段云兵
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 基因VⅡ型新城疫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
- 根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应...
- 仇旭升孟春春段云兵于圣青丁铲
- 关键词:新城疫病毒实时荧光定量PCR基因序列
- 文献传递
- 乳源β-酪啡肽对大鼠小肠葡萄糖吸收及血糖浓度的影响被引量:1
- 2010年
- 为了探讨主要的乳源活性肽β-酪啡肽(β-casomorphins,β-CMs)对大鼠小肠葡萄糖吸收及血糖浓度的影响,本试验从体外和体内2个方面对其进行了初步研究。体外试验利用翻转的离体小肠囊研究了浓度为0(对照组)、7.5×10-5(高剂量组)、7.5×10-6(中剂量组)、7.5×10-7mol/L(低剂量组)的β-CM7和β-CM5对离体小肠囊葡萄糖吸收的影响,同时选用阿片特异性阻断剂纳洛酮与β-CM7按物质的量比2∶1混合,探讨影响葡萄糖吸收的阿片机制。体内试验选用健康成年SD大鼠21只,随机分为对照组(灌胃生理盐水)、β-CM7组(灌胃7.5×10-6mol/Lβ-CM7)和β-CM5组(灌胃7.5×10-6mol/Lβ-CM5)。连续灌胃30d后,断颈处死,取血液、肝脏及肌肉,检测血清中葡萄糖和胰岛素含量以及体内肝糖原、肌糖原含量。体外试验结果显示,不同浓度的β-CM7和β-CM5(7.5×10-7~7.5×10-5)均能抑制离体小肠囊对葡萄糖的吸收,抑制作用的大小与浓度有关;加入纳洛酮阻断剂后没有逆转β-CM7对小肠囊葡萄糖吸收的抑制效用。体内试验结果显示,与对照组相比,试验后期β-CM7组和β-CM5组大鼠的血糖浓度和肌糖原含量均极显著降低(P<0.01),血清胰岛素含量无显著变化(P>0.05);β-CM5组的肝糖原含量极显著降低(P<0.01)。以上结果提示,β-CM7和β-CM5具有辅助降血糖作用,其降糖机制可能与肌糖原的消耗和非阿片途径抑制小肠葡萄糖的吸收有关。
- 任欢欢郝澍车超平张凡庆段云兵张源淑
- 关键词:Β-酪啡肽葡萄糖小肠吸收血糖
- 新城疫病毒M蛋白通过自身核定位信号介导进入宿主细胞核被引量:4
- 2014年
- 通过生物信息学方法预测了新城疫病毒(NDV)基质蛋白(M)的细胞核定位信号(NLS),用Overlap-PCR方法缺失NLS基因,分别构建M和M-ΔNLS EGFP重组质粒,转染单层鸡胚成纤维细胞(DF-1),激光共聚焦观察了M蛋白亚细胞定位。结果表明:M蛋白能进入宿主细胞核中,缺失NLS基因序列之后M蛋白只分布于细胞质中。结论:新城疫病毒M蛋白可以通过其核定位信号进入宿主细胞核。
- 段云兵汪军卿仇旭升谭磊丁铲张源淑
- 关键词:新城疫病毒M蛋白亚细胞定位核定位信号
- 基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
- 根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应...
- 孟春春段云兵仇旭升金仕强詹媛张向乐于圣青丁铲
- 关键词:新城疫病毒实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应基因序列
- 基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:4
- 2011年
- 根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列,并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999。检测结果显示,该方法的灵敏度可达100 copies/μL,而且特异性良好,除Ⅶ型新城疫病毒外,对Ⅱ型/Ⅲ型/IV型/Ⅸ型新城疫病毒、H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究所建立的检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%。对40份实验感染样品的检测结果表明,其检出率为95%,而常规RT-PCR方法检出率仅为70%,表明该方法比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高、特异性更强。
- 孟春春段云兵仇旭升金仕强詹媛张向乐于圣青丁铲
- 关键词:SYBR实时荧光定量RT-PCR