李丽珍
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国科学院南海海洋研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国科学院重点部署项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一类热稳定性提高的淀粉酶突变体及其编码基因和应用
- 本发明公开了一类热稳定性提高的淀粉酶突变体及其编码基因和应用。本发明从一种深海热泉来源的细菌α-淀粉酶AMY121出发，运用定点饱和突变技术获得热稳定性提高的淀粉酶突变体；所述的深海热泉细菌α-淀粉酶AMY121具有SE...
- 龙丽娟杨键李丽珍李洁肖运柱齐振雄尹团张偲
- 深海放线菌生淀粉酶基因的克隆表达及酶学特性研究被引量：2
- 2015年
- 从深海放线菌Streptomyces sp.SCSIO03032基因组中扩增到1条含淀粉结合域的水解糖苷13家族基因amy032,该基因编码氨基酸与已知蛋白一致性最高为67%。将amy032插入表达载体pET32a启动子下游,构建重组载体pET-amy。重组质粒导入大肠杆菌Rosseta(DE3)菌株中,SDS-PAGE分析结果显示目的基因成功实现异源表达。Ni-NTA对重组酶进行纯化,并对其酶学性质进行表征。结果表明:重组淀粉酶AMY032的最适作用温度为50℃,最适pH为8.0,以可溶性淀粉为底物时的比酶活为(276±57)U/mg,Km为0.02g/L,Vmax为70mg/(L·min)。Ca2+能提高该酶的催化活性,Ni2+、Cu2+、Zn2+和Mn2+对该酶有抑制作用。AMY032对生玉米淀粉和生大米淀粉具有水解活性,其比酶活分别为(49±12)U/mg和(39±11)U/mg;扫描电镜结果显示AMY032使生玉米淀粉的表面产生明显凹陷。
- 李丽珍杨键田新朋麦志茂苏宏飞龙丽娟张偲
- 关键词：有机物降解克隆表达
- 一类热稳定性提高的淀粉酶突变体及其编码基因和应用
- 本发明公开了一类热稳定性提高的淀粉酶突变体及其编码基因和应用。本发明从一种深海热泉来源的细菌α‑淀粉酶AMY121出发，运用定点饱和突变技术获得热稳定性提高的淀粉酶突变体；所述的深海热泉细菌α‑淀粉酶AMY121具有SE...
- 龙丽娟杨键李丽珍李洁肖运柱齐振雄尹团张偲
- 文献传递
- 红树林土壤微生物宏基因组文库的构建及两种新颖的β-葡萄糖苷酶基因的鉴定被引量：4
- 2014年
- 宏基因组技术是挖掘微生物新酶的重要途径。通过构建红树林土壤微生物Fosmid文库,共获得了约100 000个阳性克隆,该文库外源插入片段平均长度约为30 kb,文库容量达3 Gb。通过对文库中10 000个克隆进行功能筛选,获得了17个具有β-葡萄糖苷酶活性的克隆。对其中2个表达β-葡萄糖苷酶的克隆进行亚克隆,获得2个新颖的β-葡萄糖苷酶的基因,分别命名MhGH3和bgl66。生物信息学分析表明,MhGH3基因由1 992个碱基对组成,bgl66基因由2 025个碱基对组成。在氨基酸水平上,MhGH3和bgl66编码的蛋白质与GenBank数据库中已知β-葡萄糖苷酶的一致性分别为64%和55%。
- 麦志茂苏宏飞李丽珍张偲
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶纤维素酶红树林宏基因组文库
