任艳
- 作品数：56 被引量：133H指数：6
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响
- 研究结核分支杆菌Rv2031c 基因对小鼠巨噬细胞对RAW264.7 细胞凋亡的影响.根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c 的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv 株灭活的菌液上清液为模版,扩...
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 小反刍兽疫病毒重组抗原间接ELISA检测及初步应用被引量：2
- 2010年
- 为了建立一种快速、特异、敏感的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血清学检测方法,本研究将PPRV血凝蛋白(H)和核蛋白(N)克隆至pET28a(+)载体进行诱导表达,并将2种蛋白Ni柱纯化后包被ELISA反应板,建立起检测PPRV特异性抗体的间接ELISA法。结果表明在E.coli BL21(DE3)中表达出2种PPRV蛋白,将2种重组蛋白纯化后按照1:1比例混合,制备PPRV鸡尾酒抗原,成功建立了特异性强、敏感性高的PPRV间接ELISA法;最后用建立的方法对新疆伊犁、塔城、阿勒泰和喀什边境地区采集的325份山羊、789份绵羊和132份牛血清进行了抗体检测,检测结果显示均为阴性,提示在我国新疆边境地区反刍动物尚未发生PPRV感染,但需要及时进行免疫接种以建立预防PPRV从国外传入的免疫带。本研究建立的PPRV间接ELISA法为该病毒的检测提供基础,也为该病的科学防控提供参考。
- 孟庆玲才学鹏倪伟任艳李贞刘佳旭乔军
- 关键词：小反刍兽疫间接ELISA竞争ELISA
- 基于重组蛋白SP41的布鲁氏菌间接ELISA检测方法的建立及初步应用被引量：6
- 2010年
- 对布鲁氏菌黏附素SP41蛋白进行表达、纯化,以表达重组蛋白为包被抗原,建立了检测布鲁氏菌病绵羊血清抗体的间接ELISA方法。克隆布鲁氏菌SP41基因,PRC、酶切、测序鉴定正确后,构建pET-32a(+)-SP41原核表达载体,转化表达菌E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达重组SP41蛋白,纯化表达产物后包被酶标反应板,方阵滴定法进行最佳血清稀释度和最侍抗原浓度的筛选,结果显示重组蛋白SP41最佳抗原包被浓度为0.6mg/L,最佳血清稀释度为1:50。交叉试验、阻断试验、重复性试验表明,该方法重复性好、特异性强。利用此方法检测217份绵羊血清样本,结果表明该方法的阳性检出率要高于虎红平板试验和试管凝集试验。
- 张辉陈创夫乔军王远志曹旭东任艳
- 关键词：布鲁氏菌间接ELISA
- 表达大肠杆菌K88ac-STⅡ的口服沙门氏菌活苗的动物免疫试验
- 为评价我们构建的表达产肠毒素大肠杆菌K88ac—STⅡ融合基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌重组活菌苗对这两种引起幼畜腹泻的病原的免疫保护效果,本实验通过重组菌的安全性检查、重组菌的动物免疫、抗体检测、大肠杆菌和沙门氏菌最小致死量...
- 王鹏雁陈创夫张再超毛志福任艳
- 关键词：沙门氏菌大肠杆菌免疫试验
- 文献传递
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响
- 研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞对RAW264.7细胞凋亡的影响。根据Gen Bank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv...
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 文献传递
- 沙门菌LAMP可视化检测方法的建立与应用被引量：6
- 2018年
- 建立沙门菌病原体的一种可目视化环介导等温扩增技术(LAMP),实现对沙门菌的高效快捷检测。针对沙门菌的invA基因的高度保守区域,设计一套特异性引物,优化LAMP扩增反应体系和条件,并对该方法的特异性、灵敏性和人工污染样品以及临床样品分别进行检测。与传统的细菌分离与鉴定、PCR和real-time PCR方法进行敏感性比较。该方法优化后的最佳反应体系为内外引物浓度比例为3∶1,dNTPs为2.5μL,MgSO_4为1.5μL,2.5μL甜菜碱(10mol/L),1μL Bst 2.0DNA聚合酶,在62℃恒温条件下反应50min,可以特异性检出沙门菌,而对其他非沙门菌病原的检测结果为阴性。该方法的最低检测线为1.0×10~2 CFU/mL,灵敏度是常规PCR检测方法的1 000倍,与real-time PCR方法的灵敏度基本接近;针对人工污染沙门菌的鱼粉其检测灵敏度为5.0×10~2 CFU/mL;对临床样品的检出率为65.4%,与传统检测方法的检出率一致。本研究建立的LAMP检测沙门菌的方法特异性强、灵敏度高、操作简便、效能高和可视化,为基层监管部门和畜牧兽医工作者对于沙门菌病原的监控和初步筛选提供了技术保障。
- 刘志科张洁杨宁宁徐锦凤徐明国荆明龙吴文星曹旭东任艳石峰陈创夫
- 关键词：沙门菌环介导等温扩增技术
- 山羊痘病毒疫苗株RR基因的克隆与序列分析
- 2009年
- 用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55,提取其基因组为模板,设计还原酶(RR)基因的特异引物进行PCR扩增,并克隆至pGEM-TEasy载体,蓝白斑筛选,酶切和测序签定,并对目的基因进行了序列分析。结果获得了RR基因的阳性克隆PGM-RR,DNA片段长度2 669 bp,内存在BglII等4个单一限制性内切酶酶切位点,编码区5′端含有早期转录终止信号TTTTTN(T)T。RR基因核苷酸和推测的氨基酸同源性与GENEBANK中发表的9个参考毒株的同源性分别在97%和99%以上,说明羊痘病毒RR基因具有高度的保守性。
- 李有文魏风陈创夫王远志张辉任艳郭志儒
- 关键词：山羊痘病毒
- 《分子病毒学》课程教学改革初探
- 2014年
- 该文探讨对硕士研究生《分子病毒学》课程教学大纲、教学课件、教学方法、考核方式等方面的改革，改变传统教学方式，使研究生系统掌握病毒学的基本概念、基本理论和研究方法熟悉本学科领域的热点及最新的科研成果，培养研究生科学和创新思维，提升研究生的学术创新能力。
- 乔军周霞任艳孟庆玲陈创夫
- 关键词：分子病毒学课程教学改革
- 羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞cDNA文库的构建被引量：2
- 2008年
- 目的构建羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。方法培养的绵羊肺泡巨噬细胞经羊种布鲁菌05/43株侵染后,以Trizol试剂提取其总RNA,用cDNA文库构建试剂盒构建巨噬细胞的cDNA文库。随机选取cDNA文库中的18个克隆进行表达序列标签(EST)序列测定,测序结果用BlastX和BlastN软件在GenBank蛋白质库和核酸库中进行序列同源性比对。结果构建的cDNA文库的库容量为1.192×106,重组率为95.65%。18个EST测序,12个与CD抗原基因、细胞因子基因、蛋白酶基因等已知功能的基因序列相关,6个为未知功能基因的EST序列。结论成功构建了羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,这将有助于阐明该菌株的致病机制。
- 王远志陈创夫曹旭东盛金良张辉任艳高剑峰王端明
- 关键词：基因文库
- 吐鲁番斗鸡与新罗曼鸡MAOA基因外显子区遗传多态分析
- 2021年
- 旨在把分子标记辅助选择应用于吐鲁番斗鸡攻击行为的选育。试验参照GenBank的鸡单胺氧化酶A(MAOA)基因DNA序列,利用软件Primer 5.0设计了10对引物,采用聚合酶链式反应-单链构象多态(PCR-SSCP)方法,对103只吐鲁番斗鸡和73只新罗曼鸡MAOA基因的10个外显子进行多态性检测分析。结果表明:MAOA基因的MAOA1、MAOA2、MAOA5、MAOA7扩增的片段检测到多态,其中引物MAOA1、MAOA5、MAOA7扩增的位点NC006088.5(25424-25662)、NC006088.5(34980-35257)、NC006088.5(38401-38613)在吐鲁番斗鸡和新罗曼鸡上均检测到多态,MAOA2引物扩增位点NC006088.5 (30260-30535)只在吐鲁番斗鸡上检测到多态。对检测到的多态性位点进行测序,经序列对比这些突变均为同义突变。经X2适合性检验表明,研究中出现多态性的基因位点的基因频率和基因型频率都符合Hardy-weinberg平衡状态(P>0.05)。用X2独立性检验表明,研究中出现多态性的基因位点的基因型的构成,与品种间有极显著性差异(P<0.01),说明MAOA基因与鸡的攻击行为有一定的联系。
- 刘秀霞廖凯任艳廖和荣
- 关键词：吐鲁番斗鸡单胺氧化酶A多态突变
