梁琳
- 作品数：125 被引量：186H指数：8
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 一起境外输入性牛结节性皮肤病疫情被引量：8
- 2021年
- 2020年11月,山东滨州市、东营市引进牛皮肤出现自限性皮肤结节、损伤以及结痂等症状,疑似发生牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)。为确诊两地疫情及了解病原的遗传演化关系,利用荧光定量PCR方法进行诊断,以PCR方法扩增GCPR基因并进行核苷酸比对分析和遗传演化分析。检测结果显示,采集的样品中检测到牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV),两地疫情确诊为LSD疫情。GCPR基因核苷酸比对结果显示,China/SDBinzhou/2020、China/SDDongying/2020 GCPR基因存在12个核苷酸的插入,与疫苗毒株Neethling vaccine LW 1959株、Neethling-LSD vaccine-OBP株以及俄罗斯发现的疫苗样毒株Saratov株在GCPR基因的核苷酸插入序列相同,具备疫苗样毒株的特征。系统发育分析结果表明,China/SDBinzhou/2020、China/SDDongying/2020 GCPR基因与我国新疆发现的LSDV毒株GCPR基因处同一小分支中,亲缘关系较近。同时,我国LSDV毒株与Neethling vaccine LW 1959株、Neethling-LSD vaccine-OBP株以及Saratov株等共处于一大分支中。综上,确诊滨州市、东营市两地疫情为LSD疫情,这是山东省首次确诊输入性LSD疫情。
- 刘存吕桂霞徐鸿党安坤梁琳陈静孙圣福兰邹然
- 关键词：荧光定量PCR方法外来动物疫病
- 用于检测猫泛白细胞减少症病毒的引物和探针及检测试剂盒
- 本发明提供一种用于检测猫泛白细胞减少症病毒的引物和探针及检测试剂盒。所述试剂盒中包含扩增目的基因VP2的引物对(SEQ ID NO:1‑2)以及检测目的基因的Taqman探针(SEQ ID NO:3)。本发明还提供猫泛白...
- 梁瑞英梁琳崔尚金翟志安赵静杰
- CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用被引量：5
- 2017年
- 为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或c DNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
- 刘畅刘畅刘存王静刘存梁琳王静钱爱东刘琪
- 关键词：多重PCR犬瘟热病毒犬细小病毒犬副流感病毒
- 检测犬免疫球蛋白G的夹心ELISA方法的建立
- 2016年
- 为建立犬免疫球蛋白G(Ig G)的检测方法,本研究以兔抗犬Ig G Fc段多克隆抗体为包被抗体,过氧化酶标记的兔抗犬Ig G(全分子)多克隆抗体为检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA定量检测方法,并采用Protein A方法从犬血清中纯化犬Ig G作为ELISA检测标准品。该检测方法与小鼠、兔、马、牛、鸡及羊常见动物血清均无交叉反应,特异性好;最低检测下限可以达到4.8 ng/m L,敏感性较高。以本研究建立的ELISA方法检测犬细小阳性血清和阴性血清,阳性血清Ig G含量明显高于阴性血清;检测转染犬源化抗体序列重组质粒的细胞培养液上清,重组质粒在96 h表达量达到峰值。本研究为进一步建立稳定表达犬源化抗体的细胞系提供了特异性的定量检测方法。
- 王正阳刘平黄梁琳陈建飞吕世明崔尚金
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 一种鸽Ⅰ型副黏病毒毒株及其攻毒动物模型的建立方法
- 本发明公开了一种鸽Ⅰ型副黏病毒毒株及其攻毒动物模型的建立方法，所述毒株于2023年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC NO.45761。本发明建立了接近真实的动物感染模型，...
- 侯绍华张姗丁家波梁瑞英梁琳汤新明
- 一种犬冠状病毒抗体IPMA检测试剂盒
- 本实用新型公开了一种犬冠状病毒抗体IPMA检测试剂盒，包括包装盒、酶标板、酶标管、封板覆膜，其特征在于：所述酶标板为矩形结构，酶标板上设有96或48个正方形放置槽，每行正方形放置槽的左侧标记有英文字母，每列正方形放置槽的...
- 崔尚金史利军梁琳周灵罗亚坤
- 文献传递
- 一种布鲁氏菌CTL抗原表位肽及其应用
- 本发明公开了一种布鲁氏菌CTL抗原表位肽及其应用，其为以下任一或多个表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1‑4的所示。本发明利用酶联免疫斑点技术筛选能够刺激淋巴细胞分泌IFN‑γ的优势表位多肽，筛选出功能...
- 梁瑞英丁家波汤新明梁琳蒋卉杨晓雯
- 信息化在中国畜牧兽医科研上的应用实例
- 信息化越来越多地走入生活，在中国畜牧兽医业发展中也越来越多地被应用。将信息化与分子生物学技术、大数据技术等结合起来。利用信息化技术，可以从网上得到世界各地的全基因组序列，结合现代分子生物学技术、信息学分析技术、分子钟技术...
- 梁琳赵艳丽罗亚坤崔尚金
- 关键词：互联网信息化畜牧业动物疫病病毒
- 犬细小病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用被引量：8
- 2019年
- 为建立灵敏、快速的犬细小病毒(CPV)检测方法,本研究针对CPVVP2基因保守序列设计一对能扩增574bp片段的特异性引物,对纳米PCR的退火温度、引物浓度等反应条件进行了优化,并对其特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,所建立的纳米PCR特异性和灵敏性良好,最低核酸检出量为2拷贝·μL^-1,其敏感性比常规PCR高1000倍。分别采用纳米PCR和常规PCR,对广西、北京、吉林送检的75份疑似CPV的临床样品进行检测,CPV阳性率分别为89.3%(67/75)和70.7%(53/75),表明该方法具有更高的敏感性,适用于CPV低含量临床样品的检测。本方法的建立为CPV感染的早期快速、灵敏、准确的诊断提供了新方法,为CPV的防控奠定基础,具有重大的临床应用意义和价值。
- 秦彤周灵周灵梁琳史利军梁琳李金祥史利军
- 关键词：犬细小病毒VP2基因
- 一种犬冠状病毒分离检测试剂盒
- 本实用新型公开了一种犬冠状病毒分离检测试剂盒，包括框体、固定板、弹簧支杆、限位板、试剂管、缓冲座，固定板设置在框体上方，固定板的内部卡扣连接有密封盖，密封盖下端中部开设有放置腔，弹簧支杆对称贯穿设置在框体的左右两侧，弹簧...
- 梁琳梁瑞英崔尚金秦彤
