李海涛
- 作品数：61 被引量：125H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 布氏杆菌L7/L12和OMP31基因克隆及融合表达被引量：2
- 2010年
- 本研究根据已经发表的布氏杆菌基因序列,选择种间序列极为保守的保护性抗原L7/L12、OMP31基因,依此进行PCR扩增,利用引物上设计好的限制性内切酶酶切位点进行基因重组,构建了PME290-SDLOmp高效表达载体,并转化绿脓杆菌(PAK/2pfs),通过培养得到了表达产物,对表达产物进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定,结果符合预期。本项研究为进一步开展布氏杆菌亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 李海涛苗利光张广雷刘艳环孙金霞王松王文昊
- 关键词：布氏杆菌基因重组表达载体构建融合蛋白
- MSL抗菌肽对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜的损伤作用研究被引量：2
- 2015年
- 通过MSL抗菌肽(MSL)对细菌细胞膜的损伤作用研究,确定该抗菌肽的作用靶点。在1×108个/m L的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌悬液中,分别加入MSL至终浓度为1×MIC,37℃保温孵育,分别于0min、10min、20min、30min、40min、50min、60min、120min、180min、240min离心收集上清液,检测各时间点蛋白浓度,分析蛋白浓度变化规律;分别在对数生长期的金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌悬液中加入MSL至终浓度为1×MIC,37℃保温孵育60min后,利用透射电镜观察分析细菌结构的变化。结果,MSL与2种细菌接触后均可引发胞液外流;透射电镜观察发现,MSL可造成绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜破损,胞浆内电子密度降低,染色质聚集,严重者细胞崩解结构不清,说明MSL对G+和G-细菌细胞膜均可造成损伤,证明细菌细胞膜是MSL作用的靶点之一。
- 刘艳环李海涛朱言柱张润祥肖佳美苗利光
- 关键词：抗菌肽绿脓杆菌金黄色葡萄球菌
- 鹿源牛分支杆菌ESAT-6/Ag85B/Mtb8.4基因与牛IL-2基因融合免疫原性研究
- 本研究拟制备牛IL-2与鹿源牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因的融合蛋白。从患结核病鹿的肺组织中粗分离牛分支杆菌并提取基因组DNA,PCR扩增牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;提取牛...
- 李海涛苗利光刘艳环李庆超孙金霞
- 关键词：牛分支杆菌
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒反转录及3'-末端克隆测序方法研究被引量：2
- 2010年
- 牛病毒性腹泻病毒为黄病毒科瘟病毒属代表种,其基因组为单股正链RNA,无Poly(A)尾。传统的3'-末端快速扩增方法不适用于牛病毒性腹泻病毒的3'-末端克隆测序。本研究根据牛病毒性腹泻病毒基因组3'-末端共有特征碱基,设计回文锚定引物CGend。以BVDVJZ05-1毒株为研究对象,进行了反转录及3'-末端克隆测序。结果表明,CGend的反转录效果优于随机引物和一般特异性下游引物,并且扩增得到了JZ05-1的3'-末端完整序列。本研究为瘟病毒属病毒反转录和3'-末端克隆测序提供了新思路。
- 李庆超苗利光李海涛刘艳环张广雷庄风岐
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒瘟病毒反转录
- 重组抗菌肽LfcinB/LfampinB基因的克隆及表达载体的构建
- 2010年
- 根据GeneBank中提供的牛乳铁蛋白基因序列,设计并合成了重组LfcinB/LfampinB基因,并通过PGEM-Teasy载体扩增。酶切回收的LfcinB/LfampinB片段与中间载体pP6连接。pP6上的启动子、信号肽和调控序列与LfcinB/LfampinB共同切下,获得具有上游调控元件的PLfc/Lfa基因片段。将PLfc/Lfa与pME290表达载体连接,并转化绿脓杆菌。结果表明,本试验成功构建了重组pPLfc/Lfa表达载体。
- 孙金霞刘艳环李海涛李庆超张广雷苗利光
- 关键词：抗菌肽克隆
- 牛传染性鼻气管炎病毒JZ06-8株犊牛感染模型的建立被引量：6
- 2015年
- 为建立IBRV对犊牛的感染模型,将试验组第1组~3组犊牛通过鼻腔内喷雾接种4mL/头,病毒含量分别为107.0 TCID50/mL、106.0 TCID50/mL和105.0 TCID50/mL的IBRV/JZ06-8,阴性对照组同样方法接种MDBK细胞冻融物;攻毒后第0天~第14天,每天测定直肠温度,进行临床观察,采集鼻拭子进行病毒分离鉴定。结果显示,鼻内喷雾接种对犊牛可产生有效感染,106.0 TCID50/mL的感染剂量即可致犊牛产生典型的IBR临床症状,并可分离到IBRV。试验成功实现IBRV/JZ06-8对犊牛的感染,该模型可用于IBRV研究和IBR疫苗评价。
- 李海涛苗利光朱言柱肖佳美刘艳环
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光定量PCR
- 一种低分子量骆驼乳源重组抗菌肽rccP及其制备方法和在水貂饲料中的应用
- 本发明属于饲料研究技术领域，尤其涉及一种低分子量骆驼乳源重组抗菌肽rccP及其制备方法和在水貂饲料中的应用。本发明公开了一种低分子量骆驼乳源重组抗菌肽rccP，所述的抗菌肽rccP的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示...
- 李海涛
- 牛病毒性腹泻病二价弱毒活疫苗制备工艺研究被引量：3
- 2013年
- 研究了BVDV2/JZ05-1和BVDV1/JZ05-3二价弱毒活疫苗的制备工艺。通过对BVDV2/JZ05-1和BVDV1/JZ05-3疫苗毒传代培养测定毒价后,试制出5批毒价分别是105.4TCID50/mL和105.6TCID50/mL的BVDV二价弱毒活疫苗,经检验符合试验设计要求。
- 李海涛苗利光刘艳环朱言柱安亚雄王坤冯卓
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒活疫苗
- 东北山葡萄酿酒酵母的分离与鉴定被引量：1
- 2019年
- 为了选育优良的饲料原料产品酿酒酵母菌种,本试验采集了酿酒品质良好的山葡萄和山葡萄园土壤样本,通过分离优化、菌种生理生化鉴定和分子生物学鉴定方法,对分离出的天然酵母菌种进行了种属鉴定。结果表明,成功分离出18株酵母菌,其中有酿酒酵母12株、发酵毕赤酵母3株、乳酸克鲁维酵母3株,为进一步对酿酒酵母特性研究奠定了基础。
- 李海涛刘艳环刘艳环苗利光
- 关键词：酿酒酵母糖发酵分子生物学鉴定
- MSL抗菌肽对鸡白痢的预防作用被引量：7
- 2013年
- 取4日龄雏鸡50只,随机分成5组。阴性对照组正常日粮;阳性对照组第1d日粮中添加鸡白痢沙门氏菌,菌数平均为4×107个/只,以后正常饲喂;实验组第1天日粮中加入鸡白痢沙门氏菌,菌数平均为4×107个/只,之后加入不同剂量MSL抗菌肽,第2天开始每天只加入MSL抗菌肽,连加4d,以后正常饲喂。试验共进行13d,每天观察雏鸡临床表现,剖检病死雏鸡。结果表明,MSL抗菌肽不仅对鸡白痢有较好的预防作用,而且可明显促进雏鸡的生长。
- 钟宏鹏刘艳环朱言柱李海涛冯卓王坤苗利光
- 关键词：抗菌肽鸡白痢沙门氏菌鸡白痢
