单娟
- 作品数：4 被引量：20H指数：3
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 恒河猴外周血调节性T淋巴细胞的分离纯化及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别采用非人灵长类Tregs分离试剂盒的生物素标记的混合抗体和磁珠标记的抗生物素抗体阴性分选,以及大鼠抗人CD4-活化蛋白C(activatedprotein C,APC)和抗APC多选试剂盒中的磁珠标记的抗APC抗体阳性分选出CD4+T淋巴细胞,比较两种方法获得细胞的得率、活性及纯度;选择得率、活性和纯度较高的分选方法获得的CD4+T淋巴细胞,用磁珠标记的抗人CD25抗体进行阳性分选,获得CD4+CD25+Tregs,流式细胞仪检测纯度、活性及FoxP3表达水平,以及Tregs对刀豆蛋白(concanavalinA,ConA)刺激的自体CD4+CD25-效应性T淋巴细胞(effective T cells,Teffs)增殖的抑制功能。结果 CD4+T淋巴细胞阳性分选和阴性分选后,细胞活性均达95%左右,差异无统计学意义(P>0.05),但阳性分选后CD4+T淋巴细胞得率和纯度均显著高于阴性分选(P<0.05)。后续CD4+CD25+Tregs分选采用阳性分选法获得的CD4+T淋巴细胞。经双阳性分选收集的目的细胞中CD4+CD25+Tregs占76.2%±8.6%,活细胞比例为93.3%±4.7%,FoxP3阳性细胞比例为74.2%±6.9%。混合培养后Tregs均对ConA刺激的Teffs的增殖有抑制作用。结论免疫磁珠双阳性分选法能有效分选出恒河猴外周血中有功能的CD4+CD25+Tregs。
- 张爽金熙程汉佳何斯荣陈又南龙丹单娟曾力王成世程惊秋陆燕蓉
- 关键词：调节性T淋巴细胞免疫磁珠分选恒河猴
- 汶川特大地震极重灾区危重症医疗救治的绩效评价被引量：7
- 2012年
- 目的回顾性分析评价2008年5月12日汶川特大地震后3个月内极重灾区危重症医疗救治的绩效,为全球地震医学救援降低死亡率、伤残率,提高康复率提供决策参考。方法查找并分析评价所有与本研究目的相关的回顾性分析、原始研究和二次研究。结果①据不完全统计,震后72小时极重灾区自救伤员共30620人,其中危重伤员数占住院伤病员总人数的22%。②地震极重灾区市属、近灾区市属、省属和部属医疗机构院内危重伤员死亡率依次为12.21%、4.50%、2.50%、2.17%。③二线医院收治住院的躯干、四肢和部位不详骨折、危重伤和其他伤员人数高于一线医院,伤情更重。④震后4个月,转运到三线医院的10373名稳定期伤员出院99.07%,死亡率0.017%。结论①汶川地震极重灾区危重伤员救治基本形成"上级帮下级,重灾区帮极重灾区,一般灾区帮重灾区和极重灾区,极重灾区以自救互救为主"的医疗救治模式。②对极危重伤员采取"四集中"治疗能有效降低死亡率,使重伤员院内死亡比例由15.06%降至2.9%以下。③在准确伤情信息指导下及时、科学、规范的现场分检后送是降低伤残率和死亡率的关键。汶川特大地震极限条件下极重灾区危重症伤员的救治工作还有很大改进空间。
- 姜洁李幼平黄晓林李冰苏林钟大可师成虎李明旭单娟陈尹
- 关键词：汶川特大地震危重症绩效评价
- 不同途径过继回输致耐受树突状细胞延长小鼠移植心脏存活研究的系统评价被引量：4
- 2012年
- 目的系统评价采用不同途径过继回输致耐受树突状细胞(tolerogenic dendritic cells,Tol-DCs)对移植心脏存活的影响及可能机制。方法计算机检索PubMed、EMbase和ISI,查找关于过继回输Tol-DCs对移植物存活影响的动物实验,检索时限均从建库至2011年3月5日。参照循证医学系统评价的方法,以同种异体移植心脏存活时间为终点指标,分析Tol-DCs对移植心脏存活的影响;通过整合纳入文献信息,总结Tol-DCs延长移植物存活的机制。结果最终纳入44篇文献,含4种Tol-DCs诱导方式,包括过继回输基因修饰、药物干预、细胞因子诱导及其他源性(脾源、肝源)Tol-DCs。纳入研究多数采用一次性尾静脉输注2×106Tol-DCs。我们采用森林图呈现实验组和未处理组移植心脏存活时间,半定量评价4种诱导方式产生的Tol-DCs对移植心脏存活时间的影响。结果显示4种Tol-DCs均能有效延长移植心脏的存活时间,基因修饰组平均延长存活时间为22.02±21.9 d(3.2倍于对照组),药物诱导组为25.94±16.9 d(4.3倍),细胞因子诱导组为9.00±8.13 d(1.9倍),其他源性Tol-DCs组为10.69±9.94 d(2.1倍)。与英文摘要保持一致:过继回输Tol-DC延长移植物存活的机制有:(1)诱导T细胞低反应性(MLR);(2)削弱对移植物的细胞毒性杀伤效应(CTL);(3)诱导T细胞向2偏移(CK)(;4)诱生Treg。结论对MHC全错配近交系同种异体心脏移植受者小鼠,过继回输基因修饰、药物干预、细胞因子诱导及其他源性(脾源、肝源)Tol-DCs均可显著延长移植物存活或诱导免疫耐受。其中以基因修饰和药物诱导的Tol-DCs延长存活时间效果最为显著,且过继回输基因修饰的可靠性和稳定性强于药物诱导。
- 吴文桥单娟李幼平罗蕾孙桂香周彦妮杨彤夏梦娟郭颖嘉冯莉
- 关键词：心脏移植
- 移植排斥治疗中不同免疫抑制剂对调节性T细胞活化及功能的影响:结合基础和临床的系统评价被引量：6
- 2010年
- 目的系统评价不同免疫抑制剂对调节性T细胞活化及功能的影响。方法计算机检索Cochrane Library(2009年第4期)、MEDLINE(1966～2009.11)和EMbase(1980～2009.11),收集所有相关临床和基础研究。以移植受者外周血调节性T细胞含量、急排发生率、移植物功能作为临床研究的分析指标;以调节性T细胞的增殖活性、抑制活性、表型及可能机制作为基础研究的分析指标分析纳入文献并进行方法学评价及数据分析。结果共纳入42篇文献,其中临床研究19篇,基础研究23篇。涉及的免疫抑制剂有CNI、Rapa、MMF、IL-2受体阻断抗体、共刺激通路封闭抗体、T细胞清除抗体;主要集中在CNI和Rapa两类免疫抑制剂上。8个关于Rapa与CNI比较的基础研究显示:Rapa能够增强调节性T细胞的增殖活性及抑制功能,而CNI则会抑制其增殖。5个关于Rapa与CNI比较的临床研究(共158例肾移植受者)显示:Rapa组移植受者外周血调节性T细胞含量高于CNI组,但两组间随访6～42个月移植物功能无明显差异。结论 Rapa能够增强调节性T细胞的增殖活性及功能,但增加的调节性T细胞与移植物功能间并未显示出相关性,这不排除是样本量少和随访时间短引起的偏倚。因此,还需要更多大样本长时间的高质量研究以证实或否定上述结论。
- 张春桃单娟冯莉卢俊肖政罗蕾李成文郭颖嘉李幼平
- 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞免疫抑制剂
