芦春斌
- 作品数：54 被引量：160H指数：8
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目转基因生物新品种培育专项广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 转基因植物(农产品)中转基因成分的PCR检测被引量：1
- 2006年
- 转基因(植物)食品的安全性是科学界及公众普遍关心的问题。在转基因植物研究中,根据转基因植物所带有的转基因成分的DNA序列,设计引物对耐草铵膦转基因植物中转入的转基因成分进行了PCR分析,结果表明,采用PCR扩增对外源基因和遗传标记基因的分析方法灵敏、准确。
- 芦春斌
- 关键词：转基因成分PCR分析
- 人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建被引量：3
- 2002年
- 目的 用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus ,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列 ,插入pPIC9K质粒 ,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法 根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋白pp15 0C末端的cDNA序列 ,设计出 2对引物。利用PCR的方法 ,以病毒培养液上清为模板 ,进行二轮PCR扩增 ,把两个目的基因串联在一起 ,将所得的DNA片段经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后用T4连接酶与pPIC9K质粒进行连接 ,然后导入大肠杆菌DH5α ,筛选出阳性转化子 ,并用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果 从人巨细胞病毒培养液上清中扩增出目的基因 ,PCR反应和双酶切鉴定结果与预期相符。
- 郑育声谢琪璇潘善培芦春斌肖銮娟
- 关键词：基因表达人巨细胞病毒重组PCR
- 密码子植物化的小鼠ZP3蛋白基因人工合成被引量：1
- 2009年
- 对小鼠ZP 3蛋白基因cDNA序列进行生物信息学分析,并将其核心区分成两部分进行分部合成。设计了多对特异性的重叠引物,采用多步PCR方法合成了植物化的小鼠ZP 3蛋白基因的不同片段。再经重叠PCR技术将这两段DNA连接在一起,构成完整的ZP 3基因的编码区。DNA序列测定人工合成的基因为植物化的ZP 3基因。
- 芦春斌
- 关键词：重叠PCR
- 花生种子贮藏蛋白的热稳定性与氨基酸组成的关系被引量：8
- 2001年
- 分析两种不同蛋白类型的花生种子贮藏蛋白热稳定性 ,表明各品种类型花生种子贮藏蛋白的 3种主要组分的的热稳定性存在显著的差异 ,即伴花生球蛋白 热稳定性最高 ,伴花生球蛋白 次之 ,花生球蛋白最低。高甲硫氨酸品种类型 (汕油 5 2 3)的贮藏蛋白中无论花生球蛋白还是伴花生球蛋白 的热稳定性都高于低甲硫氨酸品种类型 (海花 1号 )相应组分的热稳定性。氨基酸分析表明 ,各品种 3种组分中 17种氨基酸中的大多数氨基酸含量无显著变化 ,并且天冬氨酸 ,谷氨酸和精氨酸的含量最高 ,三者之和可达总量的 45 %以上 :3种组分中 ,伴花生球蛋白 除了谷氨酸和精氨酸含量显著高于花生球蛋白 ,伴花生球蛋白 外 ,含硫氨基酸 (甲硫氨酸和半胱氨酸 )也明显高于后两者。 3个组分中含硫氨基酸水平与热稳定性正相关 ,即含硫氨基酸水平越高 ,其热稳定性越高。冷藏过程中含硫氨基酸高的伴花生球蛋白 不易降解、保持高热稳定性水平。
- 芦春斌黄上志傅家瑞
- 关键词：花生种子贮藏蛋白氨基酸组成热稳定性
- 植物化的猪α-乳清蛋白基因人工合成被引量：2
- 2004年
- 根据猪α-乳清蛋白基因 c DNA序列设计了多对特异性引物 ,采用循环 PCR方法人工合成了植物化的猪α-乳清蛋白基因编码区 (398bp)并对该 PCR产物进行测序。DNA序列测定结果表明 ,采用循环 PCR法扩增的产物是预期的猪 α-乳清蛋白基因编码区 ,该植物化的猪 α-乳清蛋白基因编码区可以用于植物转化 ,为猪 α-乳清蛋白基因转基因植物研究和在转基因植物中进行动物基因表达研究奠定了基础。
- 芦春斌
- 关键词：基因编码区基因CDNA基因表达扩增植物转化PCR产物
- 抗草甘膦转基因大豆对雄性生殖损伤小鼠体外受精作用的影响
- 2017年
- 用化疗药物环磷酰胺(CP)处理小鼠建立雄性生殖损伤模型,以抗草甘膦转基因大豆饲料喂食30 d,进行体外受精实验,检测其受精率及2-细胞、4-细胞、8-细胞和囊胚的形成率和优胚率,评估转基因大豆饲料对雄鼠生殖功能的潜在影响。实验结果显示,在CP处理导致的生殖损伤条件下,与非转基因大豆喂食组相比,以抗草甘膦转基因饲料喂食30 d对小鼠受精率,及其分裂形成的2-细胞、4-细胞、8-细胞和囊胚形成率和优胚率无显著(P>0.05)影响,表明CP诱导的生殖损伤状态下,抗草甘膦转基因大豆饲料喂食30 d不会对雄性小鼠的生殖功能造成损伤。
- 芦春斌张雁陈博慧林泽斌仇平乐刘标
- 关键词：转基因大豆小鼠体外受精
- 石斛多糖在制备癌症化疗后生殖损伤恢复药物中的应用
- 本发明公开了石斛多糖在制备癌症化疗后生殖损伤恢复药物中的应用。本发明的石斛多糖治疗效果明显，副作用小，可有效减轻铂类抗癌药物对生殖系统造成的损伤，不仅使小鼠精子数量显著回升，精子质量也有所提高，并有效提高小鼠睾丸组织的抗...
- 芦春斌张裕明李春梦朱倍倍仇平乐
- 文献传递
- 芒柄花黄素通过雌激素受体抑制前列腺增生
- 2024年
- 本研究通过网络药理学的方法预测核心靶点,再进行分子对接和动物实验来探讨芒柄花黄素的抗良性前列腺增生(BPH)作用。从SwissADME数据库筛选有效活性成分并进行药物靶点预测。收集TTD、Gene Cards和Drug Bank数据库中收录的良性前列腺增生的疾病靶点。将药物靶点与疾病靶点取交集靶点,使用交集靶点构建PPI网络并进行GO和KEGG富集分析,利用Autodock Vina软件进行分子对接芒柄花黄素的雌激素活性。建立小鼠良性前列腺增生模型,分为:对照组、增生组、2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、5 mg/kg+fulvestrant (20 mg/kg/week)、10 mg/kg+fulvestrant (20 mg/kg/week)组。HE染色和Masson染色观察病理变化。QPCR检测雌激素受体和细胞周期基因表达量。芒柄花黄素与良性前列腺增生存在35个潜在的蛋白靶点,核心靶点有ER-α、EGFR、ER-β、CYP19A1、ACh E和PPARA。GO和KEGG富集分析表明,芒柄花黄素的作用靶点主要涉及细胞对雌二醇刺激的反应、雌激素生物合成、类固醇激素受体活性和类固醇结合等过程相关过程,以及类固醇激素的生物合成和雌激素信号通路。分子对接显示,与ER-α相比,芒柄花黄素与ER-β有更好的亲和力。前列腺增生模型小鼠用芒柄花黄素处理后病理学切片结果显示,芒柄花黄素能明显地抑制小鼠良性前列腺增生,而雌激素受体抑制剂(氟维司群)显著抑制芒柄花黄素的治疗效果。QPCR结果表明,芒柄花黄素可以降低ER-β的表达,并提高前列腺组织的ER-α。同时,芒柄花黄素处理后,与细胞周期相关的CDK1、cyclinA2、CDK2和cyclinB1的表达水平出现下降,而雌激素受体抑制剂处理后,这一现象被抑制。综上所述,网络药理学分析和动物实验结果发现芒柄花黄素通过雌激素受体阻滞细胞周期进程抑制前列腺增生发展。
- 王晓航王乐肖銮娟芦春斌
- 关键词：良性前列腺增生网络药理学分子对接雌激素受体
- 花生种子贮藏蛋白的氨基酸组成分析及发育过程中17.5 kDa多肽的合成规律被引量：7
- 2000年
- 分析了两种不同蛋白质组成类型花生的子叶总蛋白３个主要组分及高甲硫氨酸类型花生的６０．５、４１、３８．５、１８和１７．５ ｋＤａ多肽的氨基酸组成，结果表明它们均含有 １７种氨基酸，其中天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸含量最高，而甲硫氨酸含量和半胱氨酸水平都极低。高甲硫氨酸类型品种的各组分的甲硫氨酸含量均显著高于低甲硫氨酸类型品种的对应组分的甲硫氨酸含量，在这两种类型花生中伴花生球蛋白ＩＩ都是甲硫氨酸含量最高的组分。探讨了１７．５ ｋＤａ高甲硫氨酸多肽在花生种子发育过程中的合成规律。
- 芦春斌黄上志汤学军傅家瑞
- 关键词：花生种子氨基酸组成
- 多重PCR检测转基因水稻的转基因成分被引量：26
- 2012年
- 以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR检测体系。结果表明:建立的七重PCR体系能有效检测出水稻及其他作物(大豆、玉米、棉花籽、菜籽粕)中的转基因成分,检测过程简便、特异性好。
- 魏霜陈贞芦春斌马骏白卫滨吴希阳
- 关键词：转基因检测水稻
