王水良
- 作品数：60 被引量：113H指数：5
- 供职机构：南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律更多>>
- ELISA定量测定sCD30的方法学评价与临床应用被引量：3
- 2007年
- 目的:用ELISA方法评价Bender MedSystems公司的"研究用"human sCD30 ELISA定量测定试剂盒的方法学及其在临床应用。方法:收集到458例尿毒症等待肾移植、淋巴瘤病和一些恶性肿瘤患者及健康成人的血清、尿液、腔积液,采用ELISA定量检测sCD30浓度,并进行比较;另对该方法的精密度、准确性及曲线的线性与测定范围作了观察。结果:249例肾移植术前患者的sCD30浓度为(178.1±80.3)U/ml、11例非霍奇金淋巴瘤患者为(233.3±61.2)U/ml,比58名健康成人(45.5±16.8)U/ml显著增高(P<0.01);而肾移植术前及术后均增高患者在术后1周内发生急排率为38.5%;8例霍奇金病患者和9例恶性肿瘤患者的sCD30分别为(86.1±46.0)和(92.1±40.6)U/ml,也明显高于健康成人(P<0.01)。ELISA定量测定sCD30的批内CV3.9%,批间CV6.3%,回收率为(101.2±2.9)%,线性相关性系数r=0.999 2。结论:ELISA定量测定sCD30方法简便,重复性好,结果可靠,适用于各种体液标本的检测。在以免疫应答为主流的疾病中,血清中sCD30浓度增高常与疾病的活动性加重有关。而从目前接受肾移植的患者血清中的初步结果可以看出其浓度与急性排斥反应相关,有望成为预测排斥风险的有用标志物。
- 曾章新邓章彬王栋王庆华谭建明王水良朱忠勇
- 关键词：ELISA
- 慢病毒载体系统介导人脐带间充质干细胞绿荧光蛋白和荧光素酶共表达技术体系的建立
- 【目的】建立慢病毒载体系统介导的人脐带间充质干细胞绿荧光蛋白和荧光素酶共表达技术体系。【方法】绿荧光蛋白和荧光素酶共表达慢病毒载体与相应包装质粒psPAX2和pMD2.G经聚乙烯亚胺(PEI)介导共转染HEK293T细胞...
- 王水良林凤锦黄粱浒王瑾王庆华谭建明
- 曲格列酮减少CyclinD1的表达抑制体外培养GH3细胞增殖的实验研究
- 2008年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖激活受体-γ（PPAR-γ）高亲和力配体-噻唑烷二酮类药物曲格列酮对大鼠垂体腺瘤GH3细胞系增殖的影响，并初步探讨其作用机制。方法不同浓度的曲格列酮作用于GH3细胞，用MTT法检测各组GH3细胞生长情况，用流式细胞技术检测各组GH3细胞周期的变化，用半定量IH—PCR方法检测各组GH3细胞CyclinD1基因mRNA的表达。结果曲格列酮干预GH3细胞72h后，以浓度效应关系抑制GH3细胞增殖，并使GH3细胞明显被阻滞于GI／S检测点，CyclinD1 mRNA表达明显减少，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论曲格列酮能明显抑制大鼠垂体腺瘤细胞的增殖，其分子机制可能是其与PPAR-γ结合后导致CyclinD1 mRNA表达减少，从而抑制了细胞增殖．促进肿瘤细胞死亡。
- 陈富勇王守森王水良王如密
- 关键词：垂体腺瘤曲格列酮噻唑烷二酮类药物细胞增殖
- 一起死亡事故中难辨尸体的个体基因识别被引量：3
- 2006年
- 目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA,采用荧光多重PCR技术,扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列(STR)基因座。将遇难者STR基因型与父母的STR基因型进行比对,确定遇难者的家庭归属。结果常规病理检查示部分肌肉组织结构完全破坏,但软骨组织结构尚完整。肌肉组织基因组DNA的凝胶电泳呈3种类型:基本无降解、部分降解、完全降解。只有部分肌肉组织DNA可用于确定STR基因型,所有软骨的DNA样本均可用于STR-PCR。结论以STR基因型分析为基础的亲子鉴定技术是确定事故遇难者身份的有效方法。对腐烂尸体的STR分析而言,尸体软骨组织是首选。
- 兰风华郑德柱黄梁浒柯龙凤涂向东程烽王志红王水良张朵庄岳鹏董荔红
- 关键词：DNA指纹法DNA聚合酶链反应
- 稳定整合靶向细胞周期蛋白E1基因RNA干涉载体的肝癌细胞系的建立
- 2006年
- 目的探讨经载体介导的RNA干涉法建立周期蛋白E1表达稳定抑制细胞系的可行性。方法将源自pSSC-9质粒的neo基因亚克隆至干涉载体pSilencer 1.0-U6以构建稳定干涉载体pSineo,再将其与合成的靶向周期蛋白E1基因特定的RNA干涉模板片段连接,重组载体经脂质体LipofectamineTM2000介导法转染肝癌细胞株BEL-7402;转染细胞经G418筛选,常规抽提G418抗性克隆细胞的基因组DNA并行PCR法鉴定外源导入载体的稳定整合情况。结果酶切及测序鉴定结果均表明,重组载体pSineo-cyc E1符合预期设计;PCR鉴定结果显示,稳定筛选出的6个克隆均整合有靶向周期蛋白E1基因的干涉载体。结论本研究建立了6个稳定整合有靶向细胞周期蛋白E1基因RNA干涉载体的肝癌细胞系,为肿瘤的癌基因靶向干涉治疗作了有益探索。
- 朱青川李慧忠兰风华王水良
- 关键词：RNA干涉肝细胞癌
- 福建地区汉族群体15个STR基因座遗传多态性被引量：6
- 2008年
- 曾健郑徳柱柯龙凤王水良严爱贞兰风华
- 关键词：法医物证学短串联重复序列遗传多态性等位基因频率
- RNA干扰法建立人NADH-细胞色素b5还原酶缺陷的细胞表型
- 2008年
- 目的探索经载体介导的RNA干扰法建立人NADH-细胞色素b5还原酶（EC1．6．2．2，NADH-cytochrome b5 reductase，65R）缺陷细胞系的可行性。方法设计并构建b5R的两种小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）表达载体，脂质体转染法瞬时转染BEL-7402细胞，半定量逆转录-PCR分析重组载体的干扰效应；G418筛选两种表达载体稳定转染的BEL-7402细胞，并通过稳定转染的细胞克隆在b5R mRNA水平，酶活性，酶含量等方面干扰效果的鉴定，获得b5R缺陷的细胞克隆；噻唑蓝法测定b5R缺陷细胞的生长曲线。结果获得两个靶向b5R基因的siRNA重组表达载体pSib5R-1和pSib5R-2，其中pSig5R-2瞬时转染对BEL-7402细胞b5RmRNA的抑制率达68．3％。获得18个稳定转染的细胞克隆，pSib5R-2转染的克隆中有两个克隆b5RmRNA抑制率达48．2％和56．2％，酶活性抑制率为54．6％和63．5％，酶含量也有明显降低。b5R酶缺陷没有改变细胞的生长速度。结论b5R基因的表达可被载体介导的RNA干扰有效抑制，成功建立了b5R缺陷的细胞表型，为进一步研究b5R基因的功能以及探讨Ⅱ型隐性先天性高缺血红蛋白症的发生机制提供了实验依据和材料。
- 庄岳鹏王水良兰风华
- 关键词：NADH-细胞色素B5还原酶RNA干扰小干扰RNA
- 肝组织特异表达人核受体nr5a2转基因小鼠的构建(英文)
- 2005年
- 人乙肝病毒增强子ⅡB1结合因子(hB1F)系FtzF1(NR5A)亚家族的新成员。经基因重组法将人hb1fcDNA置于小鼠白蛋白增强子/启动子序列下游构建成肝特异重组载体,通过原核显微注射将该载体导入小鼠受精卵原核,经注射且状态良好的卵回输至假孕母鼠输卵管。产下仔鼠经PCR和Southernblotting鉴定,同时RTPCR和Westernblotting分析转基因的表达。阳性Founder鼠与正常C57鼠交配以建立转基因纯系小鼠,F1代以PCR法鉴定。结果共获得4只PCR鉴定转基因阳性Founder鼠,其中一只同时经Southernblotting鉴定为阳性。RTPCR和Westernblotting结果显示,外源基因在转基因小鼠的肝组织成功表达。遗传学分析表明,转基因已整合入小鼠基因组并可稳定遗传。
- 王水良杨桦谢幼华汪垣厉建中王龙王铸钢傅继梁
- 关键词：核受体转基因小鼠
- 大鼠液压脑损伤后bcl-2和bax基因的表达分布被引量：1
- 2007年
- 目的;观察SD大鼠单侧液压脑损伤后凋亡相关基因(bcl-2,bax)在脑组织中的表达特点。方法:采用侧方液压打击颅脑损伤模型,应用免疫组化和原位杂交方法,以及计算机显微图像分析技术,观察SD大鼠脑损伤后12 b脑内bcl-2、bax蛋白和mRNA的阳性细胞分布。结果:液压打击伤后bcl-2、bax基因在损伤侧大脑皮质、海马表达明显增强,挫裂伤组织内的血肿周边bcl-2、bax基因表达亦明显增强,阳性细胞受打击能量传递的影响呈梯度分布。结论:大鼠液压脑损伤后bcl-2和bax基因的表达分布受打击能量和脑内血肿的影响,并与脑损伤后迟发性神经元死亡(delayed neuron death,DND)密切相关。
- 高进喜王水良王如密王守森郑兆聪
- 关键词：液压脑损伤BCL-2BAX免疫组化原位杂交
- 人核受体nr5a2（hblf）转基因小鼠的建立及其分析
- 核受体(nuclear receptor)是与类固醇激素受体同源的一类配体依赖性转录因子超家族；机体的生长发育、细胞分化以及体内许多生理、代谢过程都可归因于核受体与相应配体及众多辅调节因子相互作用所调控的基因网络的协调表...
- 王水良
- 文献传递
