杨鸣 作品数:12 被引量:23 H指数:3 供职机构: 重庆医科大学附属儿童医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 建筑科学 更多>>
60%氧暴露对早产鼠AECⅡ增殖的影响及CGRP的干预作用 2009年 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对60%氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)生长增殖的影响。方法原代分离培养孕19d早产鼠AECⅡ,随机分为4组:空气组、高氧组、高氧CGRP组、高氧CGRP拮抗剂组。空气组和高氧组分别在氧体积分数为21%的空气和60%的氧气中暴露24h;高氧CGRP组在暴露前加入CGRP,高氧CGRP拮抗剂组在暴露前同时加入CGRP和CGRP受体拮抗剂,再置于氧体积分数为60%的氧气中培养24h。采用MTT比色法和流式细胞术测定细胞增殖能力和细胞周期,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光技术测定表面活性蛋白C(SPC)的mRNA及蛋白表达。结果与空气组比较,高氧组细胞存活率下降,G0/G1期细胞比例增高,G2/M及S期细胞比例降低,SPC mRNA及SPC蛋白表达低下(P均<0.01)。而CGRP干预可促进高氧暴露AECⅡ的增殖能力,使S及G2/M期细胞增多,并提高AECⅡ的SPC mRNA及SPC蛋白表达水平。结论60%氧暴露24h可抑制早产鼠AECⅡ增殖,而CGRP可促进AECⅡ增殖,部分解除高氧对AECⅡ的抑制作用。 匡凤梧 刘成军 许峰 方芳 黄波 黄栋 杨鸣 付红敏关键词:高氧 降钙素基因相关肽 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离及原代培养 被引量:9 2009年 目的:探讨胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar epithelial cell typeⅡ,AECⅡ)的分离、纯化及原代培养方法,为有关胎儿肺发育及新生儿肺部疾病的研究奠定基础。方法:采用胰酶结合胶原酶的消化方法,分离肺组织细胞成份,然后经差速离心和差速贴壁的方法纯化AECⅡ,进行原代培养;通过台盼蓝染色检测细胞活力,倒置相差显微镜观察细胞生长特点及形态特征,透射电镜鉴定,改良巴氏染色检测细胞纯度以及免疫荧光技术检测表面蛋白C(Surfactant proteinc,SPC)的表达。结果:每3~5只胎鼠可获得AECⅡ(36±5)×106,活力98%±2%。镜下观察原代AECⅡ呈岛状生长,外观呈多边形或立方形。透射电镜可见特征性的板层小体,改良巴氏染色见胞质内有较多颗粒,纯度为96%±3%,呈现SPC绿色免疫荧光的细胞占96%以上。结论:利用胰酶和胶原酶消化,以及差速离心和差速贴壁的方法可成功分离出高产量、高纯度的胎鼠AECⅡ,能满足体外进一步实验的需要。 付红敏 许峰 黄波 杨鸣 符跃强 方芳 匡凤梧关键词:胎鼠 原代培养 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离及原代培养 探讨胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的分离、纯化及原代培养方法,为有关胎儿肺发育及新生儿肺部疾病的研究奠定基础.采用胰酶结合胶原酶的消化方法,分离肺组织细胞成份,然后经差速离心和差速贴壁的方法纯化AECⅡ,进行原代培养;... 付红敏 许峰 黄波 杨鸣 符跃强 方芳 匡凤梧高氧对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响及神经肽P物质的保护作用 被引量:3 2008年 目的探讨高氧对离体培养的早产大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡ alveolar epithelial cells, AECⅡ)的影响及感觉神经肽P物质(substance P,SP)的保护作用。方法①分离纯化原代早产鼠AECⅡ18只,随机分为:空气暴露组、高氧暴露组、SP干预空气暴露组、SP干预高氧暴露组(n=36)。空气暴露组氧体积分数为0.21(21%),高氧暴露组氧体积分数为0.95(95%),SP干预组于暴露前加入SP 1×10-6mol/L,在置于氧体积分数为0.21(21%)和0.95(95%)中各组分别暴露12、24、48h,电镜观察AECⅡ的形态变化。XTT法及流式细胞仪测定其增殖率和凋亡率。②剖宫取出SD大鼠孕21d(足月为22 d)早产鼠(n=36),随机分为空气暴露组和高氧暴露组(n=18)。空气暴露组氧体积分数为0.21(21%),高氧暴露组氧体积分数为0.95(95%),分别于暴露3、7、14d后,取肺组织测定其SP含量。结果与空气暴露组比较,高氧组暴露12、24、48h后AECⅡ增殖率明显降低,凋亡率明显增加,而SP干预后其增殖率明显增加,凋亡率明显下降,AECⅡ形态学也有明显的改善。高氧暴露3、7、14d与空气暴露组比较肺组织SP含量显著降低,且随高氧暴露的延长,SP含量降低明显。结论 P物质可促进AECⅡ的增殖并抑制AECⅡ的凋亡,在高氧暴露下对AECⅡ可起到保护作用,高氧暴露可导致肺组织SP含量的变化。 黄波 付红敏 杨鸣 方芳 匡凤梧 许峰关键词:P物质 高氧 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离及原代培养 目的 探讨胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC Ⅱ)的分离、纯化及原代培养方法,为有关胎儿肺发育及新生儿肺部疾病的研究奠定基础。方法 采用胰酶结合胶原酶的消化方法,分离肺组织细胞成份,然后经差速离心和差速贴壁的方法纯化AEC Ⅱ... 付红敏 许峰 黄波 杨鸣 符跃强 方芳 匡凤梧关键词:胎鼠 原代培养 58例新生儿先天性膈疝围术期监护 被引量:3 2017年 目的总结该院6年先天性膈疝(CDH)的围术期监护经验。方法收集该院2010年1月至2016年4月共58例新生儿CDH的临床病例资料进行回顾性分析,根据患儿诊断后是否进行手术治疗,分为治疗组(39例)和放弃组(19例);根据出生后6h内是否出现呼吸窘迫症状,将治疗组分为重症A组(29例)及非重症B组(10例)。结果手术距入院时间A组(38.07±18.78)h,B组(21.10±5.46)h,ICU监护时间中位数A组5(2.00,9.50)d、B组2(1.00,2.25)d,差异均有统计学意义(P<0.05);术后机械通气时间中位数A组34(19.5,42.5)h、B组23(16.5,39.5)h,平均住院时间A组(16.76±5.99)d、B组(15.40±2.17)d,差异均无统计学意义(P>0.05);放弃组19例,均于入院后3d内放弃治疗,院内死亡5例。治疗组39例无一例死亡。结论 CDH是新生儿危重症之一,加强围术期监护是提高CDH生存率的关键。 杨鸣 白科 符跃强 党红星 刘成军 方芳关键词:先天性 围术期 监护 高氧对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响及神经肽P物质的保护作用 氧疗是抢救早产儿呼吸衰竭最常用的措施,然而未成熟肺长时间暴露于高氧下可导致急慢性肺损伤,甚至发生肺纤维样变。Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)是肺组织中的重要细胞,在肺泡受到损伤时能转化为肺泡Ⅰ型上皮细胞修复受损肺泡;神经肽P... 黄波 付红敏 杨鸣 方芳 匡凤梧 许峰关键词:早产儿 呼吸衰竭 神经肽P物质 肺损伤 文献传递 神经肽P物质促进高氧诱导的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化 2009年 目的探讨感觉神经肽P物质(substance P,SP)对高氧诱导的胎鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(type II alveolar epithelialcells,AECⅡ)转分化的影响。方法剖宫取出孕2l d(足月为22d)SD胎鼠,分离纯化原代培养AECⅡ,采用随机分组法分为:空气暴露组(氧体积分数为0.21)、高氧暴露组(氧体积分数为0.95)、SP干预组,SP干预组于暴露前加入SP1×10-6mol/L,在置于氧体积分数为0.21和0.95中分别暴露12、24、和48h,电镜观察AECⅡ的形态变化;免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测AECII特异性肺泡表而活性蛋白-C(surfactant protein C,SP-C)及I型肺泡上皮细胞(type I alveolar epithelial cells,AECI)特异性水通道蛋5(aquaporin5,AQP5)的表达。结果与空气组比较,高氧暴露后,AECⅡSP-C的表达、SP-C细胞的表达率及荧光指数(flu-orescence index,FI)明显降低,AQP5表达明显增加;而SP干预后,SP-C、AQP5表达都明显增加,形态学的损伤也有明显的改善。结论SP可促进高氧诱导的胎鼠AECⅡ的转分化,在肺损伤修复中可能起重要作用。 黄波 付红敏 杨鸣 方芳 匡凤梧 许峰关键词:高氧 转分化 Ⅲ期手足口病预后的危险因素分析 被引量:1 2018年 目的:探讨影响儿童Ⅲ期手足口病预后的危险因素。方法:回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院重症医学科2011年1月至2015年12月收治的90例Ⅲ期手足口病患儿的临床资料。根据临床结局将患儿分为死亡组和存活组,比较两组患儿在临床症状体征、辅助检查结果方面的差异,选择单因素分析有统计学意义的指标,采用非条件Logistic回归分析影响Ⅲ期手足口病患儿预后的独立危险因素。结果:死亡组和存活组性别、发病时间、入院时小儿危重病例评分(PCIS)、白细胞计数、血小板计数、血糖峰值、乳酸、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、最大心率以及肺水肿、呼吸衰竭、循环衰竭、入院时昏迷发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素非条件Logistic回归分析结果显示,循环衰竭[OR=9.785,95%CI(2.457,38.959)]、乳酸水平[OR=1.310,95%CI(1.022,1.681)]、白细胞计数[OR=1.156,95%CI(1.025,1.303)]、入院时PCIS[OR=0.866,95%CI(0.783,0.957)]是Ⅲ期手足口病患儿预后的独立危险因素。结论:有循环障碍、血乳酸水平、白细胞计数升高及入院时PCIS低提示Ⅲ期手足口病患儿预后不良。 唐丽 刘亚军 杨鸣 刘成军 许峰关键词:手足口病 预后 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离及原代培养 付红敏 许峰 黄波 杨鸣 符跃强 方芳 匡凤梧