉴定；应用表达蛋白建立间接ELISA法。同时用该方法检测30名正常献血者，30例SLE，30例类风湿关节炎（RA），10例原发性干燥综合征（SS），75例PM／DM患者血清中抗Jo-1抗体。结果经重组质粒测序和酶切结果证实，Jo-1目的基因已正确插入原核表达载体中，基因序列正确，符合表达框架；经SDS-PAGE检测显示，表达产物在相对分子质量55000处有一明显的蛋白表达条带；WB分析表明，重组蛋白具有人Jo-1抗原反应性；间接ELISA法检测标本血清结果显示，PM／DM组中抗Jo-1抗体的阳性率为28％，非PM／DM组（疾病对照组及正常对照组）均为阴性，其差异均有统计学意义（r=31．84，均P〈0．01）。结论成功克隆了人组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1基因，其可在大肠杆菌中表达，且重组自身抗原具有较好的抗原性和特异性。应用纯化融合蛋白建立的间接ELISA法检测PM／DM抗Jo-1抗体具有较好的特异性。
- 李珊珊李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军杨卫平
- 关键词：自身抗原酶联免疫吸附测定皮肌炎
- 生物芯片技术的标准化建设
- 生物芯片技术是二十世纪九十年代开始发展的一项十分重要且具有战略意义的高新技术，已被公认将会给21世纪的生命科学和医学研究带来一场革命，并因此而成为各国学术界和工业界所瞩目。生物芯片主要包括微阵列芯片、微流控芯片、芯片实验...
- 赵智贤
- 抗核抗体谱检测蛋白芯片在自身抗体谱检测中的应用
- 研究背景:自身免疫性疾病的起始原冈和发病机制非常复杂,目前认为是在内因和外因的共同作用下,机体的自身免疫应答失控,反应过度,直接或间接破坏白身组织,并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。因此自身免疫病患者中,有相当一部...
- 李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军高扬杨卫平于孟学朱立平程京
- 文献传递
