张以涛
- 作品数：3 被引量：10H指数：3
- 供职机构：东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 小鼠乳腺上皮细胞培养体系的建立及初步应用
- 体外培养系统可以模拟体内激素环境和体内构造来控制细胞的生长，还可以研究不同培养条件下细胞的生长潜能，既快捷又便利。小鼠作为实验动物的易获得性和可操作性是细胞水平研究乳腺的理想动物模型，而现有的小鼠乳腺上皮细胞的分离、培养...
- 张以涛
- 关键词：动物模型乳腺上皮细胞生物学特性分离培养法
- 文献传递
- 小白鼠乳腺上皮细胞的体外培养及形态学变化被引量：8
- 2008年
- 以无菌手术法取健康妊娠期、泌乳期昆明小白鼠的乳腺组织,用胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ分段消化法获得小鼠乳腺细胞。生长培养液为DMEM/F12,含10%胎牛血清,添加胰岛素(5μg/mL)、EGF(5ng/mL)、氢化可的松(1μg/mL)、青霉素(200IU/mL)及链霉素(0.1mg/mL)。从乳腺组织中获得的细胞直接放入-80℃冰箱中进行冻存,冻存液为DMEM/F12,含20%胎牛血清、10%DMSO。用倒置显微镜观察细胞形态,发现乳腺组织消化后即可获得呈圆饼状的上皮细胞;培养过程中,乳腺上皮细胞的形态以鹅卵石型和多角型为主,增殖可形成乳头状结构,称之为乳球体,大量增殖后形成圆顶型结构。细胞核呈圆形或椭圆形,在传代过程中,乳腺上皮细胞可形成岛屿状的闭合型细胞群,边界清晰,细胞之间结合紧密,细胞间呈拉网结构。结果表明:获得典型上皮细胞形态的小鼠乳腺细胞原代培养物,从泌乳期小鼠获得的乳腺上皮细胞传至第1代时无法长成单层;而从妊娠期小鼠获得的乳腺上皮细胞传至第3代时才无法长成单层;冻存后复苏的乳腺细胞在培养过程中仍然具有典型的上皮细胞形态,并且增殖旺盛。
- 张以涛李庆章
- 关键词：小白鼠乳腺上皮细胞细胞形态
- 小鼠乳腺上皮细胞培养体系的建立及Heregulin-α的调控作用被引量：3
- 2011年
- 旨在建立完善的小鼠乳腺上皮细胞体外培养体系,探讨Heregulin-α(HRG-α)对该体系乳腺上皮细胞增殖及代谢的影响,为进一步深入研究乳腺上皮细胞的形态、结构和功能,揭示HRG-α在小鼠乳腺发育中的作用及其规律提供理论依据.通过比较不同pH和不同血清浓度配比的生长培养液对小鼠乳腺细胞生长的影响,得出pH7.4,添加10%血清的生长培养液为乳腺上皮细胞生长的最佳条件.通过运用相差显微镜技术、MTT等研究方法进行不同取材时期乳腺上皮细胞的形态、接种存活率、倍增时间、生长曲线等生物学特性比较,获得妊娠15天为较好的乳腺细胞取材时期.采用免疫组化和RT-PCR方法对细胞重要的标志蛋白角蛋白-18进行检测,鉴定所获得的细胞为乳腺上皮细胞,成功建立小鼠乳腺上皮细胞体外培养体系.利用所建立的小鼠乳腺上皮细胞体外培养体系,采用液相色谱技术及MTT方法,初步探讨了HRG-α对小鼠乳腺上皮细胞的影响.结果表明,适宜量HRG-α对小鼠乳腺上皮细胞生长和分泌总蛋白、乳糖均有显著促进作用,0.1～20ng/mL的HRG-α可促进小鼠乳腺上皮细胞的增殖和总蛋白、乳糖含量的增加,20ng/mL时达到最大值(P<0.01),50和100ng/mLHRG-α抑制小鼠乳腺上皮细胞的增殖,降低小鼠乳腺上皮细胞的总蛋白、乳糖含量(P<0.05).
- 耿丽晶张以涛林叶李庆章
- 关键词：小鼠乳腺上皮细胞生物学特性
