姚李四 作品数:79 被引量:187 H指数:7 供职机构: 中国检验检疫科学研究院 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
蚊类带病毒快速检测技术研究与展望 被引量:4 2007年 在我国,蚊类分布广泛,种类繁多,且受到外来蚊类入侵的威胁。由于蚊类可携带的病原菌种类较多,开展早期快速诊断是预防和控制带病毒蚊类的基础和依据。一般情况下蚊类的病原携带率比较低,大的样本数是获得蚊类检测阳性结果的重要条件。免疫学方法、分子生物学方法,尤其是实时荧光PCR方法是实验室常用的快速检测方法。国境口岸的检疫要求有现场的快速检测方法,发展其纳米生物检测技术可能会满足这一要求。 姚李四 马晓光 石秀丽关键词:蚊虫 病原 纳米 狭颅田鼠DNA序列 本发明公开了狭颅田鼠DNA序列。本发明为了提供一种快速鉴定狭颅田鼠的方法,通过形态特征的鉴定方法对该鼠种进行了鉴定,并获取了该种的COI基因序列。本发明还提供一种用于检测狭颅田鼠的DNA标准基因、其引物及其试剂盒。本发明... 张晓龙 姚李四 慈颖 乔舜 王海玲 房健慧 田丽 魏怀波文献传递 环介导等温扩增技术(LAMP)检测鼠疫杆菌的方法 本发明涉及一种新的检测鼠疫杆菌的方法,其中采用环介导等温扩增技术。本发明对环介导等温扩增方法进行了实质性改进,提高了检测特异性和灵敏度。 王静 文海燕 龙冬伶 孙肖红 杨宇 张晓龙 姚李四文献传递 2009-2011年吉林长白口岸中朝边境啮齿动物及其感染汉坦病毒跨境调查研究 被引量:4 2012年 目的调查吉林中朝边境口岸地区啮齿动物及其体表寄生虫的种类、构成和携带汉坦病毒的情况。方法 2009年至2011年,在吉林省长白口岸和朝鲜惠山口岸地区,以夹夜法捕鼠,梳刷法采集鼠体表寄生虫,取鼠血、肺、肝、肾、脾脏组织。采集样本送中国检验检疫科学研究院做汉坦病毒抗原检测。结果在吉林长白口岸地区共捕获啮齿动物336只,隶属于1目2科6属9种,其中黑线姬鼠为优势鼠种,占捕鼠总数的67.26%;检蚤302匹,染蚤率为28.87%,蚤指数为0.90;检螨978只,染螨率为61.90%,螨指数为2.91;获得有效样本190份,检出汉坦病毒阳性7份,阳性率为3.68%。在朝鲜惠山口岸地区共捕获啮齿动物96只,隶属于1目3科4属5种,其中褐家鼠为优势鼠种,占捕鼠总数的79.17%;检蚤141匹,染蚤率为53.13%,蚤指数为1.47;检螨153只,染螨率为51.04%,螨指数为1.59;获得有效样本96份,检出汉坦病毒阳性10份,阳性率为10.42%。结论应进一步加强中朝边境长白口岸地区啮齿动物防治和鼠类肾综合征出血热监测,防止肾综合征出血热的传播和流行。 张吉 马承祯 刘勇先 张立健 朴哲 陈磊 庞玉贵 姚李四 邵丽筠 曹国祥关键词:啮齿动物 汉坦病毒 肾综合征出血热 2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究 被引量:7 2006年 [目的]寻求能够快速定性/定量检测4种传染病及其病原体的试验方法。[方法]应用双抗体夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测炭疽杆菌芽孢(以下简称炭疽芽孢)、鼠疫杆菌、肠出血性大肠埃希菌O157:H7(以下简称EHEC O157),评价方法的灵敏性、特异性。通过分别检测模拟掺入3种菌/芽孢的“白色粉末”和检测3种细菌的强毒株,评价在实际环境样品检测中的应用。应用双抗原夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测鼠疫F1抗体、SARS病毒抗体,检测239份青海鼠疫疫区人员血清、1236份新疆鼠疫疫源地鼠血清,检测18份恢复期SARS病人血清和9份健康对照者血清,以及206份出入境健康人员血清,考核2种检测抗体的方法在实际样品检测中的应用。通过比较炭疽杆菌、鼠疫杆菌、大肠埃希菌O157以及鼠疫杆菌抗体、SARS病毒抗体的胶体金免疫层析方法、UCP免疫层析方法,比较我们建立的2套系统与加拿大RAMP系统检测炭疽杆菌的能力。[结果]UCP免疫层析方法能在35min内完成检测,炭疽芽孢检测掺入“白色粉末”的样品灵敏性为1×10^4cfu/test,炭疽芽孢最低检测限为1×10^5cfu/ml(原溶液芽孢浓度),多种不同的芽孢菌及其它细菌共38种54株检测说明该法特异性良好,仅与腊样芽孢杆菌有交叉反应,特异性为97%;鼠疫杆菌检测灵敏性为5×10^4cfu/ml,最低检测菌数为5×10^3cfu/test,在10^7cfu/ml水平上未发现与30余种细菌有交叉反应,包括最近缘假结核耶尔森菌;EHEC O157检测灵敏性为1×10^3cfu/ml,仅与弗氏枸橼酸杆菌有交叉反应,特异性为98%。胶体金免疫层析方法能在10min内完成检测,炭疽芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157检测灵敏度分别为1×10^6cfu/ml、1×10^5cfu/ml、1×10^5cfu/ml,“白色粉末”等环境样品最� 王静 胡孔新 李伟 陈维娜 姚李四 侯友松 周蕾 闫中强 杨瑞馥关键词:鼠疫杆菌 SARS病毒 免疫层析法 一种甲型副伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳方法 本发明提供一种甲型副伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳方法,以经分离得到的甲型副伤寒沙门菌为分析样品,依次进行以下各步骤:胶块制备、细胞裂解、洗胶块、胶块内DNA的酶切、加样和电泳;其中,所述的胶块制备、细胞裂解、洗胶块和加样步骤... 韩辉 李海山 陈春霞 胡群 徐宝梁 姚李四 杨宇 王艳 李新 张晓龙便携式快速检测箱 本实用新型公开了一种便携式快速检测箱,包括箱体和箱盖,箱盖内侧覆盖有海绵,箱体内部一侧设置若干隔舱,隔舱内装有传染病快速检测条、生物防护装备和配套便携式检测装备,隔舱上方设置有可掀起硬质盖板,箱体内部另一侧由具有防震功能... 胡孔新 王静 李伟 姚李四 王宝麟 王大宁 杨瑞馥 周蕾文献传递 固体氧化还原电位消毒剂对H5N1型禽流感病毒灭活效果研究 被引量:6 2006年 为观察新型固体氧化还原电位消毒剂对H5N1型高致病性禽流感病毒的灭活效果,采用K le in-Defors悬浮方法进行了实验室研究。结果,用含100 mg/L有效氯的固体氧化还原电位消毒剂作用2 m in,对悬液内H5N1型禽流感病毒灭活对数值为3.5;作用5 m in,对H5N1型禽流感病毒灭活对数值达到5.5以上。结论,固体氧化还原电位消毒剂在比较低的浓度下对H5N1型禽流感病毒具有较好的灭活效果。 姚李四 张顺合 崔永成 马超英 张维 柯秋环关键词:氧化还原电位 有效氯 消毒剂 禽流感病毒 灭活效果 分离的阪崎肠杆菌噬菌体、其组合物及应用 本发明涉及分离的阪崎肠杆菌噬菌体SK1、SK2、SK3、SK4和SK5,其保藏编号分别为CGMCC No.3741、CGMCC No.3742、CGMCC No.3743、CGMCC No.3744和CGMCC No.3... 赵贵明 陈颖 袁飞 暴书蝉 赵勇胜 姚李四人源腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段及其全抗体的研制 被引量:1 2003年 目的 运用噬菌体表面表达技术 ,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞 ,提取总RNA ,逆转录cDNA ,聚合酶链反应扩增人IgGFab轻、重链基因 ,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的腺病毒伴随病毒为固相抗原筛选抗体Fab段 ,并在E coli中进行分泌性表达。通过ELISA和间接免疫荧光试验、筛选和鉴定Fab抗体 ,并进行序列测定。然后将其重链和轻链基因克隆到全抗体表达载体pAC L Fc上 ,转染昆虫sf 9细胞 ,利用杆状病毒 昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达 ,免疫沉淀试验鉴定它的抗蛋白。结果 分离到一株Fab克隆AAVs 31,腺病毒伴随病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性 ,间接免疫荧光试验呈阳性 ,序列分析结果表明是一新的序列 ,所获得的基因为人源IgGFab基因 ,由Gamma链和Kappa链组成。表达的全抗体ELISA反应、免疫荧光反应和间接免疫荧光试验均为阳性 ,免疫沉淀试验结果显示它结合病毒颗粒 ,不结合任一VP1、VP2、VP3单独衣鞘蛋白。结论 用噬菌体表面表达技术首次获得了抗腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段 ,并在真核系统中表达了其全抗体 。 姚李四 王涛 梁米芳 袁振华 纪燕 吴小兵 李德新