李晓波
- 作品数：100 被引量：160H指数：8
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划北京市科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 裸鼹鼠小鼠肝炎病毒实时荧光定量PCR方法的建立及应用
- 目的建立小鼠肝炎病毒(MHV)实时荧光定量PCR检测方法,应用于实验裸鼹鼠小鼠、地鼠、黄鼠等实验动物携带MHV的检测。方法选择MHV E基因保守区域设计合成特异性引物和探针建立荧光定量PCR方法,并对方法特异性、敏感性、...
- 王吉王莎莎付瑞王淑菁李威秦骁黄宗文李晓波巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词：小鼠肝炎病毒
- 文献传递
- 猫细小病毒PCR检测方法的建立及初步应用被引量：5
- 2015年
- 目的建立猫细小病毒PCR检测方法,应用于猫临床样本中FPV的快速检测。方法根据已发表的FPVVP2基因序列设计合成引物,并以此建立FPV的PCR检测方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。用建立的方法对33份猫临床样品进行检测。结果建立的FPVPCR检测方法与猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)、猫冠状病毒(FeCV)、猫合胞体病毒(FeSFV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为5lgTCID50/mL,相应的DNA模板浓度为4.9×102拷贝/μL;FPVDNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带。应用该方法从33份猫临床样本中检测出21份FPV核酸阳性。结论建立的FPVPCR检测方法具有特异、敏感及稳定的特点,适合于临床FPV的感染检测。
- 王吉付瑞卫礼李晓波王淑菁巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词：猫细小病毒聚合酶链式反应
- 动物组织提取制品的病毒去除/灭活工艺验证的研究
- 目的：对糜蛋白酶、玻璃酸酶、硫酸鱼精蛋白三种动物组织提取生物制品进行病毒去除/灭活工艺验证.方法：选择非脂包膜病毒(PPV、EMCV)进行病毒去除工艺验证,选择脂包膜病毒(X-Mulv、PRV)进行病毒灭活工艺验证.结果...
- 王淑菁付瑞巩薇李晓波王吉卫礼岳秉飞贺争鸣
- 关键词：抗病毒药物动物组织生物制品病毒灭活安全性
- 文献传递
- 牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)荧光定量PCR方法的建立及在牛源制品检测中的应用
- 目的 建立牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)实时荧光定量PCR 检测方法，用于牛源性样本中BHV-1 的快速检测。方法 根据已发表的BHV-1 gB 基因设计特异引物和TaqMan 探针，建立BHV-1 实时荧光定量PCR 方...
- 王吉付瑞李晓波王淑菁王莎莎李威秦骁黄宗文巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 小鼠肝炎病毒实时荧光定量PCR方法的建立及在部分啮齿类动物的应用被引量：5
- 2020年
- 目的建立小鼠肝炎病毒(MHV)实时荧光定量PCR检测方法,并初步应用于实验裸鼹鼠等啮齿类动物的检测。方法选择MHV E基因保守区域设计合成特异性引物和探针,建立荧光定量PCR方法,并对方法特异度、敏感度、线性、重复性和稳定性进行方法学验证。同时用建立的方法对79只清洁级小鼠、35只SPF小鼠、63只裸鼹鼠、10只长爪沙鼠、20只金黄仓鼠和4只黄鼠进行MHV检测。结果成功建立了MHV实时荧光定量PCR方法;方法的线性范围为(1×10~1~1×10~9)拷贝/μL,与仙台(SV)病毒、呼肠孤病毒3型(Reo3)、小鼠肺炎病毒(PVM)、牛冠状病毒(BCV)均无交叉反应,方法的检测敏感度为10拷贝/μL。重复性和稳定性试验显示实验间变异系数均小于5%。检测结果显示63只裸鼹鼠、35只SPF小鼠、10只长爪沙鼠、20只金黄仓鼠和4只黄鼠均为阴性。79只清洁级小鼠MHV阳性率为22.78%。建立的方法与RT-PCR比较,可信度达97.47%。结论建立的MHV荧光定量PCR方法特异、敏感,能够对多种啮齿类动物体内携带的MHV进行检测。
- 王吉王莎莎付瑞王淑菁李威秦骁黄宗文李晓波巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词：小鼠肝炎病毒啮齿类动物
- 猴副流感病毒5型实时荧光定量PCR方法的建立与初步应用被引量：2
- 2013年
- 目的建立猴副流感病毒5型（SV5）实时荧光定量PCR方法，并初步应用于猴样本检测。方法根据SV5病毒NP基因保守片段设计特异引物和TaqMan探针，使用分子生物学方法制备质粒标准品，建立SV5实时荧光定量PCR方法；对该方法的线性、敏感性、特异性及稳定性进行测定；并使用该方法对24个猴样品进行检测。结果成功建立SV5实时荧光定量PCR方法；该方法线性范围为（6．8×10^9～6．8×10^5）copy／μL，灵敏度为6．8copy／μL，批内变异系数（CV）为0．63％～8．71％，批间CV为1．52％-12．38％，而且方法特异性好；在24个猴肺样品中未检测出阳性。结论该方法的建立为实验动物和动物源性生物制品中SV5的定量检测奠定了基础。
- 冯育芳李晓波邢进付瑞王吉卫礼岳秉飞贺争鸣
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 流感疫苗主种子批毒种中外源性禽腺病毒Ⅲ型荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：1
- 2016年
- 目的建立流感疫苗主种子批毒种中外源性禽腺病毒Ⅲ型(egg drop syndrome virus,EDSV)的荧光定量PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法针对EDSV六邻体蛋白保守区分别设计引物和探针,建立荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的线性、特异性、精密性、灵敏度及可行性。采用新建立的荧光定量PCR法对16株流感疫苗主种子批毒种进行外源性EDSV检测。结果该方法的最佳线性范围为1×10~4~1×10~9 copies/μl,回归曲线为y=-3.385 x+39.616,R^2>0.99;与其他种属的腺病毒及流感病毒间均无交叉反应;试验内和试验间Ct值的变异系数(CV)均<2%;灵敏度为101 copies/μl;该方法检测P0代样品的最低检测限为10-6掺入体积比例,血清学方法检测P0~P3代样品的最低检测限为10^(-2)~10^(-3)掺入体积比例。该方法检测16株流感毒种中外源性EDSV的结果均为阴性,与血清学方法检测结果一致。结论成功建立了检测EDSV的荧光定量PCR法,提高了检测灵敏度和检测效率,更好地满足了流感疫苗应急检验中快检的要求。
- 王淑菁付瑞李晓波王吉卫礼贺争鸣岳秉飞
- 关键词：流感疫苗毒种
- 长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用
- 目的建立长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛炎病毒(LCMV)抗体ELISA检测方法,应用于长爪沙鼠携带LCMV的检测。方法培养Vero细胞,接种LCMV毒种,制备Vero正常抗原和LCMV特异抗原,滴定酶结合物、正常抗原及特异抗原最...
- 王吉卫礼付瑞李晓波王淑菁邢进冯育芳巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词：ELISA长爪沙鼠
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用
- 目的建立用于牛源样本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BVDV1型和BVDV2型包含5′UTR区高保守区域基因作为靶基因,分别设计合成引物,建立双重BVDVRT-PCR方法,并对方法...
- 王吉付瑞李晓波王淑菁王莎莎李威秦骁巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒聚合酶链式反应
- 文献传递
- 猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用
- 目的 建立猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)实时荧光定量PCR检测方法,应用于实验用猫及临床患猫FHV-1的快速检测.方法 根据已发表的FHV-1 TK基因序列设计特异引物和TaqMan探针,使用分子生物学方法制备质粒标准品,...
- 王吉卫礼付瑞李晓波王淑菁巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词：实时荧光定量PCR
