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应用λgtll构建Hela细胞cDNA文库的研究: cDNA文库的构建是分子生物学研究中一项必不可少的工作.从cDNA文库中可以挑选出你所感兴趣的任何一种蛋白质的基因.该实验以Hela细胞为材料,通过异硫氰酸胍-苯酚-氯仿抽提法提取了总RNA,经寡聚脱氧胸苷纤维素柱(Ol...; 吴丹; 关键词：HELA细胞 CDNA文库 DAF

沙门氏菌临床检测比较研究被引量：4: 1997年; 比较研究了临床检测沙门的三种不同方法，采用聚合酶链反应技术，玻片免疫凝集试验和生化检测方法对３０份样品检出阳性率分别８３％、７３％和３０％。; 李景鹏李成梅何成强吴丹张建光; 关键词：聚合酶链反应免疫沙门氏菌

猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆与原核表达: 猪细小病毒(porcine parnvovirus,PPV)是引起猪繁殖障碍的主要病原之一。该病主要表现为胚胎和胎儿的感染和死亡,而母体通常缺乏临床症状。近几年来,PPV感染呈上升趋势,给全球养猪业带来巨大的经济损失。目...; 吴丹童光志仇华吉薛强周艳君李景鹏; 文献传递

几种表达系统的比较被引量：36: 2002年; 随着蛋白质工程和DNA重组技术的发展 ,许多有应用潜力的蛋白分子有待开发。不同蛋白在不同系统中表达水平有显著差异 ,所以选择一种合适的表达系统对蛋白表达水平非常关键。对细菌、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞 4种表达体系作一概述 ,并讨论各自优缺点及常见问题。; 吴丹仇华吉童光志; 关键词：大肠杆菌酵母昆虫细胞哺乳动物细胞

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在酵母系统中的表达: 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种以妊娠母猪晚期流产、早产、产死胎和木乃伊胎,以及仔猪出现呼吸道症状和死亡率高等为特征的一种传染病,该病于80年代末首先在美国发现,其后大部分欧洲国家和部分亚洲国家也相继都发生了此病。现...; 钱平童光志仇华吉王云峰周彦君刘光清吴丹薛强陈焕春; 文献传递

应用聚合酶链反应技术检测沙门氏菌被引量：2: 1998年; 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测沙门氏菌，使用了２对引物ＨＩ和ｐｈｏＰ。ＨＩ引物对各长２０ＮＴ，根据鞭毛Ｉ相抗原基因自行设计，扩增序列长２６９ｂｐ；ｐｈｏＰ引物对各长２１ＮＴ，根据ｐｈｏＰ／ｐｈｏＱ基因设计，扩增片段长２９９ｂｐ。ＰＣＲ采用５０μＬ反应体系。ｄＮＴＰＳ各１００μｍｏｌ／Ｌ，引物各１μｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ２＋２．５ｍｍｏｌ／Ｌ，酶２Ｕ。三温段ＰＣＲ循环条件为：９７℃预变性７ｍｉｎ；９４℃变性６０ｓ、５５℃复性４０ｓ、７２℃延伸６０ｓ，３５个循环；７２℃延伸７ｍｉｎ。检测８株标准阳性菌，结果都出现了ＨＩ引物和ｐｈｏＰ引物特异带，标准阴性菌３株只出现ｐｈｏＰ特异带，说明ＨＩ引物特异性很强。; 李景鹏李成梅虞塞明何成强丁乃峥吴丹; 关键词：聚合酶链反应沙门氏菌 PCR 兽医诊断学

猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆与原核表达被引量：6: 2003年; 根据猪细小病毒 (porcineparvovirus ,PPV)NADL 2株非结构蛋白基因NS1序列设计引物 ,扩增出了PPVSY 99株的NS1基因 ,将其克隆到原核表达载体pET2 8a中 ,得到重组质粒SYNS1/pET2 8a。将SYNS1/pET2 8a转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,经IPTG诱导 ,使PPVNS1基因获得了表达 ,运用ELISA和Westernblotting证实了表达产物的特异性。经表达产物细胞定位分析 ,表达的NS1蛋白是以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变诱导时间或诱导剂IPTG的浓度 ,确定了表达NS1蛋白的最佳诱导条件 :IPTG终浓度为 0 .6mmol·L-1,诱导时间为 3h ,在大肠杆菌中最高表达含量为 17.8%。亲和层析后 ,得到了纯化的NS1蛋白 ,在Westernblotting检测中 ,纯化蛋白大大降低了反应背景。表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂来检测PPV的发生。; 吴丹童光志仇华吉薛强周艳君李景鹏; 关键词：细小病毒非结构蛋白原核表达

猪细小病毒NS1基因与VP2基因的克隆、表达及VP2基因免疫的研究: 猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）感染是一种严重危害养猪业的病毒性疾病,广泛分布于世界各地,至今尚未得到有效的控制.因此研制有效疫苗来防制该病依然是一项十分紧迫的任务.NS1蛋白是PPV的非结构蛋...; 吴丹; 关键词：猪细小病毒 NS1基因 VP2基因基因免疫

高活性酪蛋白抗氧化肽的两步法制备技术: 本发明公开的是高活性酪蛋白抗氧化肽的两步法制备技术。第一步，按照质量体积比为4％～6％(W/V)配制酪蛋白的水溶液，调节溶液pH值至5.0～8.0，加入木瓜蛋白酶；溶液保持在40℃～50℃下反应1小时～5小时，然后100...; 赵新淮吴丹; 文献传递

猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆及序列分析: 猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起猪繁殖障碍的主要病原之一。该病主要表现为胚胎和胎儿的感染和死亡,而母体通常缺乏临诊症状。近几年来,PPV感染呈扩大上升的趋势,给全球养猪业带来巨大的经济损失...; 吴丹仇华吉李昌文薛强周艳君童光志李景鹏韩孝成刘慧敏; 文献传递

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吴丹