张平武 作品数:19 被引量:75 H指数:5 供职机构: 第二军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
钩端螺旋体DNA疫苗pcDL41的构建、体外表达及免疫保护效果 钩端螺旋体(简称钩体)病是一种常见的人兽共患病,严重威胁人类健康和畜牧业生产。在世界各地均有分布,我国大部分地区均有分布,尤其是长江流域的某些省份;近年来,北方许多省份不断有钩体病流行的报道。但目前尚缺乏一种有效的疫苗,... 寇志华 张平武 孙树汉 陈祖欢文献传递 优化mRNA翻译起始区提高人粒-巨噬细胞集落刺激因子在E.coli中的表达 被引量:4 1996年 人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)是一种重要的造血生长因子.利用基因重组技术构建两个hGM-CSF的E.coli表达菌株,一个为在不改变氨基酸顺序的前提下,对mRNA翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变(hGM-CSF(M)),另一个为未突变的对照(hGM-CSF(N)).经酶切电泳、DNA测序、SDS-PAGE和Westernblot等分析鉴定,证明两者均能表达特异性的14.6kDhGM-CSF,但hGM-CSF(M)的表达水平较hGM-CSF(N)提高了1.26倍,占菌体总蛋白的16.9%.mRNA翻译起始区二级结构预测分析表明,优化突变后生成自由能ΔG从原来的-10.2提高至-9.4Kcal,AUG从部分配对状态变为非配对状态. 王易伦 张平武 戴建新 郭瀛军 陆德如关键词:HGM-CSF 集落刺激因子 MRNA 粒细胞 巨噬细胞 猪囊尾蚴抗原-B基因cDNA编码区的克隆 被引量:18 2000年 [目的 ]扩增和克隆猪带绦虫囊尾蚴 Ag B基因的 c DNA编码区。 [方法 ]提取猪囊尾蚴总 RNA中 ,利用 RT- PCR技术扩增出 Ag B基因 c DNA编码区 ,然后将其克隆到载体 p UC118中进行序列分析。 [结果 ]PCR反应产物为单一条带 ,大小为 2 .6 kb。测序结果与澳大利亚株猪囊尾蚴 Ag B序列有 99.8%的同源性 ,二者的氨基酸序列有 99.3%的同源性。 [结论 ]成功地克隆了猪囊尾蚴 Ag B基因 c DNA编码区。 王庆敏 戴建新 张平武 孙树汉关键词:基因克隆 重组人αB干扰素在大肠杆菌中的克隆与高效表达 被引量:1 1995年 人αB干扰素(IFN-αB)是体内具有多种生物学功能的细胞调节因子,能抵御病毒感染和抑制肿瘤细胞生长,在临床上有广泛而重要的应用价值。IFN-α在治疗低度恶性淋巴瘤、慢性白血病、肝炎等方面显示良好的效果,资料表明IFN-αB抑制病毒作用较αD型干扰素强30倍。本文利用基因重组技术构建IFN-αB高效表达菌株E.coli XL-Blue/pBm,经酶(?)鉴定、DNA测序、SDS-PAGE、Western Blot及生物活性测定等分析鉴定,表明能特异性地表达具有生物活性的26 kD IFN-αB。表达水平达到23%(占总菌体蛋白比值),比活为1.0×10~6/mg,具有良好的应用前景。 张平武 王易伦 陆德如关键词:基因重组 假丝酵母C.kefyr菊粉酶基因的克隆 1999年 张平武 霍克克 高卜渝 邹愚 李育阳关键词:菊粉酶 假丝酵母 分泌蛋白 酵母菌 酿酒酵母 重组人α8干扰素在大肠杆菌中的克隆与高表达 被引量:1 1995年 利用基因重组技术构建了人干扰素α8(IFN-α8)高表达菌株E.coliXLl-Blue/pBm,经酶切鉴定、DNA测序、SDS-PAGE、Westernblotting及生物活性测定等分析,表明能特异性地表达具有生物活性的IFN-α8,表达量达到总菌体蛋白的23%,经复性后比活为4.8×107IU/mg,具有良好的应用前景。 张平武 王易伦 陆德如关键词:基因重组 克隆 基因表达 大肠杆菌 新型酵母表达系统的研究 被引量:23 1999年 酵母表达系统是在酿酒酵母质粒的发现和酵母转化技术的成熟基础上建立起来的真核生物表达系统。许多有应用价值的外源基因成功地在其中表达,但也存在一些局限性。为了开发新的酵母表达系统,人们在酿酒酵母以外的酵母中寻找合适的宿主以建立新的载体-宿主系统。本文综述了建立新的酵母表达系统涉及的有关问题和近几年来的研究进展。 张平武 李育阳关键词:酵母 宿主菌 钩端螺旋体DNA疫苗pcD-flaB的构建及其免疫机制的初步研究 被引量:4 2000年 目的 :观察钩端螺旋体 DNA疫苗的保护效果 ,并探讨该疫苗的免疫机制。方法 :应用定向克隆的方法构建 DNA疫苗 pc D- fla B,肌肉途径免疫豚鼠 ,观察豚鼠攻击感染钩体后的保护率 ,以 EL ISA法检测特异性抗体 Ig G水平 ,并观察疫苗对豚鼠腹腔巨噬细胞分泌的 TNF活性的影响。结果 :该疫苗对同型钩体的保护率为 10 0 % ,特异性抗体水平在疫苗注射第 6周达到高峰 ,TNF的活性明显增高。 结论 :DNA疫苗 pc D- fla B对同型钩体感染有较强的保护作用 ;能够有效地诱导机体的体液免疫应答 ,并增强巨噬细胞所产生的 TNF的活性。 寇志华 张平武 孙树汉关键词:钩端螺旋体 DNA 疫苗 巨噬细胞 肿瘤坏死因子 假丝酵母Candida kefyr主分泌蛋白基因的克隆及表达系统的建立 张平武关键词:菊粉酶 核糖体 肿瘤生长抑制因子——血管抑素和内皮抑素 被引量:7 2001年 血管生成是肿瘤生长转移过程中的一个关键环节 ,因此控制血管生成成为抑制肿瘤生长的重要途径之一。目前已发现了许多血管生成抑制因子 ,尤以血管抑素和内皮抑素最为引人瞩目。综述了两种肿瘤生长抑制因子的发现、分子结构、生物学活性等 ,尤其侧重于它们抗肿瘤作用的实验研究。 孙宁霞 张平武关键词:肿瘤血管生成 血管抑素 内皮抑素 抗肿瘤作用