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来源于西洋梨的苹果茎沟病毒分离物基因组分子特性研究被引量：2: 2017年; 为了获得来源于西洋梨红贝雷沙寄主潜带苹果茎沟病毒(ASGV)分离物的基因组全长序列,并明确其分子特性,采用RT-PCR、RACE末端克隆及生物信息学方法,对ASGV分离物基因组全长进行序列测定,并对其序列特点进行分析。结果发现,来源于西洋梨的ASGV-HB分离物的基因组全长序列为6 496 nt(Gen Bank登录号:KU605672),含有2个开放阅读框ORF1、ORF2及2个可变区Ⅵ、Ⅶ。序列分析表明ASGV-HB与Gen Bank登录的18个ASGV分离物的基因组全长核苷酸序列同源性为80.6%~87.7%;ORF1和ORF2编码的氨基酸同源性分别为84.3%~92.3%和94.4%~98.7%;Ⅵ和Ⅶ可变区的氨基酸序列同源性分别为22.9%~68.8%和48.8%~92.2%;系统发育树分析显示,来源于不同国家的相同寄主的ASGV分离物聚集为同一分支。结果表明,ASGV的分子变异无地域相关性,具有一定的寄主选择性,研究结果为进一步探究ASGV的群体遗传进化机制及其防治提供了重要的分子信息。; 张雪娇王利平赵振军郑银英陈婕崔百明; 关键词：苹果茎沟病毒同源性

Construction of RNAi Vector Which Resist Cucumber Mosaic Virus and Transformation of Tobacco被引量：4: 2010年; [Objective] Aimed to construct RNAi vector resistant to cucumber mosaic virus and transferred this vector into tobacco. [Method] RT-PCR method was used to amplify cucumber mosaic virus NS04 and process RNA2 gene sequen of tomato isolates. The analysis results of phylogenetic tree demonstrated that the sequence in RNA2 encoded CMV-2a had 98.0% and 96.5% homology with nucleotide and amino acid of DQ412731 isolate of Zhejiang,China. The replicase fragment in CMV RAN2 gene was taken as target sequence to construct pBi35SCR2 eukaryotic expression vector,then the expression vector was identified. Through agrobacterium-mediated method,the expression vector was transferred into tabacco and PCR method was used to check the transfer. The PCR results demonstrated that the experiment had successfully construct eukaryotic expression vector of pBi35SCR2 and the expression vector was successfully transferred into tabacco. [Conclusion] The obtained transgenic tobacco could be used as challenge test material in following experiment and provided foundation for studying processing tomato resist cucumber mosaic virus.; 张瑜郑银英赵峰玉乔亚红崔百明向本春Yin-yingFeng-yuYa-hongBai-mingBen-chun

橡胶草基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化被引量：4: 2011年; 为探索适合橡胶草基因组DNA的提取方法和RAPD反应体系。采用改良CTAB法提取橡胶草叶片总DNA,得到的DNA能满足RAPD分析需要。通过单因子实验法分析DNA浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Taq聚合酶以及Mg2+浓度对RAPD扩增结果的影响,建立了适合于橡胶草RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μL体系中包括:模板DNA30ng、TaqDNA聚合酶1.75U、dNTPs浓度0.25mmol/L、Mg2+浓度2.0mmol/L、引物浓度0.5μmol/L、10×PCRBuffer2.0μL。RAPD扩增反应程序为:94℃预变性5min,94℃30s,37℃30s,72℃70s,45个循环,最后72℃延伸7min。该反应体系具有较好的稳定性及可重复性。; 李若霖崔百明王颖张秀春陈雄庭吴坤鑫; 关键词：橡胶草 DNA提取 RAPD

双抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及烟草遗传转化被引量：1: 2012年; 为了获得抗CMV和ToMV的转基因烟草,本试验采用RT-PCR的方法从新疆加工番茄CMV分离物NS0-4克隆了1a复制酶第71～360bp和第1801～2050bp序列作为干扰片段CR9和CR14,以及从ToMV分离物SCS-4克隆了130/180kDa复制酶第658～940bp和第2551～2850bp序列作为干扰片段To9和To14。通过T克隆载体将CR9和To9及CR14和To14进行拼接,分别构建成含反向重复结构拼接片段的RNAi表达载体pBi35STC9和pBi35STC14;利用农杆菌介导法分别将表达载体侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana),再生植株经分子检测,结果显示已成功获得了转pBi35STC9烟草9个单株及转pBi35STC14烟草8个单株,为进一步的攻毒试验奠定了基础。; 田桂英乔亚红向本春郑银英李诗林崔百明; 关键词：CMV TOMV RNAI载体转基因烟草

棉花DELLA蛋白GhGAI4a基因在拟南芥中功能初步分析被引量：6: 2013年; 为了探究棉花DELLA蛋白基因GhGAI4a在拟南芥中的功能,构建植物表达载体pBP35S∶GhGAI4a和pBP35S∶Ghgai4a,利用农杆菌介导的花滴法将其转入Col野生型拟南芥。结果显示,2个载体各自获得6个独立的转基因拟南芥纯合株系。分别统计48-96h种子萌发率,测量生长7d后幼苗的主根长度,与非转基因植株相比,过量表达GhGAI4a、Ghgai4a对拟南芥种子萌发及主根生长具有明显的抑制作用。1μmol/L GA处理转基因植株,GhGAI4a转基因植株主根长和萌发率均增大,而Ghgai4a转基因植株主根长度和萌发率均无显著变化。; 吕西洋崔百明段琛陈英杰黄先忠郑银英; 关键词：棉花 DELLA蛋白赤霉素

橡胶树胚性组织长期继代增殖方法: 本发明公开了一种橡胶树胚性组织长期继代增殖方法，它是一个将胚性愈伤及心形胚阶段以前的胚性组织，通过组培继代达到高效增殖和长期保存的方法，其工艺过程包括继代胚性组织的选取与处理过程、胚性组织的继代增殖过程、胚性组织的复状过...; 彭明赵辉崔百明赵平娟; 文献传递

新疆石河子、伊宁地区黄瓜花叶病毒株系分化被引量：9: 2013年; 为了研究新疆黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分子变异及株系分化,对从石河子和伊宁地区采集的205个加工番茄、23个辣椒、4个番茄、2个南瓜样品进行酶联免疫检测和RT-PCR检测。在4种寄主上均检出了亚组Ⅰ型CMV,其中加工番茄的感染率高达74.15%。进一步对来自辣椒的YN-6、LJ-4、L-10,加工番茄的S1-1、S1-14,番茄的YN-2,以及南瓜的YN-9等7个样品CP、RNA3、MP核苷酸序列进行相似性和进化树分析。7个样品与CMV亚组ⅠB株系分离物的相似性较高、亲缘关系最近,均可归为CMV亚组ⅠB。而来自辣椒的LJ-4、L-10与其余5个样品的序列相似性较低,亲缘关系较远,在进化树上形成独立分支。说明在新疆加工番茄及其它蔬菜上广泛流行的CMV存在分子变异。; 程朝玲向本春崔百明郑银英; 关键词：黄瓜花叶病毒血清学 RT-PCR 株系分化

CMV 2b和TOMV CP酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活效应检测: 2011年; 通过RT-PCR从CMV和ToMV新疆分离物中扩增出CMV 2b和ToMVCP这2个基因,按正确方向将目标片段分别插入诱饵载pSos中,并将重组质粒导入酵母温度敏感酵母菌株cdc25H,检测其表达产物对酵母Sos恢复系统Ras信号通路的激活作用和对酵母细胞温敏特性影响。结果表明,这2个诱饵载体构建成功,对酵母菌株cdc25H无毒性和对Sos恢复系统无激活作用。为利用酵母双杂交系统研究加工番茄病毒的感染机制和病毒-寄主相互作用及防治加工番茄病毒病奠定了基础。; 王子华郑银英崔百明向本春; 关键词：CMV TOMV 酵母双杂交系统

陆地棉GAI基因原核表达与多克隆抗体制备: 2009年; DELLA蛋白是GA信号响应的关键负调节因子,本文采用基于EST的电子克隆方法,从棉花中克隆了DELLA蛋白家族的一个成员GhGAI。根据电子克隆序列,从陆地棉花胚珠cDNA中扩增得到GhGAI全长基因片段。将其在原核中表达,得到了分子量(Mr)为62000的蛋白质条带。表达蛋白经His-Tag亲和层析纯化后,对兔子进行免疫,制备的抗血清通过间接ELISA检测,具有较高的效价和特异性。; 郑银英崔百明祝建波廖文斌张根发彭明; 关键词：陆地棉多克隆抗体

转基因棉花的田间筛选技术研究被引量：47: 2000年; 利用不同浓度的卡那霉素对棉花叶片进行处理 ,较为系统地研究了棉花不同品种、不同叶位、不同生育时期内叶片对卡那霉素处理的反应。在此基础上建立了一种在田间对转基因棉花进行筛选的简便方法。研究表明 ,在棉花花铃期以前 ,利用 50 0 0～ 750 0 mg.L- 1卡那霉素对转基因棉花新展开的倒 1叶和倒 2叶进行检测 ,能够有效筛选出带有卡那霉素标记基因的转基因后代 ,这对于转基因棉花材料的选育有较大的利用价值。; 祝建波王爱英吴刚崔百明朱新霞肖璐乐锦华; 关键词：棉花卡那霉素抗性转基因育种田间筛选; 全文增补中

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崔百明

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