孙晶
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- RNA干扰技术抑制洋桔梗ACC合酶基因的表达被引量：1
- 2017年
- 为了延长洋桔梗的花期,本研究通过农杆菌介导法,以ACC合酶(ACS)基因干扰表达载体,对Double Mariachi Pink洋桔梗(Eustoma grandiflorum)的叶片外植体进行了转化。经过再生芽的筛选增殖培养,在含有卡那霉素Km(15 mg/L)再生根筛选培养基中得到了46株抗性苗,其中11株经GFP基因PCR鉴定为阳性。经进一步的GFP基因RT-PCR鉴定,3株表达为阳性,并且其中2株经GFP荧光检测呈阳性。提取荧光阳性植株RNA,逆转录后,进行了ACS荧光定量PCR。结果表明,与未转基因对照植株相比,转基因植株ACS的相对表达量平均下降了63.17%。花期统计结果表明,ACS干扰表达载体转化的洋桔梗植株花期比未转基因植株对照延长了17 d。
- 张倩孙晶廖静陈崇顺
- 关键词：洋桔梗RNA干扰花期
- 氨磺灵离体诱导半枝莲多倍体的研究被引量：7
- 2011年
- 目的:获得半枝莲多倍体植株。方法:离体条件下应用氨磺灵对半枝莲茎段外植体进行了不同浓度和时间的处理。结果:获得了半枝莲变异株,与二倍体植株相比,变异植株形态特征变化明显,植株株型紧凑,叶片颜色深绿,叶型指数变小,茎段变粗,气孔、保卫细胞明显增大,保卫细胞叶绿体数明显增多,气孔密度明显减小。经染色体计数和流式细胞仪检测,获得的变异株为二倍体和四倍体的嵌合体。结论:该方法可以作为半枝莲多倍体的诱导方法。
- 岳敏陈崇顺廖静孙晶沈唯军
- 关键词：半枝莲多倍体
- 洋桔梗Double Mariachi Pink高效遗传转化体系的建立被引量：4
- 2011年
- 以洋桔梗品种Double Mariachi Pink为供试材料,探讨影响根癌农杆菌介导法遗传转化的一些因素,包括Cb(羧苄青霉素)脱菌浓度、Km(卡那霉素)筛选浓度、农杆菌的侵染浓度和预培养时间等。研究结果表明:脱菌培养基中Cb的浓度为200 mg/L时,抑制农杆菌生长但不显著影响叶片不定芽分化;不定芽分化阶段和生根阶段的适宜Km筛选浓度分别为30 mg/L和15 mg/L;外植体预培养3 d,在D600 nm≈0.5的农杆菌菌液中侵染10 min后,Km筛选得到的抗性植株GUS染色蓝斑率最高,达到86.7%。
- 廖静王轶陈崇顺岳敏孙晶沈唯军
- 关键词：洋桔梗农杆菌影响因素
- ACC合酶反义基因转化洋桔梗Double Mariachi Pink的研究被引量：2
- 2012年
- 以洋桔梗(Eustoma grandiflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121-ACC合酶反义基因片段(1 008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗。再生抗性苗在生根培养基1/2MS+NAA 0.1 mg/L+Km 15 mg/L上生根筛选获得了55株正常生根的植株;对其中随机挑选的8个株系进行PCR鉴定和GUS表达检测,在增殖筛选培养基MS+6-BA0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+Km 30 mg/L+Cb 100 mg/L上初步筛得到5个PCR阳性株系,其中4株GUS检测呈阳性:5个PCR阳性株系经PCR-Southern杂交鉴定得到1株阳性植株。将阳性株系出瓶移栽,其平均花期为24 d。
- 孙晶王轶陈崇顺邹爱兰廖静赵晓潘乔宁宁邓文汉
- 关键词：洋桔梗PCR检测
