李昕 作品数:105 被引量:206 H指数:7 供职机构: 首都医科大学宣武医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
一种外周血Hb-Aβ复合物定量检测试剂盒、检测方法及应用 本发明涉及一种外周血Hb‑Aβ复合物定量检测试剂盒、检测方法及应用,本发明所述方法包括,将Protein G或链霉亲和素(Streptavidin,SA)固定在固相载体上,随后加入抗Hb抗体(AHb)或生物素化抗Hb抗体... 于顺 李鹏杰 李昕 蔡燕宁14-3-3ζ蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用 2009年 为了探讨14-3-3ζ蛋白在中枢神经系统内的分布,本文采用纯化的基因重组型14-3-3ζ蛋白免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备抗14-3-3ζ蛋白单克隆抗体;Western blot及免疫组织化学法鉴定抗体。结果显示:制备的单克隆抗体能特异性识别基因重组14-3-3ζ蛋白和大鼠脑匀浆32kD蛋白。免疫组化染色结果显示,14-3-3ζ蛋白在大鼠中枢神经系统广泛分布,在皮层、海马、杏仁核和基底前脑的免疫阳性染色较强,免疫阳性产物位于神经元胞浆内。本研究结果提示,14-3-3ζ蛋白可能具有多样化的生理功能。 董长松 李尧华 叶懿文 李昕 于顺 杨慧 陈彪关键词:单克隆抗体 中枢神经系统 弱阳离子交换纳米磁珠介导的帕金森病血清蛋白质组学的初步研究 被引量:4 2009年 目的探讨帕金森病(PD)患者血清蛋白质组学特征,筛选PD特征性生物标志物。方法选择原发性PD患者61例、其他神经变性病(OND)患者29例和健康人30名,用弱阳离子交换(WCX)纳米磁珠捕获血清蛋白质组分,用MALDI-TOF—MS(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometer)检测各样品的蛋白质质谱,用BiomarkerWizard3.1和BiomarkerPattemsSoftwareVersion5.0软件进行数据分析,筛选差异分子并建立PD诊断模型。用盲法验证此模型。结果在PD组和对照组之间筛查到17个差异分子(非参数检验z值范围为-4.039~-2.633,P〈0.01)。以5个质荷比(M/Z)分别为6121、5234、2961、4309、8170的分子建立了PD的诊断模型,其敏感度和特异度分别为98.4%和83.1%。对40例新样本的盲法验证结果显示,该模型对PD患者的诊断敏感度为85.0%,特异度为70.0%,正确率为77.5%。结论采用WCX纳米磁珠与MALDI-TOF—MS联用的技术,可以得到PD特征性血清蛋白质/肽指纹图谱并能够建立敏感度和特异度均较高的PD诊断模型。此模型可以较准确区分PD和健康人,但尚不能准确地区分PD和OND,今后还需进一步研究探讨。 王坚 李尧华 郑晓立 张燕莉 李昕 于顺 何欣 陈彪关键词:帕金森病 蛋白质组学 生物学标记 离子交换 一种检测受实验者体液体外促进疾病相关蛋白聚合能力的方法 本发明涉及一种检测α-突触核蛋白在血浆中的寡聚体形成率的方法,该方法包括将纯化的重组人α-突触核蛋白与血浆在一定温度下振荡孵育使其聚合成寡聚体,用ELISA方法测定α-突触核蛋白寡聚体含量,通过寡聚体占总α-突触核蛋白含... 于顺 尹娜 杨巍巍 李昕文献传递 α-突触核蛋白与血红蛋白复合物的形成可致线粒体中血红蛋白减低 2016年 目的比较不同年龄段食蟹猴中α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)与脑血红蛋白(neuronal hemoglobin,n Hb)复合物在不同亚细胞中的形成。方法免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)及酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测α-syn与n Hb复合物在不同年龄段食蟹猴不同脑区亚细胞结构中的表达,免疫印迹(Western blotting)法检测食蟹猴不同亚细胞结构中游离α-syn与n Hb的表达。结果在纹状体中,n Hb-α-syn复合物在胞质组分中存在增龄性增加,而在线粒体组分中存在增龄性减低,并且在纹状体中,线粒体中游离n Hb随年龄增加而表达减少(P<0.05);在青、中、老年食蟹猴小脑中,n Hb-α-syn复合物在胞质及线粒体组分中并无明显变化。同时,线粒体中游离n Hb不随年龄增加发生改变。结论在老化脑的易感区,α-syn与n Hb复合物的形成可致线粒体游离n Hb降低。 杨巍巍 李旭冉 李昕 李旭颖 于顺关键词:Α-突触核蛋白 血红蛋白 线粒体 阿尔茨海默病患者MR图像胼胝体三维纹理特征研究 被引量:4 2011年 目的研究阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)胼胝体磁共振图像的三维纹理特征。方法对12例AD患者和12例健康对照者(Normal Controls,NC)进行三维纹理分析。采用灰度共生矩阵方法提取三维纹理参数,分析纹理参数在两组间的差异及与临床简易智能状态检查量表(Mini-Mental State Examination,MMSE)评分之间的相关性。结果研究结果显示,胼胝体部位的能量、逆差矩、对比度、熵、差熵及差方差在两组间存在显著性差异,并且与MMSE评分存在相关性。结论三维纹理特征可能反映出AD患者胼胝体部位的病理病变,有助于AD的诊断。 李昕 童隆正 王旭 王磊关键词:阿尔茨海默病 磁共振图像 胼胝体 突变型α-突触核蛋白对大鼠原代培养神经元突起生长作用研究 被引量:1 2012年 目的观察人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)和其突变体A30P和A53T对大鼠原代培养神经元突起生长的影响,明确α-Syn的生理功能,揭示突变体A30P和A53T在帕金森病的发病机制中的作用。方法取大鼠大脑皮质神经元分组培养,在细胞外添加A30P、A53T和α-Syn,培养1 h、2 h和4 h后固定,比较A30P、A53T与α-Syn对神经元突起生长的影响。神经元突起以成像显微镜观察测量,Western blotting法、免疫荧光法、单克隆抗体阻断实验鉴定各蛋白作用的特异性。结果添加α-Syn组的神经元培养至1、2和4 h时,其突起的平均长度大于对照组和添加A30P、A53T组(P<0.05)。A30P、A53T组和对照组的神经元突起长度差异无统计学意义(P>0.05)。增加蛋白的含量,浓度越高,α-Syn组神经元突起的平均长度与添加A30P和A53T组差异越大(P<0.01)。Western blotting和免疫荧光实验明确了外源性α-Syn可以从培养基进入到神经元内,并均匀分布在胞体和突起。而A30P和A53T组,并未发现。结论α-Syn在原代神经元生长初期对其突起生长具有促进作用,突变体A30P和A53T,无促神经元突起生长作用,这一现象可能与其在帕金森病发病机制中的作用有关。 王鹏 许洁 李昕 何欣 李尧华 于顺关键词:突触核蛋白 突起生长 帕金森病患者红细胞中与血红蛋白结合的alpha-突触核蛋白变化的研究 目的研究红细胞中与血红蛋白结合的α-突触核蛋白(α-Syn)在正常人群及帕金森病患者中的表达差异。方法Western blot、免疫共沉淀和ELISA方法检测与血红蛋白结合的α-Syn在正常人群及帕金森病患者中的表达。结... 杨巍巍 李昕 于顺文献传递 α-突触核蛋白通过上调内吞蛋白Rab5B促进海马神经元膜表面NMDA受体内在化 2017年 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptors,NMDA)受体的调控及机制。方法在原代海马神经元,通过细胞外添加基因重组α-Syn和基因过表达α-Syn方法实现细胞内α-Syn含量增高,基因敲减技术抑制Rab5B,Western blotting法分析NMDA受体NR1亚单位和Rab5B表达。结果神经元内α-Syn含量增高可以使Rab5B表达上调,并降低膜表面NR1的水平;抑制Rab5B表达可有效反转α-Syn所致的膜表面NR1水平下降。结论α-Syn通过上调Rab5B促进NMDA受体的内在化。 陈敏 于文娇 李昕 杨巍巍 杨巍巍 于顺关键词:Α-突触核蛋白 NMDA受体 内在化 海马神经元 帕金森病患者血浆增强α-突触核蛋白寡聚体形成 被引量:11 2013年 目的研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响。方法将重组人α-Syn加入PD和对照血浆中,37℃振荡孵育144 h,免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体形成情况,ELISA方法分析α-Syn寡聚体形成的相对质量浓度。结果α-Syn在PD患者血浆中形成寡聚体含量明显高于对照组。结论 PD患者血浆可促进α-Syn寡聚体形成。 尹娜 陈予东 李昕 杨巍巍 李旭冉 于顺关键词:帕金森病 血浆 Α-突触核蛋白 寡聚体