杨坤宇
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：厦门大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省重大科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 预防与控制输入性疟疾的关键技术探讨
- 目的 预防与控制输入性疟疾病例的发生,减少疟疾对人体健康的危害,尽快实现我国疟疾防控目标.方法 对2005-2012年全国输入性疟疾疫情分析.结果 我国疟疾防治成效显著,全国疟疾病例数由2005年的39656例减为201...
- 熊焕昌杨坤宇杨苹薛永磊
- 关键词：输入性疟疾
- 流感广谱表位的发现及流感抗原免疫诊断试剂的研制与应用
- 陈毅歆杨坤宇邱子欣袁权葛胜祥乔杉徐飞海夏宁邵沈晨光郑清炳
- 流感是流感病毒引起的急性呼吸道传染病，每年造成全球2-5百万重症病例和25-50万死亡病例，严重危害人类健康和经济社会稳定。危害人类的主要有人流感(H1N1、H3N2和H1N1pdm09和乙型流感)和禽流感(H5N1和H...
- 关键词：
- 关键词：流感急性呼吸道传染病
- HIV-1 gp160截短蛋白在酿酒酵母中的表达被引量：1
- 2011年
- 利用PCR技术从pNL-43上扩增出截短的编码gp160蛋白的基因片断,克隆到酿酒酵母表达载体YEpFLAG-1上构建表达质粒YEp-gp160Δ12,电转化到酿酒酵母中,用缺色氨酸的SC培养基筛选出阳性克隆,重组子经YP培养基诱导后进行全菌蛋白的SDS-PAGE和Western Blotting分析,筛选出高表达菌株.纯化后的重组gp160Δ12(rgp160Δ12)蛋白经ELISA鉴定显示具有良好的生物活性.
- 杨坤宇李少伟张毅李庶甘何芳萍林庆山周正张军夏宁邵
- 关键词：酿酒酵母
- 毕赤酵母分泌表达嵌合HEV表位的HBcAg颗粒
- 2009年
- 在毕赤酵母分泌表达嵌合有HEV受体相关表位12A10的HBcAg蛋白,经甲醇诱导后的培养液上清通过切向流浓缩、更换缓冲液后,进行疏水层析纯化.CsCl等密度梯度离心测得分泌的重组颗粒的密度为1.32 g/mL.透射电镜观察显示,纯化的重组颗粒为均一的直径30 nm左右的空心颗粒.小鼠免疫实验表明,纯化颗粒免疫8周后鼠血清中的特异性12A10抗体滴度可达到1.6×105,并且重组颗粒较好地呈递了HEV受体相关的非免疫优势表位.本文的结果为毕赤酵母胞外分泌表达其它大尺度的重组蛋白颗粒提供了参考,为研究携带表位多肽的疫苗载体提供了范例.
- 章建楠李少伟杨坤宇何芳萍唐明顾颖王颖彬杜海莲张军夏宁邵
- 关键词：乙肝病毒核心抗原毕赤酵母分泌表达
- Serological survey of antibodies to influenza A viruses on a group of people without a history of influenza vaccination
- A serological survey for antibodies to influenza viruses was performed in China on a group of people without a...
- 杨坤宇
- 关键词：INFLUENZAANTIBODYH9N2
- 文献传递
- 重组毕赤酵母高密度发酵表达H5N1禽流感病毒糖蛋白被引量：4
- 2009年
- 在10L发酵罐中,对高致病性禽流感病毒H5N1糖蛋白HA1在重组毕赤酵母中的表达发酵工艺进行了研究。通过分批补料培养方法探讨不同培养温度、诱导温度、补料方式、微量元素等因素对菌体的生长以及重组蛋白表达和活性的影响。结果表明,菌种培养和诱导温度均为25oC时,菌体的生长、分泌表达量和与广谱中和抗体的反应活性较好;微量元素是影响重组HA1蛋白生物活性的重要因素;通过优化高密度发酵工艺,H5N1病毒糖蛋白HA1在发酵罐中的表达量比摇瓶培养提高10.5倍,达到约120mg/L,为大规模制备高致病性禽流感病毒的HA1蛋白奠定了基础。
- 杨坤宇何芳萍李少伟张佳鸿林庆山陈振钦李仲艺张军夏宁邵
- 关键词：毕赤酵母高致病性禽流感病毒H5N1HA1
- 高致病性H5N1禽流感病毒HA1蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达及性质研究
- 高致病性禽流感病毒H5N1的爆发不仅给全世界养禽业造成了毁灭性打击,也严重危害到人类的生命安全,开发一种安全有效且广谱的疫苗是控制禽流感病毒传播的最有效的手段。毕赤酵母具有分子遗传操作简单、外源蛋白表达水平高、具有近似于...
- 杨坤宇
- 关键词：H5N1HA1毕赤酵母分泌表达
- 文献传递
- 重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白工程菌的高密度培养被引量：7
- 2004年
- 在 10L发酵罐中对戊型肝炎病毒衣壳蛋白在重组大肠杆菌中表达发酵工艺进行了研究 ,用分批培养方法探讨了不同培养基、培养基中磷酸盐浓度和Mg2 + 浓度等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响 ;用分批补料培养研究了不同的补料工艺对菌体生长与重组蛋白表达的影响 ,同时对重组菌诱导时期、诱导持续时间以及不同诱导温度表达包含体在尿素溶液中的溶解性进行了研究。结果表明 ,在优化后的培养基中 ,磷酸盐浓度、Mg2 + 浓度分别为 80mmol L与 2 0mmol L时菌体生长与表达效果较好 ;分批补料培养中 ,37℃培养 9h菌体达到对数期中期 (约 4 5OD6 0 0 )为适宜诱导时期 ,加入终浓度为 1 0mmol LIPTG后诱导 5h ,OD6 0 0 达到 80以上 ,重组蛋白表达量达到2 9 74 % ,为最适收获菌体时间 ;37℃表达的包含体 80 %以上溶解在 4mol L的尿素溶液中 ,最终浓度达到 14mg mL ;10L发酵罐中确定的发酵工艺参数在 30L发酵罐中进行了放大培养 ,10L发酵罐中确定的发酵工艺参数在 30L发酵罐上具有可放大性与重复性 ,可以应用于工业生产。
- 刘如石何志强李少伟杨坤宇鲜阳凌逄淑强张军李益民夏宁邵
- 关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白重组大肠杆菌
- 手足口病系列免疫诊断试剂的研究与应用
- 葛胜祥徐飞海陈毅歆牛建军何水珍杨坤宇乔杉程通夏宁邵张军
- 手足口病是儿童常见病，多种肠道病毒均可引起。其中肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CA16）最为常见，而EV71导致的手足口病较常引起中枢神经系统损伤，重症患者比例及病死率均明显高于其他肠道病毒。一直以来，...
- 关键词：
- 关键词：手足口病流行病学调查
- 红色荧光蛋白在毕赤酵母中的高效表达被引量：3
- 2005年
- 报道了红色荧光蛋白(DsRFP)在毕赤酵母中的高水平表达.利用PCR技术从YEpFLAG- 1 -DsRFP扩增出DsRFP编码序列,克隆到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3. 5K构建重组表达载体pPIC3. 5K- DsRFP,电击转化进毕赤酵母,G418 RDB平板双重筛选后获得重组转化子,经MM/MD平板培养与PCR鉴定,重组子全部为HIS+MUT+表型.重组菌株诱导表达48h后获得了高效表达,摇瓶中表达水平达到细胞内总蛋白的12%,表达量达到1. 8g/L.经硫酸铵分级沉淀,DEAE- 5PW阴离子交换柱层析与S- HyperD阳离子交换柱层析后获得电泳纯蛋白.说明我们建立的毕赤酵母表达应用平台具有高效表达外源蛋白的能力.
- 杨坤宇刘如石林鉴张智洪张军夏宁邵
- 关键词：红色荧光蛋白毕赤酵母PCR鉴定电击转化酵母表达重组子
