周荆荣
- 作品数：50 被引量：42H指数：4
- 供职机构：湖北省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划农业部全国畜牧总站动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 凹玻片
- 凹玻片,玻片下凹部平面呈跑道形,底面呈长弧面。本凹片用于显微镜、显微镜注射转基因或微量细胞培养,细胞集中并分散在底面一条线上便于观察、操作或寻找。
- 郑新民魏庆信樊俊华周荆荣
- 文献传递
- Cre-LoxP重组系统删除内源性选择标记基因的效能评价被引量：10
- 2014年
- 选择标记的使用和残留可引起消费者对转基因生物环境安全和产品安全的担忧,建立消除选择标记的有效对策甚为必要.本研究的目标是评价Cre-LoxP重组系统删除内源性选择标记基因的效能,为猪安全转基因研究提供实验依据和技术支撑.本文所用的打靶载体ΔMSTN含有LoxP位点锚定的选择标记表达框(LoxP-CMV-NeoR-IRES-EGFP-LoxP).经电穿孔将该打靶载体导入猪肾PK15细胞,经G418筛选,获得稳定整合该载体、EGFP表达均一的单克隆细胞系.将Cre重组酶表达载体pTurbo-Cre导入该细胞系,借助流式分选(FACS)、终点PCR、荧光定量PCR、TA克隆与测序等手段,证明Cre-LoxP重组系统可在猪细胞内高效介导内源性选择标记基因的删除反应,EGFP水平的删除效率达到46.1%,DNA水平的删除效率则达到97%.本文的研究结果为消除选择标记的安全隐患提供了可靠的解决方案,为建立猪安全转基因技术提供了重要的科学依据.
- 王志蕊刘西梅周荆荣郑新民魏庆信董发明毕延震
- 关键词：CRELOXP绿色荧光蛋白删除
- 湖北白猪IGF-1基因的克隆及序列分析(英文)
- 2011年
- [目的]以湖北白猪肝脏作为试验材料,克隆出湖北白猪胰岛素生长因子(IGF-1)基因,并对其序列进行分析。[方法]采用Trizol法从湖北白猪的肝脏中提取总RNA,将其作为RT反应的模板,用P2(5'-CAGGTAACTCGTGCAGAGCAAAGGA-3')引物合成IGF-1基因cDNA第一链,以其产物为模板,再以P1(5'-CCCATCTCCCTGGATTTCTTTTTG-3')和P2为上下游引物扩增到大小约为607bp的产物,并将其克隆至pCRII载体上,经蓝白斑筛选、酶切、测序。[结果]经筛选、酶切、序列分析,表明该片段为IGF-1基因的cDNA克隆,它由607个核苷酸组成,其中1～145位是5'端非翻译区,从第146位ATG起始密码子开始至第538位TAG终止密码子,539～607位是3'端非翻译区,包含一完整的ORF,该ORF共有393核苷酸,编码一个推断由130个氨基酸组成的多肽。与GenBank中的序列比较,该序列与Muller等报道的猪IGF-1基因编码序列完全同源。[结论]成功克隆了湖北白猪IGF-1基因,并对其进行序列分析,证实了IGF-1基因的高度保守性,为采用转基因技术对湖北白猪进行育种奠定了基础和提供了技术依据。
- 乔宪凤张立苹毕延震刘西梅华文君华再东肖红卫周荆荣郑新民
- 关键词：湖北白猪IGF-1基因
- 利用混合注射提高转HSA基因小鼠效率的研究
- 本研究采用将无基因的序列CIT987SK-384D8(30号)和结构特异的内切酶基因hFEN1(36号)与人的HSA的cDNA(26号)进行混合注射来制备转HSA小鼠动物模型,旨在提高转HSA基因效率。结果表明：无基因的...
- 李莉郑新民晓红周荆荣
- 关键词：转基因技术动物模型
- 文献传递
- 猪胃蛋白酶原A基因cDNA的克隆及其表达被引量：1
- 2006年
- 根据GenBank中发表的猪胃蛋白酶原A(pepsinogen)基因序列设计引物,采用RT-PCR技术,成功获得了猪胃蛋白酶原A基因,该基因全长1 240 bp,将该基因克隆到表达载体pPIC3.5K的EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点构建重组表达质粒,通过电转化方法将重组质粒转化毕赤酵母GS115,检测结果表明猪胃蛋白酶原A基因在毕赤酵母中得到了表达.
- 乔宪凤刘西梅安立国华文君周荆荣郑新民
- 关键词：克隆毕赤酵母
- 携带人血清白蛋白cDNA的逆转录病毒质粒载体的构建
- 2000年
- 采用粘平端定向基因克隆技术 ,成功地构建了携带HSAcDNA基因片段的重组逆转录病毒质粒载体GINHSAa。经限制性酶切鉴定和菌落原位杂交证明HSAcDNA已克隆到G1Na当中并得到
- 邱松波郑新民曹军平华文君乔宪凤赵浩斌肖作焕周荆荣李莉魏庆信
- 关键词：生物制品逆转录病毒重组人血清白蛋白
- 提高转HSA基因小鼠效率的研究
- 2005年
- 将无基因的序列CIT987SK-384D8(30号)和结构特异的内切酶基因hFEN1穴36号雪与HSA的cDNA(26号)进行混合注射来制备转HSA小鼠动物模型,旨在提高转HSA基因效率。结果表明:无基因的序列CIT987SK-384D8对HSA的整合基本无影响穴P>0.05雪,结构特异的内切酶基因hFEN1可以显著提高转HSA基因效率穴P<0.01雪。
- 李莉郑新民褚晓红周荆荣
- 关键词：小鼠
- 乙型脑炎新型疫苗的研究进展被引量：4
- 2005年
- 流行性乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)是一种严重危害人畜健康的虫媒病毒。目前对该病尚无特效的治疗方法,主要靠疫苗接种预防该病的发生。传统的乙脑弱毒苗和灭活苗在控制和预防乙脑的过程中发挥着重要作用,但二者都存在缺点,因此研制和开发乙脑的新型苗成为近十几年JEV研究的重点。目前研究的新型疫苗主要包括基因工程亚单位疫苗、合成肽疫苗、JEV重组活疫苗以及核酸疫苗,就这些新型高效疫苗研究的进展作一综述。
- 乔宪凤刘西梅华文君郑新民周荆荣
- 关键词：乙型脑炎病毒基因工程疫苗
- 体外生产猪原核期胚胎的初探被引量：1
- 2011年
- 初步研究了在体外生产猪的原核期胚胎。结果表明:将在体外成熟培养44 h的卵母细胞移植入发情当日的母猪体内,同时进行人工授精,受精后16 h冲出胚胎,获得同期原核期胚胎的效率最高,可以降低多精入卵的发生率。
- 肖红卫郑新民刘西梅乔宪凤李莉张立苹张立苹华文君毕延震周荆荣
- 关键词：卵母细胞体外成熟原核胚胎
- 猪肌生成抑制素(MSTN)基因cDNA克隆及序列分析被引量：5
- 2010年
- 利用GenBank中猪肌生成抑制素(MSTN)编码序列设计引物,以湖北白猪背最长肌肌细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术,扩增出MSTN基因cDNA片段。该片段全长1277bp,包含猪MSTN基因的全部编码序列。将所得片段与pUCm-T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道的一致。
- 乔宪凤刘西梅华文君周荆荣刘中华张立萍肖红卫华再东李莉郑新民
- 关键词：MSTN基因MYOSTATINCDNA片段RT-PCR技术GENBANK
