刘定燮
- 作品数：30 被引量：59H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞凋亡信号的基本转导通路被引量：11
- 1999年
- 在诱导细胞凋亡过程中，许多细胞外刺激常共用一段相同的信号转导路径，可称之为凋亡的基本信号通路。ＴＮＦ受体家族如ＴＮＦ受体及Ｆａｓ受体在与相应的配体结合后，通过蛋白死亡区的相互作用，激活ＩＣＥ蛋白酶家族；活化的蛋白酶引起多种底物如核酸酶抑制剂、细胞骨架蛋白等的降解，导致细胞出现凋亡的生化及形态学改变。
- 刘定燮骆抗先
- 关键词：细胞凋亡信号传导
- Fas抗原在病毒性肝炎病理中的作用及意义被引量：1
- 1997年
- Fas抗原-配体系统可能是病毒性肝炎肝细胞凋亡信号的主要传导途径。在乙型肝炎和丙型肝炎中,Fas抗原-配体系统所起的作用并不相同。Fas抗原介导的凋亡可能是丙型肝炎主要的病理过程。乙型肝炎肝组织的损伤虽然主要由免疫因素介导,但Fas抗原的表达水平可用来评价其炎症的活动程度或治疗的效果。
- 刘定燮王昌才
- 关键词：FAS抗原细胞凋亡病毒性肝炎病理
- 单质粒模式诱导表达载体系统的建立被引量：2
- 2003年
- 在Invitrogen公司T Rex诱导表达系统的基础上,将目的基因与调控蛋白基因克隆于同一载体上,并在CV1细胞中观察了四环素对该单质粒模式载体报告基因表达的诱导效应.载体在瞬时转染CV1细胞并以四环素诱导 2 4h后目的基因的表达水平提高了 8 9倍。
- 刘定燮周晓巍黄培堂
- 关键词：四环素
- 乙型肝炎病毒C区蛋白在肝癌细胞株中的表达被引量：1
- 2002年
- 用PCR法获得编码乙型肝炎病毒C区不同蛋白的基因,利用基因重组技术构建表达这些蛋白的真核表达载体,并在高分化肝癌细胞株HepG2中进行了稳定表达。
- 刘定燮戴琳骆抗先
- 关键词：乙型肝炎病毒基因表达肝肿瘤
- 头尾串联双拷贝HBVDNA重组体的构建被引量：1
- 1999年
- 为构建含筛选基因并能在转染细胞内建立HBV复制状态的真核表达载体，利用BamHI与BglH粘端互补的特点，将经BamHI线性化的HBVDNA（adr亚型）克隆于表达新霉素基因的载体pcDNA3的BamHI与BglII位点间，获得含头尾串联双拷贝HBV基因组的重组质粒。
- 刘定燮骆抗先
- 关键词：基因重组乙型肝炎病毒质粒
- 反基因策略——基因治疗的新方向被引量：1
- 1996年
- 自1980年Cline用重组β珠蛋白基因治疗两名β地中海贫血患者以来,基因治疗在取得众多成就的同时也暴露出一些问题。安全方面的风险及转移基因表达的不稳定性使基因替代疗法还远达不到人们最初所预想的效果。基因原位修复虽是基因治疗最理想的途径,但目前在技术上还很难做到。相比之下,反义治疗在现阶段可能是较好的方向,因为反义核酸具有传统药物的使用方便和容易大量生产等优点。
- 刘定燮王昌才
- 关键词：基因治疗三链DNA反义治疗RNA聚合酶靶序列体外转录
- 乙型肝炎病毒S区蛋白肝癌细胞株的稳定表达被引量：1
- 2001年
- 构建了乙肝病毒S区不同蛋白的重组真核表达质粒pcLS2、pcLS4,并转染肝癌细胞株HepG2。转染细胞经新霉素筛选后,获得稳定表达S区不同蛋白的细胞株。Westernblotting可分别检测到相对分子质量为39000的大蛋白及24000的主蛋白在pcLS2、pcLS4稳定转染的细胞中表达。免疫组化实验显示这些蛋白均主要呈细胞质分布。
- 刘定燮戴琳骆抗先
- 关键词：乙型肝炎病毒基因表达肝肿瘤
- 三链DNA的形成抑制转录因子与乙肝病毒核衣壳启动子的结合
- 1997年
- 合成的寡核苷酸可缠绕于DNA双螺旋大沟内并以氢键与其相互作用形成三链DNA结构,这类寡核苷酸常简称为TFO(triplex-form-ing oligonucleotide)。通过TFO与靶基因结合形成局部的三链结构来抑制基因转录的技术被称为反基因策略(antigene strategy)。我们选择乙肝病毒(HBV)核衣壳启动子(Cp)内一近似同聚嘌呤·同聚嘧啶序列(1734～1754,ayw亚型,以EcoR Ⅰ切点为+1)为靶序列。
- 刘定燮王昌才钟雄林
- 关键词：乙肝病毒三链DNA启动子核衣壳脱氧寡核苷酸DNA双螺旋
- 离子对嘌呤·嘌呤-嘧啶型三链DNA稳定性的影响
- 1997年
- TFO(triplex-forming oligonucleotide)缠绕于Waston-Crick双螺旋大沟中并以Hoog-steen或反Hoogsteen氢键与其相互作用所形成的三股螺旋结构称为三链DNA。根据结构及碱基组成的不同可将它分为嘌呤(R)·嘌呤(R)-嘧啶(Y)(R·RY)和嘧啶·嘌呤-嘧啶(Y·RY)两种类型。离子对Y·RY型结构稳定性的影响已较为清楚,但对R·RY型尚未作系统研究。我们以乙肝病毒(HBV)
- 王昌才刘定燮钟雄林
- 关键词：三链DNA离子对嘧啶脱氧寡核苷酸分子生物学研究
- 乙肝表面抗原及恶性疟疾杂合抗原基因的重组克隆
- 1997年
- 乙型肝炎及疟疾流行全世界,是严重危害人类健康的传染病。由于疟疾的抗药性不断出现,乙肝缺乏有效的治疗措施,对于两种疾病疫苗的研究具有重要意义。我们将乙肝表面抗原与恶性疟杂合抗原基因串联,再与质粒pCITE2b重组,构建重组质粒,试图通过基因工程的方法得到既能对抗乙肝又能对抗恶性疟疾的疫苗。 首先用PCR方法从HBV(adr亚型)基因组中扩增出编码HBsAg的S基因。
- 于欣欣钟雄林王昌才陈仕荣刘定燮
- 关键词：乙肝表面抗原恶性疟疾抗原基因重组克隆分子生物学研究重组子
