千年松 作品数:80 被引量:307 H指数:8 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市科技新星计划 解放军总医院临床科研扶持基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 交通运输工程 更多>>
流式细胞分选术和Rho123在分离MHCC97肿瘤干细胞中的应用 被引量:9 2007年 目的:肝癌组织中可能存在具有表型和功能特殊的肝癌细胞,分离和鉴定这群细胞是否具有干细胞特征对阐明肝癌发病机制、揭示肝癌复发和转移具有重要的意义。寻求分离MHCC97肿瘤干细胞的有效方法,探讨角蛋白(CK-19)在不同肝癌细胞亚群中的表达差异。方法:实验于2006-11/2007-05在解放军第四军医大学免疫实验室和肝胆外科实验室完成。细胞来源:MHCC97肝癌细胞(人高转移肝癌细胞系)由上海复旦大学中山医院肝癌研究所提供。实验方法:MHCC97细胞常规消化,HBSS洗涤,制备成单细胞悬液,细胞密度为1×109L-1。每份取1×106个细胞,参考Rho123对线粒体膜电位测定的0.1mg/L质量浓度,分别做0.1mg/L和0.05mg/L两个质量浓度细胞梯度染色,对照组加入维拉帕米(终浓度50mmol/L),以未加Rho123作为阴性对照。实验评估:采用免疫细胞化学方法观察细胞角蛋白19在0.05mg/LRho123细胞及0.1mg/LRho123两组中的表达和含量。结果:单纯加入Rho123组有一低荧光拖尾,而维拉帕米拮抗组无此区域,即0.05mg/LRho123细胞占总数的2.1%,其余为0.1mg/LRho123组细胞。两组细胞内均有细胞角蛋白19阳性表达,阳性反应为显示位于细胞质的棕黄色颗粒,两组比较有统计学差异(P<0.05)结论:细胞角蛋白19在肝癌细胞亚群中表达有差异,强阳性多数分布在0.05mg/LRho123组中,Rho123结合流式细胞分选术可以有效地分选出癌细胞中的肿瘤干细胞。 曹云新 千年松 杨安钢 胡金涛关键词:罗丹明123 肿瘤干细胞 CK-19 大鼠肝癌肺转移灶中边缘群细胞的分离与表型鉴定 2009年 目的:建立肝癌远处器官转移灶中边缘群肝癌细胞的分离方法并对其干细胞特征进行鉴定.方法:利用二乙基亚硝胺(DEN)建立大鼠肝癌肺转移灶模型;组织块原代培养法扩增培养肺转移灶中的肝癌细胞,对细胞进行Ho-echst33342及不同荧光标记的c-kit,Sca-1mAb染色后,利用流式细胞仪(FACS)分选肝癌肺转移灶中的边缘群及非边缘群细胞,并分析两群细胞表面干细胞标志物的表达特征;软琼脂克隆形成分析两群细胞的肿瘤形成能力.结果:成功建立大鼠肝癌肺转移灶模型,并在此基础上获得性质较为均一并可稳定传代的肺转移肝癌细胞株;FACS分析表明边缘群细胞占肺转移肝癌细胞总细胞量的0.5%,边缘群细胞表面c-kit表达率为85%,Sca-1表达率为75%,而非边缘群细胞表面c-kit及Sca-1表达率分别仅为8%和3%;软琼脂克隆实验结果表明边缘群细胞平均克隆形成率为69.9%,非边缘群细胞平均克隆形成率为15.3%,边缘群细胞肿瘤形成能力显著高于非边缘群细胞(P<0.01).结论:肺转移肝癌细胞中的边缘群细胞具备显著的肿瘤干细胞特征. 张佳斌 窦科峰 李韧 刘正才 宋文杰 千年松 于恒超关键词:肝细胞 肿瘤转移 肿瘤干细胞 肝移植术后真菌感染的诊断和治疗 2009年 目的探讨肝移植术后肺部真菌感染的早期诊断及治疗方法,合理应用抗真菌药物,以达到良好治疗目的。方法回顾性分析我院肝移植中心1997年7月至2008年7月实施的156例肿移植患者发生真菌感染的情况。结果156例肝移植患者,有14例发生真菌感染,占9.0%;死亡7例,占50.0%。其中白色念珠菌3例,热带念珠菌2例,曲霉菌8例,毛霉菌1例。感染部位主要为肺部(8/14,57.1%),血液(5/14,35.7%)和腹腔(1/14,7.1%),泌尿系统少见(0/14.0%)。氟康唑治疗有效者占23.1%,伊曲康唑治疗有效者占7.7%,卡泊芬净治疗有效者7.7%,总有效率为53.8%。结论肝移植术后真菌感染的发生率较高,依据影像学检查和病原学检查等可早期诊断真菌感染,及时选用氟康唑、伊曲康唑及卡泊芬净等药物早期治疗是治愈真菌感染的关键。 千年松 陶开山 帝振宇 汤雨 季茹 杨建栋 李琳 窦科峰关键词:肝移植 受体 真菌感染 肝移植后受者真菌感染的易感因素分析 被引量:2 2011年 肝移植为治疗终末期肝病的有效手段.肝移植受者术后常继发真菌感染,其发生率为4%~48%,而病死率则高达50%~80%.探讨其易感因素,对真菌感染的预防及早期诊断,对提高疗效具有重要意义. 千年松 陶开山 帝振宇 汤雨 季茹 杨建栋 李琳 窦科峰关键词:继发真菌感染 肝移植受者 易感因素 移植后 终末期肝病 21例Mirrizzi综合征的诊断与治疗效果探讨 被引量:7 2007年 目的探讨Mirrizzi综合征的诊断与治疗效果。方法回顾性分析21例Mirrizzi综合征患者的临床资料,对其诊断及手术方式进行总结。结果按Csendes分型。Ⅰ型10例,Ⅱ型6例,Ⅲ型4例,Ⅳ型1例。21例行胆囊切除、瘘口修补或胆肠Roux-en-Y吻合术。结论Mirrizzi综合征术前诊断困难,选择不同的手术处理方式,可收到良好效果。 千年松 窦科峰关键词:MIRRIZZI综合征 手术治疗 病理特点 抗原提呈细胞亚群预测肝癌患者的免疫治疗疗效研究 被引量:1 2024年 背景原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者中免疫治疗应用广泛,但需寻找有效的疗效预测标志物,以此提供个体化和精准化的治疗。目的探讨抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC)亚群与HCC患者免疫治疗的疗效关系。方法前瞻性纳入2022年5月—2023年9月在解放军总医院第五医学中心初次接受免疫治疗的中晚期HCC患者,通过流式细胞仪检测免疫治疗前的B细胞/淋巴细胞(B/LYM)、巨噬细胞/所有核细胞(MA/TNC)和树突细胞/所有核细胞(DC/TNC)的比值。根据均值将患者分为高水平组和低水平组,并比较两组间无进展生存期(progression free survival,PFS),并通过Cox分析影响PFS的因素。最后利用ROC曲线预测疾病控制的效能。结果共纳入84例患者,中位年龄为57岁;男性58例,女性26例。APC亚群基线数据:B/LYM均值为16.54%±6.27%,MA/TNC均值为9.14%±2.87%,DC/TNC均值为0.051%±0.021%。Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析显示B/LYM高值组的mPFS显著高于低值组(5.90个月vs 5.50个月,P=0.019;HR=0.588,95%CI:0.358~0.966),MA/TNC低值组的mPFS显著高于高值组(7.20个月vs 5.40个月,P=0.034;HR=0.617,95%CI:0.374~1.019),DC/TNC高值组的mPFS显著高于低值组(6.30个月vs 5.50个月,P=0.026;HR=0.615,95%CI:0.378~0.955)。且高水平的MA/TNC是疾病进展的独立危险因素,高水平的DC/TNC、B/LYM是疾病进展的保护因素。基线B/LYM、MA/TNC、DC/TNC对HCC患者接受2周期治疗后的疾病控制情况而言,具有较好的预测效能,且联合应用时效能进一步提高,AUC分别为0.685、0.723、0.745、0.865。结论高DC/TNC、B/LYM水平和低MA/TNC水平的HCC患者,可能更容易从免疫治疗中获益。 高舒玥 程家敏 赵飞宇 千年松关键词:抗原提呈细胞 肝癌 免疫治疗 血清miR-29a-5p和miR-222的表达与肝癌的诊断和预后的关系 被引量:3 2013年 目的:研究血清中miR-29a-5p和miR-222表达与肝细胞肝癌(HCC)的诊断价值和预后的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)对比检测76例HCC患者、62例肝良性疾病患者和60例健康对照组血清中miR-29a-5p和miR-222水平。分析miR-29a-5p和miR-222的表达与患者临床病理参数以及肝癌切除术预后的关系。结果:HCC患者血清miR-29a-5p和miR-222表达明显高于良性肝病和正常对照组(P<0.05),与AFP、肿瘤大小、癌栓、病理分化、TNM分级有关(P<0.05)。HCC患者中miR-29a-5p和miR-222低表达组的复发转移率显著低于高表达组,其术后生存率也显著高于高表达组(P<0.05)。结论:血清miR-29a-5p和miR-222与HCC的临床病理特征密切相关,不仅是潜在的HCC早期检测指标,且miR-29a-5p和miR-222在HCC患者血清中表达上调与HCC复发转移率高及预后差密切相关,提示其也可能是判断HCC手术预后的分子标志物。 徐飞 李硕 杨凡 王岩 向昕 千年松 李玉关键词:肝细胞癌 血清 MIR-222 普通外科肿瘤病人术后手术部位感染的易感因素分析 被引量:6 2011年 目的:探讨普外肿瘤病人术后手术部位感染(surgical site infection,SSI)的相关易感因素。方法:回顾性分析我院普外科2008年9月-2010年9月实施的638例肿瘤病人手术部位发生感染的情况。结果:638例肿瘤病人,有61例发生SSI,占9.6%。单因素分析显示SSI与手术类别、手术时间、术前预防性应用抗生素、切口类型、术前白蛋白水平、手术方式及ASA分级有明显相关性(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示术前白蛋白水平、切口类型及ASA分级是诱发普外肿瘤病人SSI的独立高危因素(P<0.05)。结论:切口类型、术前白蛋白水平以及ASA分级是SSI的独立危险因素,针对以上高危因素及早采取合理、有效的防治措施是减少普外肿瘤病人SSI的关键。 杨凡 王宇 段宝玲 孙巧慧 李武平 千年松 廖永晖 任彦顺关键词:易感因素 普通外科 肿瘤 Doublecortin样激酶-1在消化道肿瘤中的研究进展 被引量:4 2017年 Doublecortin样激酶-1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)最初是在神经系统中发现的一种跨膜微管相关蛋白激酶,具有调节微管聚合以及促进神经元迁移的功能。近年来,随着DCLK1在消化道恶性肿瘤中的研究,其被认为是一种在恶性肿瘤形成和发展中发挥重要作用的蛋白质。此外,DCLK1可以通过调控多种mi RNAs促进上皮间质转化,进而促进肿瘤的侵袭和转移。研究DCLK1在恶性肿瘤中发挥的作用及机制并特异性阻断其分子机制,或许可以成为一种治疗肿瘤的新方法。 樊梦娇 千年松 戴广海关键词:消化道肿瘤 干细胞 肿瘤干细胞 肿瘤免疫治疗相关炎性副反应及其治疗策略综述 被引量:4 2023年 近年来,免疫治疗已经在临床得到了广泛应用,在不同瘤种治疗中都取得了显著效果。然而,我们也不应忽略免疫治疗作为双刃剑,亦能诱导各种炎性副反应,不仅减弱了免疫治疗疗效,导致免疫治疗的中止,也限制了免疫治疗与传统放化疗联合的开展。基于炎症在肿瘤发生、发展和治疗所有阶段的重要作用,炎症靶向治疗联合免疫治疗将不仅能减轻免疫治疗炎性副反应,且有可能提高新一代免疫疗法的疗效,为长期、多层次的肿瘤治疗提供新的可能性。本文主要介绍免疫治疗相关炎性副反应和相应机制的研究进展,探讨减轻炎性副反应的最新抗炎策略,从而为规避免疫治疗缺陷,最大程度发挥免疫治疗作用提供依据。 陈东亚 陈昭光 杨凡 千年松