赵丹军
- 作品数:7 被引量:10H指数:2
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- 以聚乙烯亚胺-β-环糊精为骨架偶联短肽CY11的转基因载体被引量:2
- 2009年
- 目的:以聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用靶向于肿瘤表面成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的短肽CY11(CGMQLPLATWY)偶联于载体材料上,研究该载体材料的基因转染效率。方法:用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将CY11偶联到PEI-β-CyD上,合成CY11-PEI-β-CyD。核磁共振氢谱(1H-NMR)、热重分析(TGA)对载体材料进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,MTT法测定载体材料的细胞毒性,在COS-7、Hela和B16细胞株上进行体外转染实验。结果:成功合成材料CY11-PEI-β-CyD,在N/P为4时能够有效地浓缩质粒DNA。在B16细胞上,材料CY11-PEI-β-CyD达到160μg/ml时,细胞存活率仍高于80%。在CY11-PEI-β-CyD/DNA复合物在N/P为20∶1时,转染效率是对照组PEI-β-CyD的17倍。结论:CY11-PEI-β-CyD是具有低毒性、高转染且有FGFR靶向性的新型非病毒转基因载体。
- 虎义平姜启英陈丹赵丹军陆晓余海王青青周峻胡秀荣汤谷平
- 关键词:聚乙烯亚胺肽类成纤维细胞生长因子
- 聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸-聚乙烯亚胺共聚物作为非病毒载体的研究被引量:2
- 2009年
- 目的:选用聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸材料作为骨架偶联低分子量聚乙烯亚胺,以构建低毒、高效的新型非病毒性基因载体。方法:用聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸(PHPAG)为基本骨架,偶联低分子量的聚乙烯亚胺(PEI1.8kDa)形成聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸-聚乙烯亚胺(PHPAG-PEI1.8kDa)的载体材料。通过核磁共振氢谱(1H-NMR)、粒径测定、凝胶体积排除色谱法(GPC)等化学物理方法,凝胶电泳阻滞实验、MTT细胞毒性实验、细胞转染等生物学实验,对聚合物的结构及性能进行研究。结果:成功合成载体材料PHPAG-PEI1.8kDa。通过1H-NMR证实材料PHPAG-PEI1.8kDa在5或6个氨基酸上能偶合1个PEI1.8kDa。GPC结果表明PHPAG、PHPAG-PEI1.8kDa2种材料的分子量约为1.2×104。粒径检测结果显示,PHPAG-PEI/pDNA复合物的平均粒径为200nm左右。凝胶电泳阻滞实验表明,PHPAG-PEI/pDNA复合物在N/P为3.5∶1时可以完全阻滞DNA。细胞毒性实验表明,在COS-7和A2932种不同的细胞中,载体材料显示出较低的毒性,与对照组PEI1.8kDa相近。在B16细胞、Hela细胞上的转染实验表明,PHPAG-PEI/pCAG-Luc3的复合物在N/P为25∶1时的转染效率最高,高于对照组PEI25kDa。结论:PHPAG-PEI聚合物载体材料是一种有潜在用途的非病毒基因药物载体。
- 陈丹何彬彬赵丹军姜启英王中仁周峻余海王青青汤谷平
- 关键词:聚乙烯亚胺转染质粒谷氨酸天冬氨酸
- 香菇多糖键合低分子量的聚乙烯亚胺作为新型非病毒基因载体的研究被引量:3
- 2009年
- 目的:构建以香菇多糖为骨架材料键合低分子量聚乙烯亚胺的新型转基因载体,研究其在肿瘤细胞中的基因转染。方法:从香菇中提取香菇多糖作为载体骨架,1,1'-二羰基咪唑(CDI)作为交联剂,键合低分子量的聚乙烯亚胺(PEI1.2kDa)形成香菇多糖-聚乙烯亚胺(LNT-PEI)聚合载体材料。将叶酸(folicacid,FA)偶联到LNT-PEI上,形成具有肿瘤细胞靶向性的组装式基因载体LNT-PEI-FA。用核磁共振氢谱(1H-NMR)、傅里叶转换红外光谱(FT-IR)和热重分析(TGA)等对载体材料进行化学表征,以确定其结构。用凝胶电泳阻滞实验观察LNT-PEI-FA对质粒DNA的结合能力,MTT法检测聚合物的毒性,用TEM对LNT-PEI-FA/DNA复合物的粒径大小、形状等进行检测。在A293和B16细胞株上进行转染实验。结果:凝胶阻滞电泳结果显示,LNT-PEI-FA与DNA在W/W为1.8∶1时可以完全缩合DNA,在相同浓度下LNT-PEI-FA的毒性明显低于PEI25kDa;体外转染实验显示,在A293和B16细胞株上具有很高的转染效率,荧光素酶表达值分别为1×1010和1×107。结论:以香菇多糖为骨架材料键合低分子量聚乙烯亚胺形成的转基因载体是一种有潜在研究价值的新型非病毒转基因载体。
- 姜启英陆晓虎义平陈丹赵丹军周峻余海王青青汤谷平
- 关键词:香菇多糖聚乙烯亚胺基因转移技术
- 氟尿脱氧核苷键合聚阳离子载体的合成及其抗肿瘤活性研究被引量:3
- 2009年
- 目的:合成5-氟尿嘧啶的聚乙烯亚胺-β-环糊精的高分子前体药物,并研究其抗肿瘤活性。方法:将氟尿脱氧核苷(5-氟尿嘧啶的一种前体药物)偶合于聚乙烯亚胺-β-环糊精载体材料,得到5-氟尿嘧啶的高分子前体药物;用核磁共振氢谱(1H-NMR)、紫外光谱(UV)以及红外光谱(FT-IR)对其结构进行表征,并在人肝癌细胞HepG2上进行细胞毒性实验和细胞迁移实验。结果:1H-NMR、UV以及FT-IR的结果表明氟尿脱氧核苷已以共价键的方式偶合于聚乙烯亚胺-β-环糊精载体材料上;紫外光谱测得其载药率约为2%;细胞实验结果表明,该高分子前体药物对肿瘤有一定的药效,并且一定程度上抑制肿瘤细胞的迁移。结论:成功合成了聚乙烯亚胺-β-环糊精-氟尿脱氧核苷,其对人肝癌细胞HepG2表现出一定的抗肿瘤活性。
- 赵丹军陆晓姜启英陈丹周峻余海王青青汤谷平
- 关键词:聚乙烯亚胺转染质粒基因疗法肝肿瘤
- 一种可生物降解的聚氨基酸衍生物及制备和应用
- 本发明提供一种可生物降解的聚氨基酸衍生物,分子量为30,000~40,000Da,在侧链上引入了一系列比例的伯、仲、叔三种氨基,使其具有很强的pH缓冲能力和较高的转运并表达质粒DNA的能力,并对DNA的绑定能力、转染效率...
- 汤谷平马楠李文忠王维巍赵丹军周峻古斯塔夫.施坦因霍夫
- 一种可生物降解的聚氨基酸衍生物及制备和应用
- 本发明提供一种可生物降解的聚氨基酸衍生物,分子量为30,000~40,000Da,在侧链上引入了一系列比例的伯、仲、叔三种氨基,使其具有很强的pH缓冲能力和较高的转运并表达质粒DNA的能力,并对DNA的绑定能力、转染效率...
- 汤谷平马楠李文忠王维巍赵丹军周峻古斯塔夫.施坦因霍夫
- 文献传递
- 聚天冬氨酸的衍生物作为基因载体的研究
- 聚阳离子材料是最常用的非病毒载体之一,通过静电作用与pDNA紧密结合,再与细胞膜相互作用进入细胞。聚乙烯亚胺(PEI)由于其独特的分子结构,在pH=2~10的范围内具有很强的缓冲能力,可以有效的保护pDNA在传递过程中不...
- 赵丹军
- 关键词:聚天冬氨酸基因载体细胞毒性转染效率生物相容性
- 文献传递