全越
- 作品数:9 被引量:46H指数:5
- 供职机构:黑龙江八一农垦大学食品学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省科技攻关计划黑龙江省农垦总局科技攻关项目黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 燕麦麸皮球蛋白的糖基化结构修饰及功能性变化被引量:11
- 2017年
- 在氨基葡萄糖存在的条件下,利用转谷氨酰胺酶(transglutaminase,TG)对燕麦麸皮球蛋白糖基化结构修饰,进而探讨糖基化蛋白功能性质与结构之间的关系。结果表明,糖基化交联球蛋白的溶解性、乳化稳定性、起泡性及泡沫稳定性相比于未修饰的球蛋白都有明显的改善,但表面疏水性明显下降;另外,酶促糖基化球蛋白的变性温度和焓变值都有所下降,其二级结构变化为:α-螺旋结构相对含量呈增加趋势,β-折叠和β-转角结构相对含量呈下降趋势,无规卷曲结构相对含量几乎没变。经糖基化处理的球蛋白酪氨酸分子主要呈现"暴露态",色氨酸相对拉曼强度更趋近于"包埋态"。酶促糖基化球蛋白二硫键振动模式为t-g-t。通过对球蛋白、修饰球蛋白的功能特性与空间构象的比较分析,明确TG催化葡萄糖结合在燕麦麸球蛋白上,进一步明晰修饰蛋白功能特性与空间构象之间的构效关系。结果可为延长杂粮产业链提供良好的理论依据,同时可以为今后制备燕麦蛋白特定产品进行分子设计和重组提供基础数据。
- 王长远全越李玉琼冯玉超曹龙奎张东杰
- 关键词:燕麦麸皮球蛋白转谷氨酰胺酶功能特性
- 深黄被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤氏酵母SMD1168中表达的研究
- 2016年
- 引物根据△6-脂肪酸脱氢酶(D6D)基因以及酵母蛋白表达载体pGAPZctA的多克隆位点进行引物设计,并在上游插入ECoRI位点、下游插入XhoI位点,从深黄被孢霉中克隆D6D基因,构建pMD18-T-D6D载体与pGAPZtxA—D6D载体。将重组质粒线性化,并将其电转导入到毕赤氏酵母(PichiapastorisSMD1168)中,Zeocin抗生素筛选高拷贝转化子,对重组菌进行诱导表达。经过Tricine—SDS—PAGE分析和蛋白质免疫印迹(Westernbloting)试验,证明△6-脂肪酸脱氢酶融合蛋白具有免疫学活性。结果成功构建了重组酵母pGAPZdA—SMD1168,为利用基因工程菌生产y-亚麻酸(GLA)奠定理论基础。
- 王长远全越沈冰蕾姚笛于长青
- 关键词:深黄被孢霉
- 响应面法优化超声辅助芸豆蛋白糖基化反应被引量:7
- 2016年
- 目的响应面法优化超声辅助芸豆蛋白糖基化反应。方法利用超声波辅助机制,对芸豆蛋白进行糖基化改性。通过单因素试验,在确定反应温度、超声功率、超声时间、p H、芸豆蛋白与氨基葡萄糖质量比、芸豆蛋白浓度对反应接枝度影响的基础上,通过Design-Expert 8.0.6.1软件做响应面分析。结果最终确定最佳反应条件为:反应温度70℃,超声功率270 W,超声时间40 min,p H 9.75,芸豆蛋白与氨基葡萄糖质量比1∶2,芸豆蛋白浓度9 mg/ml;在此条件下进行验证试验,接枝度为39.576 1%,与模型所得理论接枝度(39.631 0%)相差0.054 9%。结论成功优化了超声辅助芸豆蛋白糖基化反应,确定了最佳工艺,为改善芸豆蛋白的功能性以拓宽其应用范围提供了参考。
- 李玉琼王长远全越冯玉超
- 关键词:氨基葡萄糖超声波辅助芸豆蛋白响应面法
- 芸豆蛋白与糖基化芸豆蛋白结构与功能特性研究被引量:13
- 2019年
- 方法:将芸豆蛋白与氨基葡萄糖进行糖基化反应,通过糖基化和辅助糖基化对芸豆蛋白结构修饰,研究其对功能性质的影响。目的:探讨糖基化蛋白功能性质与结构之间的关系。结果:糖基化改性使芸豆蛋白的溶解性、乳化性、起泡性均有明显改善,利用超声辅助糖基化芸豆蛋白和糖基化芸豆蛋白的溶解性、乳化性、起泡性分别提高了17.30%,10.10%,20.89%,12.59%,2.5%,1.25%;而泡沫稳定性、表面疏水性和热变性温度均有所降低,分别下降了14.23%,9.73%,280Ho,110Ho与3.1,1.95℃。与芸豆蛋白相比较,其二级结构上α-螺旋和β-折叠呈增加趋势,β-转角结构和无规则卷曲呈下降趋势。经糖基化处理的芸豆蛋白分子呈易结合状态,更易暴露蛋白质分子结构内部的结合位点。结论:通过对芸豆蛋白和改性芸豆蛋白的功能性质与空间构象的比较分析,明确糖基化处理可使蛋白质分子链内部外露,糖基化改性对芸豆蛋白二级结构主链有影响。这为制备芸豆蛋白特定产品以及分子设计和重组提供了依据。
- 冯玉超王长远李玉琼李玉琼全越
- 关键词:芸豆蛋白糖基化功能特性超声辅助
- Osborne分级法提取燕麦麸球蛋白的响应面分析被引量:7
- 2015年
- 对Osborne分级法提取燕麦麸球蛋白的条件进行优化,确定球蛋白最佳提取方案。以提取液盐浓度、提取料液比、提取温度、提取时间,四个因素为自变量,球蛋白的提取率为响应值,设计试验方案。通过Design-Expert8.0.6.1软件做响应面分析,得球蛋白最佳提取参数为:盐浓度1.21 mol/L,料液比1:15.9,提取温度26.39℃,提取时间2.04 h,球蛋白提取率为55.87%。在最优条件下,进行验证试验得球蛋白提取率为54.84%,与理论结果基本相符,测得蛋白纯度为83.07%。为燕麦麸皮球蛋白进一步的研究提供理论基础。
- 全越王长远
- 关键词:燕麦麸球蛋白提取率
- 响应面优化转谷氨酰胺酶催化燕麦麸皮球蛋白糖基化接枝条件被引量:3
- 2016年
- 以燕麦麸皮球蛋白为主要原料,采用单因素和响应面法优化接枝条件,利用转谷氨酰胺酶(TG)修饰制备具有高接枝度的糖基化燕麦麸皮球蛋白。实验结果表明,当氨基糖与蛋白浓度比为0.94∶1、TG酶添加量57.59 U/g、p H值7.65、时间4 h、温度45℃时,糖基化燕麦麸皮球蛋白的接枝度为45.6774%,与响应面方法预测结果相似。此时蛋白体系中的游离氨基为0.3790 mol/kg,修饰蛋白交联体系较好,适于燕麦麸皮蛋白深加工产品开发应用。
- 全越王长远李玉琼
- 关键词:转谷氨酰胺酶糖基化响应面
- pH处理对米糠蛋白理化特性及结构的影响被引量:7
- 2015年
- 目的分析pH处理对米糠蛋白理化特性及结构的影响。方法制备米糠蛋白,经不同pH值的缓冲液处理后,分别采用福林酚法、ANS荧光探针法、DNTB法、荧光光谱法、SDS-PAGE法检测米糠蛋白的溶解性、表面疏水性、游离巯基含量、蛋白质三级结构和亚基组成。结果 pH为4、6时,米糠蛋白的溶解性最低;而pH<4和pH>6时,米糠蛋白的溶解性均有不同程度的升高,且在碱性条件下,米糠蛋白的溶解性比在酸性环境中更好。米糠蛋白的溶解性与表面疏水性、游离巯基含量呈正相关。pH处理对米糠蛋白的荧光光谱有一定影响,使其微环境发生了变化。在酸性环境中,米糠蛋白的亚基组成有明显变化,高相对分子质量的亚基解聚为低相对分子质量的亚基;而中性及碱性环境对米糠蛋白的亚基组成无影响。结论本实验分析了pH处理对米糠蛋白溶解性、表面疏水性、游离巯基、荧光光谱和亚基组成的影响,为米糠蛋白在食品工业中的应用提供了参考。
- 王长远全越许凤张敏
- 关键词:米糠蛋白PH值理化特性
- 万寿菊残渣中挥发油的提取及抑菌方法研究
- 2012年
- 用微波辅助萃取万寿菊残渣中的挥发油,并对挥发油抑制活性实验进行了研究,应用单因素实验研究了温度、料液比、时间对抑菌效果的影响,确定抑菌最优条件:在料液比1:6、微波炉功率为中火时,提取60s。通过对MIC的测定,得到微波萃取法提取的挥发油对酵母菌、金黄色葡萄球菌的MIC最小,对大肠杆菌的MIC最大。
- 全越
- 关键词:万寿菊挥发油