吴杰群
- 作品数:7 被引量:4H指数:1
- 供职机构:广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 从甘油富集菌宏基因组中克隆甘油脱水酶基因被引量:4
- 2006年
- 采用一种简便快速的方法从经甘油富集培养的土样中提取出质量较好宏基因组DNA。然后以此DNA为模板,以扩增肺炎克雷伯氏菌、弗氏柠檬酸菌和丁酸梭菌甘油脱水酶基因的引物进行PCR,分别扩增出目的条带,并将其克隆至T载体中。进行测序分析显示,PCR扩增出来的片段与其引物相应的甘油脱水酶序列同源性分别达到99%,90%和99%。这表明克隆出来的这3个基因为相应的甘油脱水酶基因。
- 吴杰群周文广杨登峰齐向辉韦宇拓黄日波
- 关键词:宏基因组甘油脱水酶基因克隆
- 一步法发酵葡萄糖生成1,3-丙二醇的基因工程菌的构建及分子改性
- 1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PDO)是一种重要的化工原料,1,3-PDO 不仅是良好的溶剂、抗冻剂、保护剂,而且还是合成许多缩聚物的单体,如新型聚酯材料-聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)在很多领...
- 齐向辉韦旭钦杨登峰吴杰群孟晓蕾唐悦梁甜杜丽琴韦宇拓黄日波
- 关键词:一步发酵法1,3-丙二醇葡萄糖基因工程菌
- 文献传递
- 甘油脱水酶的理性设计:基因杂合改善酶的性质被引量:1
- 2006年
- 1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,越来越受到广泛的关注.以弗氏柠檬酸菌和克雷伯氏菌的总DNA以及宏基因组为模板,克隆并表达了3个不同来源的甘油脱水酶基因,前两者均有活力,而后者则没有活力.为了改造甘油脱水酶使其更有利于工业化生产,通过同源建模(homology modeling)构建了这3个甘油脱水酶的三维结构,并利用一些生物信息学软件对这3个甘油脱水酶进行亚基之间的杂合改组(gene swapping)的理性设计,根据设计结果对这3种不同来源的甘油脱水酶的大、中小亚基基因分别进行了克隆.通过基因交换的方法对甘油脱水酶大、中小亚基进行了杂合,得到6种异源亚基杂合酶.部分杂合酶的酸碱稳定性、热稳定性及Vmax得到了明显的改善,同时杂合改组使本没有活力的来源于宏基因组的甘油脱水酶具有了活力而且杂合酶的热稳定性也得到了显著提高.根据构建的三维结构分析了结构差异对酶学性质的影响.
- 齐向辉罗兆飞吴杰群孟晓蕾唐悦韦宇拓黄日波
- 关键词:甘油脱水酶宏基因组基因置换杂合酶
- 产气荚膜梭菌甘油脱水酶及其激活因子基因的鉴定
- 甘油脱水酶(glyceroldehydratase,EC4.2.1.30)能催化甘油和1,2-丙二醇转化为相应的醛。近来,由于其作为由生物转化法生产1,3-丙二醇(工业上有重要用途的化工材料)的限速酶而成为研究热点。现在...
- 吴杰群
- 关键词:丙二醇产气荚膜梭菌甘油脱水酶
- 文献传递
- 宏基因组中不依赖辅酶B12甘油脱水酶基因的筛选和表达
- 2013年
- 通过特定的引物,以土壤宏基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得3.3 kb的DNA片段,该片段连接于pSE380载体构建重组质粒pSE380-dhaB12用于测序和表达。序列分析表明,该DNA片段编码的氨基酸序列与已报导的丁酸梭菌不依赖辅酶B12甘油脱水酶的相似性达99%。通过IPTG诱导,dhaB12基因在大肠杆菌中表达成功,SDS-PAGE分析表明有88 kD和34 kD两条蛋白质条带,在没有辅酶B12存在的情况下,所表达的酶具有明显的甘油脱水酶活性。
- 韦旭钦陈云来吴杰群韦宇拓杜丽琴黄日波
- 关键词:宏基因组甘油脱水酶