蓝灿华
- 作品数：19 被引量：62H指数：5
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省发展和改革委员会项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 敲除SNF1基因提高酿酒酵母乙醇生物合成的研究被引量：2
- 2009年
- SNF1基因编码的Snf1p对起始受葡萄糖阻遏基因的转录是必需的。通过重叠延伸PCR和两步PCR法合成了两端各带有352bp和345bp与SNF1序列上下游同源的基因敲除组件。将该敲除组件转化至酿酒酵母YS2,获得被loxP-kan-loxP序列组件替换而产生kanr的阳性克隆子。然后将质粒pSH65转入阳性克隆子并诱导表达Cre酶切除kan基因,进而通过传代丢失质粒pSH65后得到SNF1单倍体缺陷型菌株。重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除,得到SNF1双倍体缺陷型菌株YS2-△snf1::loxp-kan-loxp。厌氧发酵试验表明该突变株的乙醇产量较出发菌株YS2提高了8.74%。残糖量试验表明在培养基中葡萄糖消耗殆尽后,突变株相对于出发菌株而言并没有利用乙醇作为碳源,乙醇产量保持稳定未有下降。敲除SNF1基因是提高酿酒酵母生物合成乙醇的一条有效途径。
- 雷娟娟王艳尊江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强吴松刚黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除乙醇
- 酶解法制备草鱼抗氧化多肽工艺的建立被引量：1
- 2012年
- 目的:筛选优化合适的可用于水解草鱼蛋白制备活性多肽的蛋白酶制剂及其工艺。方法:选取不同特性来源的商品化蛋白酶制剂与实验室分离的枯草蛋白酶BPN,对比分析它们在水解草鱼蛋白过程中的水解度变化,及其酶解产物的抗氧化活性。结果:大多数蛋白酶在水解反应最初的60min内,水解度迅速增加,之后2h内曲线变化不大。其中细菌来源的水解蛋白酶水解能力最强,其2h水解产物水解度可达15.17%;木瓜蛋白酶水解产物的抗氧化活性较强,经测定其DPPH清除能力为96.24%。结论:不同特性的蛋白酶水解草鱼蛋白的水解速度和产物的活性成分具有明显差异,总的来说,木瓜蛋白酶在草鱼蛋白加工中制备活性多肽是一个比较理想的选择。
- 蓝灿华林小文黄薇蔡婉玲郭菁田宝玉
- 关键词：蛋白酶草鱼酶解工艺多肽抗氧化性
- 杀线虫细菌W3胞外体壁降解蛋白酶的纯化及部分特性被引量：1
- 2009年
- [目的]为筛选和开发高效新型生物杀线虫剂提供依据。[方法]以土壤中筛选的1株具有明显杀线虫活性的细菌菌株W3为供试菌种,对其进行发酵培养,采用硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子柱层析等方法从发酵液中分离W3菌株的杀线虫活性成分,并对各活性成分的杀线虫活性进行测定。[结果]W3菌株粗蛋白处理线虫4 h后,虫体活动异常,部分虫体静止不动,处理36 h后大部分虫体不活动,部分虫体体壁断裂现象,最终所有线虫被完全消解;从发酵液中纯化出1种能降解线虫体壁的胞外蛋白酶,该酶的分子量约为45KDa,其作用的最佳pH值为7～8,最佳温度为45℃。[结论]W3菌株胞外蛋白酶具有明显的杀线虫活性和线虫体壁降解活性。
- 田宝玉蓝灿华江贤章柯崇榕黄薇黄建忠
- 关键词：胞外蛋白酶
- 蛋白酶产生菌的筛选和紫外诱变育种被引量：17
- 2011年
- 目的:筛选水产品加工用蛋白酶产生菌,为酶的的分子改造和水产品加工提供材料基础。方法:通过在富含水产品蛋白的场所的针对性采样,菌落平板筛选结合发酵上清液平板验证以及Folin-酚试剂定量检测确认筛选结果,并通过紫外诱变提高产中性蛋白酶菌株的产酶能力。结果:从12份土样中分离187株具有明显蛋白酶活性的单菌落。在挑取的11株透明圈明显的蛋白酶产生菌中,菌株W9在所有菌株中可以稳定产生较高的蛋白酶酶活力,约为1 594U/ml。通过对其进行紫外诱变后,在突变株中筛选得到一株酶活约为1 845U/ml的W9UV突变株,比野生菌株酶活提高了15.6%。结论:突变菌株W9UV可稳定产生较高的蛋白酶酶活力,发酵性能优良。
- 蔡婉玲田宝玉郭菁蓝灿华黄薇黄建忠
- 关键词：中性蛋白酶酶活紫外诱变
- 中性蛋白酶在麦迪霉素溶媒萃取中的破乳作用被引量：1
- 2016年
- 研究一种利用AS1.398中性蛋白酶大幅度减轻麦迪霉素溶媒(醋酸丁酯,BA)萃取时乳化现象的方法,通过正交试验确定综合效果最佳的酶反应条件:酶加量(En)0.10%,温度37℃,pH7.0,搅拌时间60 min。在该条件下,可以减轻84%的乳化。利用该法破乳,麦迪霉素的成品质量和提取收率不受影响,而溶媒损耗却降低28%,并且可以改善劳动条件,达到节能、环保的目的。
- 蓝灿华吴菲菲郑丹梅黄琳
- 关键词：麦迪霉素破乳
- 酿酒酵母adh2和ald6双基因缺失突变株的构建被引量：7
- 2009年
- 酿酒酵母乙醇合成代谢过程中,阻断或削弱乙醛至乙酸代谢流不但能增强乙醇合成流,同时还能降低发酵乙酸含量。本研究以乙醇脱氢酶Ⅱ(adh2)基因缺陷型酿酒酵母YS2-Δadh2为出发菌株,应用长侧翼同源两步PCR(LFH-PCR)策略构建乙醛脱氢酶Ⅵ(ald6)基因敲除组件,转化酿酒酵母YS2-Δadh2敲除ald6基因,之后转入表达质粒pSH65到阳性克隆中,半乳糖诱导表达Cre重组酶切除Kanr基因筛选标记,最后,传代丢失质粒pSH65获得单倍体ald6基因缺失突变株。利用同样的敲除组件和技术再次敲除其等位基因,最终获得双基因缺失突变株YS2-△adh2-Δald6。发酵实验表明与出发菌株YS2相比,突变株乙酸合成量降低18%,乙醇最高产量提高12.5%。
- 王艳尊雷娟娟江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强陈如凯黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除
- 油菜根内生菌分离、鉴定及其植物益生作用筛选被引量：2
- 2021年
- 从油菜中分离鉴定根内生细菌菌株,检测评估其促生、抑菌潜力和机制,为开发具有植物促生和病害防控的微生物肥料提供依据。以油菜为研究对象,通过分离纯化和16S rRNA基因扩增分离和鉴定油菜根内生细菌,并进一步通过平板法、酶活法以及抑菌试验等分析分离其木制纤维素降解能力、促生作用以及抑菌活性等益生特性及其机理。结果表明:根据细菌菌落形态、颜色和大小,挑取纯化得到14株油菜根内生细菌菌株。经16S rRNA基因测序和鉴定分析,分别为假单胞菌、肠杆菌、芽孢杆菌、葡萄球菌和莱略特菌。在分离纯化的14株内生菌株中,除菌株Y-7、Y-8外都具有明显的木聚糖酶活性,除菌株Y-1、Y-7、Y-8、Y-9、Y-10外都具有纤维素分解能力,进一步对14株内生菌株的植物益生作用进行初步筛选和评价,得到产铁载体菌株Y-2、Y-4、Y-6、Y-10、Y-11、Y-13、Y-14,具有稳定固氮能力的固氮菌株Y-1、Y-2、Y-10、Y-13、Y-14。在拮抗内生菌筛选中,得到拮抗大肠杆菌菌株Y-1、Y-6、Y-7、Y-8、Y-12,拮抗金黄色葡萄球菌菌株Y-3、Y-4,拮抗枯草芽孢杆菌菌株Y-1以及拮抗黑曲霉菌株Y-3、Y-4、Y-6、Y-9、Y-10、Y-14。大多数分离的油菜根内生菌具有一定的木质纤维素降解能力。分离的油菜根内生菌具有广泛而多样性的植物益生特性,如促生长和抑菌活性,这些益生特性可能与其具有的产铁载体、产IAA以及固氮能力有关。结果表明油菜根内生菌可以作为筛选和开发具有植物促生和病害防控作用的微生物菌剂的重要来源。
- 张沁怡杨美雪张婷程林洁黎烨张羽杉李景虹蓝灿华田宝玉李欣
- 关键词：分子鉴定
- 响应面法优化正红菇菌丝体产胞内凝集素培养条件被引量：2
- 2010年
- 采用响应面法对液体深层培养的正红菇(Russula vinosa)菌丝体产胞内凝集素的培养条件进行了优化.通过单因子实验确定最适碳源和氮源为淀粉和酵母膏,在此基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其产胞内凝集素的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的淀粉、酵母膏、装液量3个因素,通过最陡爬坡实验及响应面分析法确定了产凝集素的最适条件:ω(淀粉)3.04%,ω(酵母膏)0.3%,ω(KH2PO4)0.2%,ω(MgSO4)0.1%,装液量73mL,转速250r/min,初始pH5,发酵时间5d.在此条件下,菌丝体产胞内凝集素的总活力可达72127.3u,与初始培养条件下的凝集素总活力相比提高了1.88倍.
- 黄维雅刘艳如蓝灿华黄建忠
- 关键词：正红菇菌丝体凝集素响应面法
- 患根结线虫病番茄根内生固氮菌的筛选、鉴定和系统发育分析被引量：5
- 2020年
- 植物内生固氮菌能通过自身的固氮作用,把空气中的氮气转化为植物可利用的氨态氮,促进植物生长以及提高作物产量。以患根结线虫病的番茄根组织为材料,采用梯度稀释和划线法分离纯化番茄根内生菌,通过无氮固体培养基连续培养筛选固氮菌,并扩增固氮细菌的16S rRNA基因序列进行鉴定和系统发育分析,初步了解患根结线虫病的番茄根内菌的种类和分布。结果表明,在挑选和分离纯化得到的33株番茄根内生菌中,经过在无氮培养基平板上连续的传代培养,最终得到3株具有稳定固氮能力的内生菌株。分子鉴定和序列分析表明筛选出的内生固氮菌菌株中包括8株芽孢杆菌、1株黄单胞菌和1株根瘤菌。与先前发表的番茄根内生菌优势OTU的聚类分析结果表明,根瘤菌是患根结线虫病番茄根中优势的内生固氮菌种群。
- 金玲月路晶晶冯燕辉张沁怡吴寒李容丹黄薇蓝灿华蓝灿华
- 关键词：根结线虫内生固氮菌分子鉴定
- 水产品蛋白酶解工艺的正交设计优化
- 2012年
- 试验以草鱼鱼肉蛋白为原料,采用蛋白酶突变株166水解,在单因素试验的基础上,以抗氧化性为考察指标,对反应时间、加酶量、反应pH及反应温度等因素进行正交试验,确定蛋白酶突变株166水解草鱼蛋白获得活性物质的最佳操作条件:酶解时间120 min,酶解温度65℃,pH 7.5,加酶量4 000 U/g,在此条件下,水解产物的抗氧化性可达到52.07%。
- 蓝灿华吕晔明黄薇蔡婉玲郭菁黄建忠田宝玉
- 关键词：蛋白酶解产物单因素试验正交设计
