贺永怀
- 作品数:27 被引量:145H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- Ⅱ型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较被引量:60
- 1999年
- 目的对Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ-A)和弗氏完全佐剂(A-A)大鼠关节炎模型在大体外观和足部组织病理学切片等方面进行观察比较。方法分别采用Ⅱ型胶原蛋白和弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型,利用排水法对大鼠足部体积进行测定,并将大鼠后足进行组织病理学切片观察。结果从大体外观和足部病理切片上两种大鼠模型均显示出有明显的病变,但CⅡ-A大鼠与A-A大鼠比较,滑膜增生及软骨破坏等继发性病变特征更为明显,关节炎持续时间也较长,更接近于人的类风湿性关节炎。结论CⅡ-A大鼠模型与A-A相比是研究RA较为理想的动物模型。
- 林红贺永怀黎燕陆应麟沈倍奋
- 关键词:大鼠模型关节炎佐剂组织病理学
- 两种纯化蓖麻毒素方法的比较被引量:11
- 1994年
- 两种纯化蓖麻毒素方法的比较陈兴,赵立超,贺永怀,沈倍奋(军事医学科学院基础医学研究所,北京100850)高纯度的蓖麻毒素(ricin)对于免疫毒素的制备至关重要,直接影响到免疫毒素的应用效果。总结本实验室纯化ricin的经验,我们发现蓖麻粗提物依次通...
- 陈兴赵立超贺永怀沈倍奋
- 关键词:蓖麻毒素提纯免疫毒素蓖麻
- 免疫毒素的纯化被引量:1
- 1990年
- 本文采用Ultrogel AcA 34凝胶柱纯化单克隆抗体和蓖麻毒素的结合物。结合物与游离毒素的分离较Sephadex G150柱好。继而利用蓖麻毒素B链能与半乳糖基结合的特性,用酸化Sepharose 4B柱进一步纯化结合物;达到完全除去游离抗体,使免疫毒素对靶细胞的特异性毒性提高20倍。
- 贺永怀陈兴汲言山赵薇薇沈倍奋
- 关键词:免疫毒素纯化单克隆抗体
- 抗人gp130分子单克隆抗体的制备和鉴定被引量:1
- 2000年
- 目的 gp130(亦称CD130)可与许多细胞因子受体(IL 6R,IL 11R,OSMR,LIFR,CNTFR和CT 1R)组成受体复合物,并在这类细胞因子的信号转导中起着重要的作用。方法以痘苗病毒为载体构建获得的可溶性CD130(sCD130)为免疫原 ,通过细胞融合的方法 ,得到4株稳定分泌抗CD130单克隆抗体(mAb) (L2,L4a,L4b和L5)的杂交瘤细胞株。结果本组mAb对靶细胞具有识别特异性 ,不但可识别相对分子质量 (Mr)为98000的sCD130分子,也可识别Mr为130000的膜表达型CD130分子(mCD130)。另外 ,mAb还可与CD130分子形成免疫复合物 ,用于免疫沉淀CD130分子 ,但这组抗体中仅mAbL2可部分组断IL 6对靶细胞的增殖作用。结论成功地研制了抗人gp130分子mAb。
- 黎燕李小军贺永怀赖春宁倪长源胡美茹董家新沈倍奋
- 关键词:单克隆抗体
- 两种抗T细胞免疫毒素对靶细胞杀伤效应的比较
- 2000年
- 免疫毒素杀伤靶细胞的关键取决于抗体对靶细胞的特异性识别和毒素对靶细胞的杀伤效率。本研究比较了我们所研制的两种抗T细胞免疫毒素 (CD5∶rRA和CD5∶Ricin)对靶细胞的特异性杀伤效应。实验结果证实 :①两种免疫毒素在 10 -9- 10 -11mol L浓度范围内均可有效地清除CD5 +T细胞群 ,并对CD2 5 +CD3+激活T细胞具有剂量依赖性抑制作用 ;②两种免疫毒素均对混合淋巴细胞增殖反应有明显抑制作用 ,与CD5∶Ricin比较 ,CD5∶rRA在 10 -10 - 10 -11mol L浓度范围内对T细胞增殖的抑制作用明显减弱 ;③ 10mmol L氯化铵与CD5∶rRA联合应用 ,可增强CD5∶rRA对T细胞的清除效率 ;④两种免疫毒素及氯化铵与CD5∶rRA联合应用在有效杀伤T细胞的浓度范围内 ,对骨髓粒
- 黎燕赖春宁裴武红贺永怀孙英勋沈倍奋陈兴国金荔孔繁华
- 关键词:T淋巴细胞靶细胞
- CD3AK细胞过继免疫治疗的实验研究被引量:21
- 2005年
- 目的: 分析抗CD3分子的单克隆抗体 (mAb)yCD3的免疫学特性和生物学活性, 观察其激活的免疫活性细胞CD3AK体外及动物体内的抑瘤作用。方法: 用流式细胞术(FCM)测定yCD3的特异性, 以及CD3AK细胞的免疫表型和产生细胞因子的情况。用 3H -TdR法测定yCD3对淋巴细胞转化的作用; 乳酸脱氢酶法 (LDH)测定CD3AK细胞的体外细胞毒活性。建立荷瘤小鼠模型, 观察静脉注射CD3AK细胞后肿瘤生长的情况、转移灶数量和小鼠存活天数。结果: yCD3与T细胞呈特异性反应, 5μgyCD3可竞争抑制 70%的标准抗CD3抗体与细胞表面CD3分子的结合。yCD3刺激外周血淋巴细胞增殖的有效浓度为 8μg/L, 并与IL- 2、抗CD28抗体有协同作用。活化的CD3AK细胞中CD3+、CD8+和CD25+细胞增多; 产生IL- 2和IFN γ的CD3+细胞均有不同程度的增加, 在抗CD28抗体协同刺激下分别增加 3. 29和 2. 47倍。当效靶细胞比为 80∶1时, CD3AK细胞对体外肿瘤细胞杀伤的百分率为 57. 54%。分组观察荷瘤动物, CD3AK细胞治疗组的抑瘤率为 33. 17%, 对小鼠肿瘤肺转移的抑制率为39. 70%, 与LAK细胞联合治疗的疗效更显著。结论: yCD3可活化T细胞, 诱导的CD3AK细胞在体外及动物体内显示抑制肿瘤的作用, 在临床抗肿瘤过继性免疫治疗中具有重要意义。
- 孙瑛勋程绍辉于鸣贺永怀赖春宁黎燕沈倍奋
- 关键词:抗CD3单克隆抗体CD3AK细胞过继性免疫治疗
- CD_(10)单克隆抗体与造血细胞间关系的研究被引量:3
- 1990年
- 单克隆抗体的特异性在导向药物治疗某些疾病的应用研究中起着重要的作用。尽管单克隆抗体对靶细胞具有特异性识别能力,但仍可能与一些无关细胞有着不同程度的交叉反应。本实验结果表明:(1)用浓度为10^(-8)M、10^(-9)M 的抗普通型急性淋巴细胞白血病单克隆抗体免疫毒素(79:ricin)处理骨髓细胞后,CFU-GM 的增殖分别受到抑制.(2)用79单克隆抗体阻断后,抑制作用明显减弱.(3)去除骨髓中79抗体阳细胞后,CFU-GM 的增殖也明显减弱。这表明79单克隆抗体不仅仅是一个识别普通型急性淋巴细胞白血病细胞的单克隆抗体,它还可能是一个识别部分骨髓粒单系造血祖细胞的单克隆抗体。
- 黎燕沈倍奋陈兴贺永怀陈勇张双喜
- 关键词:免疫毒素CFU-GM
- CTLA4Ig融合蛋白在CHO细胞中的表达被引量:1
- 2004年
- CTLA4Ig是人CTLA4胞外区与人免疫球蛋白铰链区、CH2区、CH3区组成的融合蛋白,可以与B7结合,通过阻断B7与CD28的结合,从而阻断B7介导的T细胞活化必需的共刺激信号,可作为免疫抑制剂用于器官移植。将CTLA4Ig融合分子克隆到真核表达载体pCI-dhfr,并用脂质体方法转染到COS7和CHO-dhfr-细胞中,用氨甲喋呤筛选转染的CHO-dhfr-细胞。用RT-PCR、ELISA、细胞免疫荧光染色和Western-blot鉴定重组蛋白的表达。采用A蛋白纯化重组蛋白。
- 陈兴于继云沈倍奋黎燕王嘉玺程绍辉贺永怀曲梅花胡美茹孙瑛勋于鸣
- 关键词:CHO细胞免疫抑制剂
- 免疫毒素清除人骨髓中克隆化白血病细胞的研究被引量:1
- 1989年
- 识别普通型急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)的单克隆抗体共价连接到完整的蓖麻毒素上,间接免疫荧光显示此免疫毒素(79:Ricin)能与Nalm-1靶细胞结合。克隆化试验表明:半乳糖存在时,10^(-9)~10^(-3)M 79:Ricin能杀死99.9% Nalm-1细胞。正常骨髓细胞的存在并不影响它清除靶细胞的效果。79:Ricin免疫毒素对骨髓造血干细胞毒性不很大。
- 沈倍奋方美玉贺永怀陈兴
- 关键词:免疫骨髓白血病
- IL-6信号转导与转录激活子活性研究
- 1999年
- 目的 探讨 I L6 生物效应与胞内磷酸化蛋白和转录激活子活性变化之间的关系。方法 应用原位杂交和 A P A A P 方法检测细胞内 I L6 R m R N A 和蛋白的表达;采用 D N A 结合蛋白凝胶阻滞电泳分析 I L6 信号转导与 A P R F 活性的相关性;用免疫沉淀和 S D S P A G E 观察 I L6 信号转导中磷酸化蛋白的变化情况。结果 (1) I L6 受体( I L6 R) m R N A 和蛋白表达阳性的人骨髓瘤细胞系( S K O007) 体外对 I L6 有增殖反应;(2) 胞内转录激活子活性与 I L6 诱导时间和剂量有相关性,抗gp130 单克隆抗体和酪氨酸蛋白激酶抑制剂均可特异性抑制转录激活子活性;(3) I L6 诱导 S K O007细胞后,胞浆内出现一组相对分子质量为(130 、90 、54 、36) ×103 磷酸化蛋白,它们的磷酸化活性与转录激活子活性一样,也具有时间和剂量相关性。结论 结果提示,转录激活子和这组相对分子质量不同的酪氨酸磷酸化蛋白参与 I L6 信号转导调节。
- 黎燕赖春宁林红倪长源贺永怀沈倍奋
- 关键词:IL-6转录激活子磷酸化蛋白