孙青菊
- 作品数：14 被引量：32H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军济南军区更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金青岛市公共领域科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38年轻和衰老细胞中线粒体量和mtDNA相对含量以及功能变化的比较被引量：2
- 2006年
- 目的培养人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38,比较年轻和衰老细胞中线粒体量和线粒体DNA(mtDNA)相对含量的变化,以及线粒体功能的改变,探讨线粒体与衰老的关系。方法培养人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38;四氮唑盐(MTT)比色法测细胞活力;差速离心分离线粒体,BCA-100Pr定量试剂盒测定线粒体蛋白的含量;竞争PCR法分析mtDNA的相对含量;流式细胞仪测定线粒体膜电位的变化;分光光度法测定线粒体呼吸链氧化酶-NADH氧化酶活性。结果衰老细胞较年轻细胞形成单层时间明显延长,细胞圆缩蜕变,细胞活力明显低于年轻细胞;线粒体膜电位约下降为原来的50%;NADH氧化酶活性也降低,最大反应速度由66.73nmol/(mgprotein·min)降为36.01nmol/(mgprotein·min);衰老细胞线粒体蛋白含量(0.78±0.02mg/ml)高于年轻细胞(0.56±0.03mg/ml);以核18SrDNA为内参,衰老细胞mtDNA相对含量(1.557±0.072)明显高于年轻细胞(1.292±0.068)。结论衰老细胞中,线粒体量和mtDNA相对含量的增高可能是功能下降的一种代偿性反应,为探讨线粒体与衰老的关系提供一定参考。
- 孙青菊龙建纲汪振诚缪明永王学敏
- 关键词：线粒体线粒体衰老
- 液态芯片监测铜绿假单胞菌多重耐药基因的研究被引量：2
- 2016年
- 目的建立以液态芯片为检测手段的快速、高通量的铜绿假单胞菌多重耐药基因监测技术平台,探索建立能够常规应用于临床并解决现行临床表型测定局限性的分子生物学技术。方法针对铜绿假单胞菌中常见的OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP共8个耐药基因序列进行分析,依次对这8个耐药基因设计多重PCR扩增引物和序列特异的核酸探针,选取临床鉴定的含各耐药基因的耐药菌株作为阳性参比品进行检测工艺优化,进行铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片监测平台的研发。结果初步建立了铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片监测平台,组装了铜绿假单胞菌多重耐药检测液态芯片试剂盒1套。选择了8株含各耐药基因铜绿假单胞菌阳性菌株,用组装的试剂盒重复检测10次,耐药基因检测阳性率为100%,各耐药基因检测信号间无交叉,灵敏度﹑特异度以及重复性都很好。利用此平台进行了一定数量的临床标本检测分析。从检测结果来看,40份标本中,18份标本耐药基因阳性,其中含多耐药基因的标本有9份,占50%。18份阳性标本的耐药基因与耐药表型分析结果一致。结论此监测平台是将一种多重扩增技术和芯片技术-悬浮阵列技术相结合的方法,具有特异性高、可组合筛查、检测通量高的优势。
- 孙青菊苑同业王军姜美娟刘金凤梁冰
- 关键词：铜绿假单胞菌耐药基因液态芯片
- 铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药及传播机制的研究进展被引量：9
- 2013年
- 铜绿假单胞菌是一种常见的医院获得性感染条件致病菌。随着超广谱抗菌药物的广泛和不合理使用,铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性逐渐增强,给医院抗感染治疗带来极大困难。铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制相当复杂,具有天然耐药和获得性耐药特点,本文对其耐药及传播机制的研究进展进行综述。
- 孙青菊梁冰
- 关键词：铜绿假单胞菌Β-内酰胺抗菌药物耐药
- 利用细胞衰老模型探讨线粒体与衰老的关系
- 线粒体作为真核细胞中一种重要而独特的细胞器，其性状改变与人的衰老和疾病密切相关，甚至被称为衰老的生物钟。
本研究通过建立细胞衰老模型，从二倍体细胞衰老过程中量与功能变化相结合来探讨了线粒体与衰老的关系。分析...
- 孙青菊
- 关键词：人体衰老线粒体膜电位氧化还原酶
- 文献传递
- 银屑病患者血小板活化因子乙酰水解酶基因突变的研究被引量：3
- 2005年
- 目的探讨血小板活化因子乙酰水解酶基因突变(Arg92→His)与银屑病的关系。方法对 47例银屑病患者及52例健康对照者,分别用聚合酶链反应技术(PCR)及限制性内切酶片段长度多态性 (RFLP)分析血小板活化因子乙酰水解酶基因组DNA的突变等位基因。结果银屑病组突变率显著高于对照组(P<0．05)。结论血小板活化因子乙酰水解酶基因突变(Arg92→His)与银屑病存在相关性,其突变可能为银屑病的一个发病高危因素。
- 夏天保毕新岭顾军缪明永李素玲王洁孙青菊于军
- 关键词：银屑病突变血小板活化因子乙酰水解酶银屑病患者酶基因突变聚合酶链反应技术基因组DNA
- RNA干扰介导的prohibitin基因沉默对BRL-3A细胞增殖的影响
- 2013年
- 目的观察RNA干扰介导的prohibitin基因沉默对大鼠肝细胞BLR-3A细胞增殖及细胞周期的影响。方法化学合成针对prohibitin基因的小干扰RNA(siRNA),使用脂质体将其转染至BRL-3A细胞中,应用Real-time PCR和Western blot-ting分别检测siRNA转染后细胞prohibitin mRNA和蛋白的表达,MTT法检测转染后的细胞增殖情况,流式细胞术检测转染后细胞周期的变化。结果与对照组比较,prohibitin siRNA转染BRL-3A细胞后,prohibitin mRNA和蛋白表达明显下降;细胞活力升高;G1期细胞减少,S期细胞明显增多(P<0.05)。结论 Prohibitin siRNA能有效抑制大鼠肝细胞BLR-3A细胞prohibitin mRNA和蛋白的表达,并促进细胞增殖。
- 孙青菊梁冰焦炳华
- 关键词：基因细胞周期流式细胞术
- 大鼠肝再生的亚细胞—线粒体蛋白质组学研究
- 肝脏是人体各种物质代谢、能量转换及供应的枢纽和主导器官,是机体内多种重要信息调控分子的“集散地”。与其他器官不同,肝脏具有强大的再生能力。创伤和各种肝病后,残存肝组织很快会进入复杂的再生过程。肝再生一直是哺乳动物肝脏研究...
- 孙青菊
- 关键词：肝细胞再生蛋白质组学
- 文献传递
- 人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38经^(60)Co照射后线粒体量与功能的改变
- 2005年
- 目的:检测人胚肺二倍体成纤维细胞WI38受到60Coγ射线照射后线粒体DNA(mtDNA)的相对含量和线粒体功能的改变;探讨γ射线照射后细胞线粒体的变化规律。方法:四氮唑盐(MTT)比色法测细胞活力;采用竞争PCR法测定mtDNA的相对含量;荧光染料R123和TMRM分别标记,流式细胞仪测定线粒体膜电位的变化;酶标分光仪测定线粒体呼吸链氧化酶NADH氧化酶反应2min内活性变化。结果:与正常细胞相比,60Coγ射线照射后,照射组细胞明显肿胀,变短,边缘不整齐,排列紊乱,数量减少;细胞活力(0.359±0.02)明显低于正常组(0.598±0.03,P<0.05);线粒体膜电位约下降为原来的50%;NADH氧化酶活性也降低,最大反应速度由48.93μmol/(mg·min)降为27.80μmol/(mg·min);以核18SrDNA为内参照,照射组mtDNA相对含量为(1.680±0.082),明显高于正常组的(1.296±0.077)。结论:γ射线照射后,WI38细胞mtDNA相对含量的增高可能是线粒体功能下降的一种代偿性反应。
- 孙青菊王学敏朱克军龙建刚缪明永焦炳华
- 关键词：Γ射线膜电位
- 线粒体与衰老相关研究进展被引量：8
- 2005年
- 孙青菊朱克军王学敏
- 关键词：线粒体线粒体DNA衰老
- 铜绿假单胞菌耐药基因监测液态芯片的研制
- 目的建立以液态芯片为检测手段的快速、高通量细菌耐药基因监测技术平台,探索建立能够常规应用于临床并解决现行临床表型测定局限性的分子生物学技术。方法针对铜绿假单胞菌中常见的OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、...
- 孙青菊姜美娟刘金凤陈兆艳王军梁冰
- 关键词：铜绿假单胞菌耐药基因液态芯片
